Gibco 10099141 之胎牛血清沉淀

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Gibco 10099141 之胎牛(niu)血清(qing)沉淀 是什(shen)么？

血清中經常會出(chu)現肉眼可見(jian)的(de)沉淀，其(qi)成分(fen)有(you)多種類型，產(chan)生的(de)原因有(you)很多，主要有(you)纖維蛋白(bai)、磷(lin)酸(suan)鈣還有(you)一些其(qi)它成分(fen)。

1. 纖維蛋白（Fibrin）

血清(qing)中肉眼(yan)可(ke)(ke)見(jian)的(de)(de)沉(chen)淀物大多(duo)屬于(yu)這(zhe)一類(lei)型(xing)。由(you)于(yu)在生產過程(cheng)中，血清(qing)采集(ji)、過濾（3 次 0.1 μm過濾）和灌裝處(chu)(chu)理都是在低溫條(tiao)件(jian)下快速完成, 此時血清(qing)中纖維蛋(dan)白(bai)原（Fibrinogen）處(chu)(chu)于(yu)溶解狀態。但在解凍之后, 血清(qing)中纖維蛋(dan)白(bai)原往往會(hui)發生凝集(ji)，形成肉眼(yan)可(ke)(ke)見(jian)的(de)(de)沉(chen)淀。

2. 磷酸鈣（Calcium Phosphate）

這(zhe)是(shi)(shi)一種(zhong)常(chang)見的(de)(de)沉淀成(cheng)分(fen)，通常(chang)會造成(cheng)血清出現云霧狀渾濁(zhuo)。當產品在 37℃保存(cun)時，這(zhe)種(zhong)現象尤其明(ming)顯(xian)，在倒置顯(xian)微鏡下可觀(guan)察(cha)到小(xiao)黑點的(de)(de)存(cun)在。這(zhe)些(xie)小(xiao)黑點在布朗運動(dong)的(de)(de)作用下四處游動(dong)，常(chang)被誤認為是(shi)(shi)微生(sheng)物污染。

3. 其他(ta)成分（Other）

血(xue)清中的其他(ta)成(cheng)分也會形(xing)(xing)成(cheng)沉淀(dian)，例(li)如膽(dan)固(gu)醇形(xing)(xing)成(cheng)的油脂滴和其他(ta)蛋白(bai)沉淀(dian)等。

Gibco 10099141 之胎牛血(xue)清沉淀會影響細胞培養(yang)嗎？

1. 細胞(bao)生長

我們在出(chu)廠(chang)前都會(hui)(hui)對血清(qing)進行一系(xi)列質檢測試，確保血清(qing)質量(liang)達到嚴(yan)格標(biao)準(zhun)。血清(qing)測試和細胞培養經驗也表明，其沉(chen)淀(dian)(dian)成分不會(hui)(hui)影(ying)響血清(qing)作為細胞培養添加物(wu)的(de)(de)表現。這一點得到了眾多(duo)客戶和其他血清(qing)供(gong)應商的(de)(de)肯(ken)定。解(jie)凍之后(hou), 血清(qing)中纖維蛋白原往(wang)往(wang)會(hui)(hui)發生凝集，形成肉眼可見的(de)(de)沉(chen)淀(dian)(dian)。

2. 懷疑污染

磷(lin)酸(suan)鈣顆粒(li)經(jing)常(chang)會(hui)被當成微生(sheng)物污(wu)染(ran)而引發不必要的(de)擔憂。一般(ban)情況下，當操作人(ren)員融化血(xue)清后注意到有霧狀渾濁(zhuo)時，常(chang)將其存(cun)(cun)放在 4℃冰(bing)箱中(zhong)觀察，并考慮接下來(lai)是否繼(ji)續(xu)使用。但這(zhe)樣會(hui)使沉淀進(jin)一步(bu)增多，反而會(hui)使血(xue)清更(geng)加渾濁(zhuo)，進(jin)而誤以(yi)為存(cun)(cun)在血(xue)清污(wu)染(ran)。并且，在倒置顯微鏡下，可在血(xue)清中(zhong)觀察到四(si)處游動(dong)的(de)小黑點（磷(lin)酸(suan)鈣顆粒(li)的(de)布(bu)朗運動(dong)），更(geng)容(rong)易使人(ren)誤以(yi)為存(cun)(cun)在微生(sheng)物污(wu)染(ran)。

為防止這類誤解的(de)產(chan)生，我們不(bu)建議客(ke)戶培(pei)養(yang)血(xue)清來(lai)驗(yan)證(zheng)是否存在污(wu)染(ran)，而是將血(xue)清直接接種在細菌培(pei)養(yang)基上進行培(pei)養(yang)，以觀察(cha)是否有細菌的(de)增殖(zhi)。并且，進行革蘭氏(shi)染(ran)色，并在油鏡（100 X 10 倍）下(xia)觀察(cha)可(ke)直接確認是否存在微生物污(wu)染(ran)。

怎樣操作可以盡量避免沉淀出現？

1. 正確解凍

首先，應按照逐步(bu)解(jie)(jie)凍(dong)(dong)的方式正確解(jie)(jie)凍(dong)(dong)血清：從-20℃取出后，置(zhi)于 4℃冰箱緩(huan)慢解(jie)(jie)凍(dong)(dong)，zui后置(zhi)于室(shi)溫(wen)完成解(jie)(jie)凍(dong)(dong)。如果直接從-20℃拿到室(shi)溫(wen)或 37 ℃水浴解(jie)(jie)凍(dong)(dong)，則非常(chang)容(rong)易產生沉淀。在解(jie)(jie)凍(dong)(dong)過(guo)程中，請(qing)注意時(shi)不時(shi)緩(huan)慢搖晃瓶子，減少(shao)沉淀的產生。為避免反(fan)復(fu)凍(dong)(dong)融(rong)，建議您將血清分裝使用。

2. 使用(yong)和保存注(zhu)意事項

血清沉淀很難預測(ce)和(he)避免，出現沉淀后也無需擔(dan)憂，這(zhe)并(bing)不(bu)會(hui)影響血清的品(pin)質(zhi)。已(yi)知血清沉淀在(zai)以下條件下會(hui)有增多(duo)的可能：

1) 熱滅活；

2) 37℃培養；

3) 反復凍融；

4) 伽馬射線(xian)照射；

5) 2-8℃長期保存；

6) 長期保存于可自動化霜(shuang)的冰(bing)箱中(zhong)（溫度不穩定）。

血(xue)清(qing)沉淀的形成機(ji)(ji)理多種多樣(yang)，具體的機(ji)(ji)理尚不十(shi)分明(ming)確。我們尚不能準確預測和控制血(xue)清(qing)沉淀的產(chan)生。目前市面(mian)上所(suo)有品(pin)牌(pai)的血(xue)清(qing)產(chan)品(pin)都(dou)存在(zai)沉淀現象，這一點可以在(zai)各品(pin)牌(pai)上關于沉淀問題的聲(sheng)明(ming)上得(de)到證實。

出現血清沉淀該(gai)如何處理？

我們建議您采用2000 rpm 離心5分鐘，取上清使用就好，比過濾方便，不需要另外準備濾心和針筒，又不容易污染。

總 結(jie)：

血(xue)清(qing)產品中出現沉淀屬于常見(jian)現象，但不會影(ying)響血(xue)清(qing)的品質，對細胞培養而言也是沒(mei)有任何(he)問題的，大(da)家可以放心使用！