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SERANA胎牛(niu)血(xue)清(qing) S-FBS-SA-015 胎牛(niu)血(xue)清(qing)沉淀
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SERANA胎(tai)牛(niu)血(xue)清 S-FBS-SA-015 胎(tai)牛(niu)血(xue)清沉淀是什(shen)么?
血清中(zhong)經常會出現(xian)肉眼可(ke)見的(de)沉(chen)淀,其(qi)成(cheng)分有多(duo)種(zhong)類型,產生的(de)原因(yin)有很(hen)多(duo),主要有纖維蛋白、磷酸鈣(gai)還有一些其(qi)它成(cheng)分。
1. 纖維(wei)蛋(dan)白(bai)(Fibrin)
血(xue)清中(zhong)(zhong)肉(rou)眼可見的沉淀物大多屬(shu)于這一類型。由于在生產過(guo)程中(zhong)(zhong),血(xue)清采集、過(guo)濾(lv)(3 次 0.1 μm過(guo)濾(lv))和(he)灌裝(zhuang)處(chu)理都是在低溫條件下快(kuai)速完成, 此時血(xue)清中(zhong)(zhong)纖維蛋白原(Fibrinogen)處(chu)于溶(rong)解狀態。但在解凍(dong)之后, 血(xue)清中(zhong)(zhong)纖維蛋白原往往會發生凝集,形成肉(rou)眼可見的沉淀。
2. 磷(lin)酸鈣(Calcium Phosphate)
這是(shi)一種常(chang)見的(de)(de)沉淀(dian)成(cheng)分(fen),通常(chang)會造(zao)成(cheng)血清出(chu)現云(yun)霧狀渾濁。當(dang)產品在(zai) 37℃保存時,這種現象尤其明顯,在(zai)倒置顯微鏡下可觀察到小黑點(dian)的(de)(de)存在(zai)。這些小黑點(dian)在(zai)布朗運動(dong)的(de)(de)作用下四處游(you)動(dong),常(chang)被誤認(ren)為(wei)是(shi)微生物污染(ran)。
3. 其他成分(Other)
血清中的其他成(cheng)(cheng)分也會(hui)形(xing)成(cheng)(cheng)沉淀(dian)(dian),例如膽固(gu)醇形(xing)成(cheng)(cheng)的油脂(zhi)滴和其他蛋白沉淀(dian)(dian)等。
Gibco 10099141 之胎牛(niu)血清沉淀會影響(xiang)細胞培(pei)養嗎?
1. 細胞生(sheng)長
我們(men)在出廠前都會(hui)對(dui)血(xue)(xue)(xue)清(qing)(qing)進(jin)行一系列(lie)質(zhi)檢測(ce)試,確保血(xue)(xue)(xue)清(qing)(qing)質(zhi)量(liang)達到嚴格(ge)標準。血(xue)(xue)(xue)清(qing)(qing)測(ce)試和細胞培(pei)養經(jing)驗(yan)也(ye)表明(ming),其(qi)沉(chen)淀成分(fen)不會(hui)影響血(xue)(xue)(xue)清(qing)(qing)作為細胞培(pei)養添加(jia)物(wu)的表現。這一點得到了眾多客戶和其(qi)他血(xue)(xue)(xue)清(qing)(qing)供(gong)應商的肯定。解凍之(zhi)后, 血(xue)(xue)(xue)清(qing)(qing)中(zhong)纖(xian)維(wei)蛋白原往往會(hui)發(fa)生(sheng)凝集,形成肉眼可見的沉(chen)淀。
2. 懷疑污染
磷酸鈣顆粒經常(chang)會被當成微生物污(wu)染(ran)而引發(fa)不必要的擔憂(you)。一(yi)(yi)般情況下(xia),當操作人員(yuan)融(rong)化血(xue)(xue)清(qing)后注意到有(you)霧狀渾濁(zhuo)時,常(chang)將其存(cun)放在(zai)(zai) 4℃冰箱(xiang)中觀察,并考慮接下(xia)來是否繼續使(shi)用。但這樣(yang)會使(shi)沉淀進一(yi)(yi)步增多,反而會使(shi)血(xue)(xue)清(qing)更加渾濁(zhuo),進而誤以(yi)為(wei)(wei)存(cun)在(zai)(zai)血(xue)(xue)清(qing)污(wu)染(ran)。并且(qie),在(zai)(zai)倒置(zhi)顯微鏡下(xia),可在(zai)(zai)血(xue)(xue)清(qing)中觀察到四處游動的小黑(hei)點(磷酸鈣顆粒的布朗運動),更容易使(shi)人誤以(yi)為(wei)(wei)存(cun)在(zai)(zai)微生物污(wu)染(ran)。
為防(fang)止這類誤解(jie)的(de)產生,我們不建(jian)議客戶培養(yang)血清(qing)來驗證是(shi)否(fou)存(cun)(cun)在污染(ran),而是(shi)將血清(qing)直(zhi)(zhi)接(jie)接(jie)種在細菌(jun)培養(yang)基上進(jin)行培養(yang),以觀(guan)察是(shi)否(fou)有(you)細菌(jun)的(de)增殖。并(bing)且,進(jin)行革(ge)蘭氏染(ran)色(se),并(bing)在油鏡(jing)(100 X 10 倍)下觀(guan)察可(ke)直(zhi)(zhi)接(jie)確(que)認(ren)是(shi)否(fou)存(cun)(cun)在微生物污染(ran)。
怎樣操作可以盡量(liang)避免(mian)沉淀(dian)出現?
1. 正確解凍
首(shou)先,應按照逐步解凍的方式正確解凍血(xue)清:從(cong)-20℃取出后(hou),置于 4℃冰(bing)箱緩(huan)慢解凍,zui后(hou)置于室(shi)溫完(wan)成解凍。如果(guo)直接(jie)從(cong)-20℃拿到室(shi)溫或 37 ℃水浴解凍,則(ze)非常容(rong)易(yi)產生沉(chen)淀(dian)。在解凍過程中,請注意時(shi)不時(shi)緩(huan)慢搖晃瓶子(zi),減少沉(chen)淀(dian)的產生。為避(bi)免反復凍融(rong),建議您將血(xue)清分裝使用。
2. 使用和保存(cun)注意事項
血(xue)清(qing)(qing)沉淀很難(nan)預測和避(bi)免,出現沉淀后也無(wu)需擔憂,這并不會(hui)(hui)影(ying)響血(xue)清(qing)(qing)的品質(zhi)。已知血(xue)清(qing)(qing)沉淀在(zai)以下條件(jian)下會(hui)(hui)有增多(duo)的可能(neng):
1) 熱滅活(huo);
2) 37℃培養;
3) 反復凍融(rong);
4) 伽馬射線照(zhao)射;
5) 2-8℃長期保存;
6) 長期保存于可自(zi)動化霜的冰箱中(zhong)(溫度不穩定)。
血(xue)清沉(chen)淀的形(xing)成機理多種(zhong)多樣,具(ju)體(ti)的機理尚不十分明確。我(wo)們尚不能準確預測和(he)控制血(xue)清沉(chen)淀的產生。目前(qian)市面上(shang)所有品(pin)牌的血(xue)清產品(pin)都存在(zai)沉(chen)淀現象,這一(yi)點可(ke)以在(zai)各品(pin)牌上(shang)關于(yu)沉(chen)淀問題的聲明上(shang)得到證實。
出現血清沉淀該如何處理?
我們建議(yi)您采用2000 rpm 離(li)心5分鐘(zhong),取上清使(shi)用就好,比(bi)過濾方便(bian),不需要另(ling)外準(zhun)備濾心和(he)針(zhen)筒,又不容易污染。
總 結:
血(xue)清產品中出現(xian)沉淀屬于常見現(xian)象,但不會影響血(xue)清的品質(zhi),對細胞培養而言也是沒有任何問題的,大家可(ke)以放(fang)心使用(yong)!