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ATCC CHO/DHFR細胞株之正確轉染
產品(pin)名稱:ATCC CHO/DHFR細胞
中文名稱(cheng):非洲綠猴腎細(xi)胞
種屬(shu):非洲(zhou)綠(lv)猴
來(lai)源:腎;SV40轉化;雌性
培(pei)養條(tiao)件:DMEM+10%胎牛血(xue)清(qing)
生長狀態(tai):貼壁生長
2017年新學期,迎著朝陽,放飛夢想,久別重逢,相聚一堂,百尺竿頭,更進一步,學無止境,自立自強,為國爭光,慧穎細胞庫為答謝各位莘莘學子的厚愛,在新學期開學之際,將1223株細胞特惠出售,更多活動詳情,請致電市場部!
ATCC CHO/DHFR細胞株(zhu)之(zhi)正確轉(zhuan)染
常規轉(zhuan)(zhuan)染(ran)技術分為(wei)穩定(ding)轉(zhuan)(zhuan)染(ran)(*轉(zhuan)(zhuan)染(ran))和瞬時轉(zhuan)(zhuan)染(ran)兩(liang)類。穩定(ding)轉(zhuan)(zhuan)染(ran)是指外源DNA 既(ji)可以整合(he)到(dao)宿(su)主(zhu)染(ran)色(se)體(ti)中(zhong),也可能作為(wei)一種(zhong)游離體(ti)存(cun)在。瞬時轉(zhuan)(zhuan)染(ran)則指外源DNA/RNA 不整合(he)到(dao)宿(su)主(zhu)染(ran)色(se)體(ti)中(zhong),一個(ge)(ge)宿(su)主(zhu)細胞(bao)中(zhong)可存(cun)在多個(ge)(ge)拷貝數,產生(sheng)高(gao)水平的(de)表達,但通常只(zhi)持(chi)續幾天(tian),多用于啟(qi)動子(zi)和其它調控元(yuan)件的(de)分析。
轉染(ran)方(fang)(fang)法不同,對轉染(ran)結果影響很大。常見的轉染(ran)方(fang)(fang)法有:
1. 磷酸鈣(gai)法(fa):該方法(fa)利用磷酸鈣(gai)DNA 復合(he)物吸附(fu)細(xi)胞膜被細(xi)胞內吞原理得到瞬時或穩定轉染結(jie)果,操作簡便(bian)但重復性差,不可(ke)用于(yu)原代細(xi)胞的轉染。
2. DEAE-右旋糖(tang)苷(gan)法(fa)(fa):帶正電的(de)DEAE-右旋糖(tang)苷(gan)與(yu)核酸(suan)帶負電的(de)磷酸(suan)骨架相互作用形成的(de)復(fu)合物(wu)被細胞內(nei)吞,可(ke)用于瞬(shun)時(shi)轉染(ran),方法(fa)(fa)相對簡便、結果可(ke)重復(fu)但(dan)對細胞有一(yi)定的(de)毒副作用。
3. 電穿孔法(fa):利用高(gao)脈沖電壓破壞細(xi)(xi)(xi)胞膜(mo)電位,DNA通(tong)過(guo)膜(mo)上形成的小孔導入。穩(wen)定轉(zhuan)染,瞬時轉(zhuan)染均(jun)適用。適用性廣(guang)但細(xi)(xi)(xi)胞致死(si)率高(gao),DNA 和細(xi)(xi)(xi)胞用量大(da), 需根據(ju)不同細(xi)(xi)(xi)胞類型(xing)優(you)化電穿孔實驗條件。
4. 病毒介導法:通(tong)過侵(qin)染(ran)宿主細胞(bao)(bao)將(jiang)外源(yuan)基因整合到(dao)染(ran)色體中(zhong)。適用于穩定轉染(ran),可用于難(nan)轉染(ran)的細胞(bao)(bao)、原代細胞(bao)(bao),體內細胞(bao)(bao)等。
5. 陽離子脂(zhi)(zhi)質體(ti)法:帶(dai)正電的(de)脂(zhi)(zhi)質體(ti)與(yu)核(he)酸帶(dai)負電的(de)磷酸基團形成復合物(wu)被細胞內吞從(cong)而(er)形成穩定轉染或瞬(shun)時性轉。該方法適用性廣,轉染效(xiao)率高,重復性好(hao),但轉染時需除血(xue)清。轉染效(xiao)果隨細胞類(lei)型變化大。
6. 顯微注射法(fa):用(yong)顯微操作將DNA 直接(jie)注入靶細(xi)胞(bao)核(he),適(shi)用(yong)于(yu)穩定轉(zhuan)(zhuan)染(ran)和瞬時轉(zhuan)(zhuan)染(ran),轉(zhuan)(zhuan)染(ran)細(xi)胞(bao)數(shu)有限,多用(yong)于(yu)工程(cheng)改造或轉(zhuan)(zhuan)基(ji)因動(dong)物(wu)的胚胎細(xi)胞(bao)。
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CT26.CL25 小(xiao)鼠結腸(chang)癌(ai)細胞 小(xiao)鼠 結腸(chang)癌(ai); BALB/c 1640 貼壁
C166 小鼠血(xue)管內(nei)皮細胞(bao) 小鼠 血(xue)管內(nei)皮 DMEM 貼壁
A375SM 人惡性(xing)黑色(se)素瘤細胞 人 黑色(se)素瘤;女性(xing) DMEM 貼壁
HKBML 人(ren)原(yuan)發中樞淋(lin)巴(ba)瘤細胞 人(ren) 腦;淋(lin)巴(ba)瘤;男性 1640 懸浮
ATCC CHO/DHFR細(xi)胞(bao)株之(zhi)正確(que)轉染(ran)
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