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HFOB 1.19細胞之正確轉染
產品名稱:HFOB 1.19細胞
中(zhong)文(wen)名稱:人(ren)SV40轉染成(cheng)骨(gu)細(xi)胞
種(zhong)屬:人
來源:成骨細(xi)胞;SV40轉化;條件永生;女性(xing)
培養(yang)條件:DMEM/F12 +10%胎牛血清
生(sheng)長(chang)狀態:貼壁(bi)生(sheng)長(chang)
2017年新(xin)學(xue)期,迎著朝陽,放飛夢想,久別(bie)重逢,相聚一堂(tang),百尺(chi)竿頭(tou),更進一步,學(xue)無止境,自(zi)立(li)自(zi)強,為國(guo)爭光(guang),慧(hui)穎(ying)細胞庫為答(da)謝各位莘莘學(xue)子的厚愛(ai),在新(xin)學(xue)期開學(xue)之(zhi)際(ji),將1223株(zhu)細胞特惠出售(shou),更(geng)多活動詳情,請致電(dian)市場部(bu)!
HFOB 1.19細胞之正確轉染
常規轉(zhuan)(zhuan)染(ran)(ran)(ran)(ran)技(ji)術分為(wei)(wei)穩(wen)定轉(zhuan)(zhuan)染(ran)(ran)(ran)(ran)(*轉(zhuan)(zhuan)染(ran)(ran)(ran)(ran))和瞬時(shi)轉(zhuan)(zhuan)染(ran)(ran)(ran)(ran)兩類。穩(wen)定轉(zhuan)(zhuan)染(ran)(ran)(ran)(ran)是(shi)指(zhi)外源DNA 既(ji)可(ke)以(yi)整合(he)到宿主(zhu)染(ran)(ran)(ran)(ran)色(se)體(ti)(ti)中,也可(ke)能作為(wei)(wei)一種游離體(ti)(ti)存在。瞬時(shi)轉(zhuan)(zhuan)染(ran)(ran)(ran)(ran)則指(zhi)外源DNA/RNA 不整合(he)到宿主(zhu)染(ran)(ran)(ran)(ran)色(se)體(ti)(ti)中,一個宿主(zhu)細胞中可(ke)存在多個拷貝(bei)數,產生高水平的(de)表達,但通常只持續幾天,多用(yong)于(yu)啟動子和其它調控(kong)元件的(de)分析。
轉染方(fang)法(fa)不同,對轉染結(jie)果影響(xiang)很大。常見的轉染方(fang)法(fa)有:
1. 磷酸鈣法:該(gai)方法利用磷酸鈣DNA 復(fu)合物(wu)吸(xi)附細(xi)(xi)胞(bao)膜(mo)被細(xi)(xi)胞(bao)內吞(tun)原理(li)得到瞬時或穩定轉染結果,操作簡便但重復(fu)性差,不可用于原代細(xi)(xi)胞(bao)的轉染。
2. DEAE-右旋糖苷法(fa):帶正(zheng)電的(de)DEAE-右旋糖苷與核酸帶負電的(de)磷酸骨(gu)架相(xiang)互作(zuo)用(yong)形(xing)成的(de)復合物(wu)被細胞(bao)內吞(tun),可(ke)用(yong)于瞬時(shi)轉染(ran),方法(fa)相(xiang)對(dui)簡便、結果可(ke)重復但(dan)對(dui)細胞(bao)有一定的(de)毒副(fu)作(zuo)用(yong)。
3. 電穿孔(kong)(kong)法:利用高脈(mo)沖電壓(ya)破壞細(xi)胞(bao)(bao)膜電位,DNA通過膜上(shang)形成的小孔(kong)(kong)導入。穩定(ding)轉(zhuan)染,瞬時轉(zhuan)染均適用。適用性(xing)廣但細(xi)胞(bao)(bao)致死率高,DNA 和細(xi)胞(bao)(bao)用量大, 需根據不同細(xi)胞(bao)(bao)類型優(you)化電穿孔(kong)(kong)實(shi)驗條件(jian)。
4. 病毒介導法:通過侵染宿(su)主細(xi)胞(bao)(bao)(bao)將外源基(ji)因整合到染色體中。適用于穩定轉(zhuan)染,可用于難轉(zhuan)染的細(xi)胞(bao)(bao)(bao)、原(yuan)代細(xi)胞(bao)(bao)(bao),體內細(xi)胞(bao)(bao)(bao)等。
5. 陽離子脂質體法:帶正電的脂質體與核酸帶負電的磷酸基團(tuan)形成復合(he)物被細胞內吞從而(er)形成穩定轉(zhuan)染或(huo)瞬時性轉(zhuan)。該(gai)方法適用性廣,轉(zhuan)染效率(lv)高,重復性好,但轉(zhuan)染時需除(chu)血(xue)清。轉(zhuan)染效果隨細胞類型變化大。
6. 顯微(wei)注射法:用顯微(wei)操(cao)作將DNA 直接注入靶細胞(bao)核,適用于穩定(ding)轉染(ran)和瞬時(shi)轉染(ran),轉染(ran)細胞(bao)數有(you)限,多用于工程改造或轉基因動物的胚胎細胞(bao)。
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