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SV-HUC-1細(xi)胞之(zhi)正確轉染
產品名稱(cheng):SV-HUC-1細胞(bao)
中(zhong)文名稱:人輸(shu)尿管上皮永生(sheng)化細(xi)胞
種屬:人(ren)
培養條件:F12K
生長(chang)狀(zhuang)態:貼壁生長(chang)
2017年新學(xue)期(qi),迎著朝陽(yang),放(fang)飛夢想(xiang),久別重逢,相聚(ju)一堂(tang),百尺竿(gan)頭(tou),更進一步(bu),學(xue)無(wu)止(zhi)境,自立(li)自強,為(wei)國爭光,慧穎細(xi)胞庫(ku)為(wei)答(da)謝各位莘莘學(xue)子的厚愛,在新學(xue)期(qi)開學(xue)之際(ji),將(jiang)1223株細胞特(te)惠出售,更多活動(dong)詳情,請致(zhi)電(dian)市場(chang)部!
SV-HUC-1細胞之正確轉染
常規轉(zhuan)染(ran)技(ji)術分為穩定(ding)轉(zhuan)染(ran)(*轉(zhuan)染(ran))和瞬時轉(zhuan)染(ran)兩類。穩定(ding)轉(zhuan)染(ran)是指外(wai)源(yuan)DNA 既可(ke)以整合(he)到宿主(zhu)染(ran)色(se)體(ti)中(zhong),也(ye)可(ke)能作(zuo)為一(yi)種游離體(ti)存在。瞬時轉(zhuan)染(ran)則(ze)指外(wai)源(yuan)DNA/RNA 不(bu)整合(he)到宿主(zhu)染(ran)色(se)體(ti)中(zhong),一(yi)個(ge)宿主(zhu)細胞中(zhong)可(ke)存在多(duo)個(ge)拷貝(bei)數(shu),產生高水平的表達,但(dan)通常只(zhi)持(chi)續(xu)幾(ji)天,多(duo)用于啟動子和其它調控元件的分析。
轉(zhuan)染方法不(bu)同,對(dui)轉(zhuan)染結果影(ying)響很大。常見的轉(zhuan)染方法有:
1. 磷酸鈣法:該方法利用磷酸鈣DNA 復(fu)合物吸附細胞膜被細胞內吞原理(li)得到瞬時(shi)或(huo)穩定(ding)轉染結果,操作簡便但重復(fu)性差(cha),不可用于原代細胞的轉染。
2. DEAE-右(you)旋(xuan)糖苷法(fa)(fa):帶正電的(de)DEAE-右(you)旋(xuan)糖苷與核酸(suan)帶負電的(de)磷酸(suan)骨(gu)架相互作用形(xing)成的(de)復合物被細胞內(nei)吞(tun),可用于瞬(shun)時轉(zhuan)染(ran),方法(fa)(fa)相對簡便(bian)、結果可重復但(dan)對細胞有一定的(de)毒副作用。
3. 電(dian)(dian)穿孔法:利用高脈(mo)沖電(dian)(dian)壓(ya)破壞細(xi)胞(bao)膜電(dian)(dian)位,DNA通過(guo)膜上形成的小(xiao)孔導入(ru)。穩定轉染,瞬時轉染均適(shi)(shi)用。適(shi)(shi)用性廣但(dan)細(xi)胞(bao)致死率高,DNA 和(he)細(xi)胞(bao)用量大, 需根據不(bu)同細(xi)胞(bao)類型優化電(dian)(dian)穿孔實(shi)驗條件。
4. 病(bing)毒介(jie)導法(fa):通過侵染(ran)宿主細(xi)胞(bao)將(jiang)外(wai)源基因整合到(dao)染(ran)色體(ti)中。適(shi)用(yong)于穩定轉(zhuan)(zhuan)染(ran),可用(yong)于難轉(zhuan)(zhuan)染(ran)的細(xi)胞(bao)、原代細(xi)胞(bao),體(ti)內細(xi)胞(bao)等。
5. 陽(yang)離(li)子脂質體(ti)法:帶正電的脂質體(ti)與核酸帶負電的磷酸基(ji)團形(xing)成復合物(wu)被(bei)細(xi)胞內吞從(cong)而形(xing)成穩定轉(zhuan)(zhuan)(zhuan)染(ran)或瞬時(shi)性(xing)轉(zhuan)(zhuan)(zhuan)。該方法適(shi)用性(xing)廣,轉(zhuan)(zhuan)(zhuan)染(ran)效率高(gao),重(zhong)復性(xing)好,但轉(zhuan)(zhuan)(zhuan)染(ran)時(shi)需除血(xue)清。轉(zhuan)(zhuan)(zhuan)染(ran)效果(guo)隨細(xi)胞類型變化大。
6. 顯微注(zhu)射法:用顯微操作將DNA 直接注(zhu)入靶(ba)細(xi)胞核,適用于(yu)穩(wen)定(ding)轉染(ran)和瞬時(shi)轉染(ran),轉染(ran)細(xi)胞數有(you)限,多(duo)用于(yu)工程改造或(huo)轉基因動物的胚胎細(xi)胞。
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