WISH細胞之(zhi)正(zheng)確轉(zhuan)染

產品名稱(cheng)：WISH細胞

中文(wen)名稱：人羊膜細胞

種(zhong)屬：人

來源：宮頸癌；女性

培養條(tiao)件：DMEM/F12 +10%胎牛血(xue)清

生長狀態：貼壁生長

2017年新學(xue)(xue)期(qi)，迎著朝陽，放飛夢(meng)想，久別重逢(feng)，相聚一(yi)堂，百尺(chi)竿頭(tou)，更進一(yi)步，學(xue)(xue)無止(zhi)境(jing)，自立(li)自強，為國爭光，慧穎細(xi)胞庫為答謝各(ge)位莘莘學(xue)(xue)子的厚愛，在新學(xue)(xue)期(qi)開學(xue)(xue)之際(ji)，將1223株(zhu)細胞特惠出(chu)售，更多活動詳情，請(qing)致電市場部(bu)！

WISH細胞之正確轉染

常規轉(zhuan)染(ran)(ran)技(ji)術分為(wei)穩定轉(zhuan)染(ran)(ran)（*轉(zhuan)染(ran)(ran)）和瞬(shun)時(shi)轉(zhuan)染(ran)(ran)兩類。穩定轉(zhuan)染(ran)(ran)是指外(wai)源DNA 既可(ke)以(yi)整(zheng)合(he)到宿(su)主(zhu)染(ran)(ran)色(se)體(ti)中，也可(ke)能作為(wei)一種游(you)離體(ti)存(cun)在(zai)。瞬(shun)時(shi)轉(zhuan)染(ran)(ran)則指外(wai)源DNA/RNA 不整(zheng)合(he)到宿(su)主(zhu)染(ran)(ran)色(se)體(ti)中，一個宿(su)主(zhu)細胞中可(ke)存(cun)在(zai)多個拷貝數，產生高水平的表達，但(dan)通常只持續幾天，多用于(yu)啟(qi)動子和其它調控(kong)元(yuan)件的分析。

轉(zhuan)染(ran)方法不同(tong)，對轉(zhuan)染(ran)結果(guo)影響很大(da)。常見的轉(zhuan)染(ran)方法有：

1. 磷(lin)酸(suan)鈣法：該方法利用(yong)磷(lin)酸(suan)鈣DNA 復合物吸(xi)附(fu)細(xi)胞(bao)膜被細(xi)胞(bao)內(nei)吞原理(li)得(de)到瞬時或穩定(ding)轉(zhuan)染(ran)結果(guo)，操作簡便(bian)但重(zhong)復性差，不(bu)可用(yong)于原代細(xi)胞(bao)的轉(zhuan)染(ran)。

2. DEAE-右(you)旋糖苷法：帶(dai)(dai)正(zheng)電的(de)(de)DEAE-右(you)旋糖苷與核酸帶(dai)(dai)負電的(de)(de)磷(lin)酸骨架相互作用(yong)形(xing)成的(de)(de)復(fu)合(he)物被細胞內吞，可(ke)用(yong)于瞬時轉染，方法相對(dui)簡(jian)便(bian)、結果可(ke)重復(fu)但對(dui)細胞有(you)一定的(de)(de)毒(du)副作用(yong)。

3. 電(dian)穿孔(kong)法：利(li)用(yong)(yong)高(gao)脈沖電(dian)壓破壞細胞(bao)(bao)(bao)膜電(dian)位，DNA通過膜上形(xing)成(cheng)的小(xiao)孔(kong)導入。穩定轉(zhuan)染，瞬時轉(zhuan)染均適(shi)用(yong)(yong)。適(shi)用(yong)(yong)性(xing)廣但細胞(bao)(bao)(bao)致死(si)率(lv)高(gao)，DNA 和(he)細胞(bao)(bao)(bao)用(yong)(yong)量大， 需根據(ju)不(bu)同細胞(bao)(bao)(bao)類型優化電(dian)穿孔(kong)實驗條件。

4. 病毒(du)介導法(fa)：通過(guo)侵(qin)染(ran)宿主細胞(bao)將外源(yuan)基因整(zheng)合(he)到染(ran)色體(ti)中(zhong)。適用于(yu)穩定轉染(ran)，可用于(yu)難轉染(ran)的細胞(bao)、原代細胞(bao)，體(ti)內細胞(bao)等。

5. 陽(yang)離子脂質體法(fa)：帶正電(dian)的(de)(de)脂質體與核(he)酸帶負電(dian)的(de)(de)磷酸基(ji)團形成復(fu)合物(wu)被細胞(bao)內吞從而(er)形成穩(wen)定轉(zhuan)(zhuan)染(ran)(ran)或瞬時性轉(zhuan)(zhuan)。該方法(fa)適用(yong)性廣，轉(zhuan)(zhuan)染(ran)(ran)效率高(gao)，重復(fu)性好，但轉(zhuan)(zhuan)染(ran)(ran)時需除血(xue)清。轉(zhuan)(zhuan)染(ran)(ran)效果隨細胞(bao)類型變(bian)化大。

6. 顯微注(zhu)射法(fa)：用(yong)顯微操作將(jiang)DNA 直接注(zhu)入靶細胞核，適用(yong)于穩定轉(zhuan)染(ran)和瞬時轉(zhuan)染(ran)，轉(zhuan)染(ran)細胞數有限，多用(yong)于工程改造(zao)或轉(zhuan)基(ji)因動物(wu)的胚胎細胞。

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