血清10099-141 2017年這(zhe)個夏天如何選(xuan)擇高品質(zhi)，放心使用(yong)的(de)血清？慧穎生物與您(nin)相伴(ban)，在(zai)實驗過(guo)程中助您(nin)一臂(bei)之力。

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胎(tai)(tai)牛(niu)血(xue)清FBS （fetal bovine serum）：心(xin)臟(zang)穿刺的方法采血(xue)。剖腹(fu)產胎(tai)(tai)牛(niu)，未(wei)接(jie)觸外界，血(xue)清中的抗體補體等對細胞生長的有害成分zui少。

新生(sheng)牛血清：出(chu)生(sheng)24小(xiao)時(shi)內

小牛血清CS(calf serum)：出生10-14天

馬血清HS(horse serum)

常用的血清廠家：GIBCO|SERANA|Bovogen|Gemini|Sigma|PAA|GE Hyclone

常(chang)用貨號:10099-141|16000-044|26140-079|10099-133|10010-147|10082-147|S-FBS-SA-015|S-FBS-AU-015|900-108|100-500|F2442|SH30084.03|SH30396.03|SH30070.03|SH30068.03等

血清的(de)溶(rong)解與(yu)保存

1、如果不用，先(xian)放置-80 ℃保(bao)存。

2、如果要(yao)用，可于4 ℃冰(bing)箱放(fang)置過夜，再在室溫(wen)溶解。

3、溶(rong)解好的血清應立(li)即分裝(zhuang)，-80 ℃保存。

4、保存于-80 ℃的血(xue)清解凍時應先與(yu)4 ℃冰(bing)箱(xiang)放(fang)置(zhi)過夜再在室(shi)溫溶(rong)解。切勿直接(jie)放(fang)在室(shi)溫溶(rong)解。

細胞傳代方法

根據細胞生長(chang)的恃點，傳代方法有(you)3種：

1．懸浮生(sheng)長細胞傳代

   離(li)心(xin)法(fa)傳(chuan)(chuan)代：離(li)心(xin)（1000轉/分）去上清(qing)，沉(chen)淀物加新培養液后(hou)再混(hun)勻傳(chuan)(chuan)代。

   直(zhi)(zhi)接(jie)傳代法(fa)：懸(xuan)浮細(xi)(xi)胞沉淀在瓶壁時，將上清培(pei)養液(ye)去除(chu)l／2一2／3，然后用吸管直(zhi)(zhi)接(jie)吹打(da)形(xing)成細(xi)(xi)胞懸(xuan)液(ye)再傳代。

2．半懸(xuan)浮生長細胞傳代（雜交瘤）

   此類(lei)細(xi)胞部(bu)分呈現貼(tie)壁生長現象(xiang)，但貼(tie)壁不牢，可用直(zhi)接(jie)吹

打(da)法(fa)使(shi)細胞從瓶(ping)壁脫落下來，進行傳代。

3．貼壁生長細胞傳(chuan)代

   采用酶消(xiao)化(hua)法(fa)傳代。常用的(de)消(xiao)化(hua)液有0.25％的(de)胰蛋白酶液。

細胞冷凍保存

1. 細胞應(ying)生長良好(hao)，處(chu)于對(dui)數(shu)生長期，密度(du)為80%左右。
   2.注意(yi)冷凍(dong)保護劑之品質。 DMSO質量要(yao)好，應(ying)無(wu)菌且無(wu)色。
   3.  冷凍保存(cun)之細(xi)胞濃度：一般成纖維細(xi)胞1~3 x 106 cells/ml，懸浮細(xi)胞 5~10 x 106cells/ml，上皮細(xi)胞 2~5 x 106 。

4.凍(dong)存(cun)液的(de)配方是： 60%無血(xue)清培養(yang)液 30%血(xue)清 10% DMSO

1. 冷凍方(fang)法:  4℃ 30-60 分鐘---> -80℃ 6H - 隔夜 ---> 液氮長期儲(chu)存。

之細胞生長減慢

提高血(xue)清濃度為15-20%；

提(ti)高接種密度；

細胞的離散度；

添加(jia)細胞生長因子(zi)；

之細胞不貼壁

胰蛋白(bai)酶(mei)消化過度；

支原體污(wu)染；

培養液中無貼壁因子

之細(xi)胞傳代(dai)過程(cheng)中(zhong)出現碎(sui)片、顆(ke)粒、小黑點的原因

排除細(xi)胞(bao)污染后(hou)主要(yao)有以下幾種(zhong)可能：

細胞(bao)長老(lao)了(le),傳代(dai)時細胞(bao)已100%滿度，細胞(bao)衰老(lao)；

消化時(shi)不*，吹打過度；

血清溶解時直接(jie)從(cong)-80℃放到37 ℃或(huo)室溫；

以上資料有上海(hai)慧穎生物市場部 王麗 編(bian)輯整理