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SERANA胎牛血清 S-FBS-US-015 胎牛血清沉淀

發(fa)布時間:2017-12-08瀏(liu)覽:2252次

SERANA胎(tai)(tai)牛(niu)血(xue)清  S-FBS-US-015  胎(tai)(tai)牛(niu)血(xue)清沉淀(dian)

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SERANA胎牛血清  S-FBS-US-015  胎牛血清沉淀 是什么?

血清中經常會出現肉眼可見的沉(chen)淀,其成分有多種類(lei)型,產生的原因有很多,主要(yao)有纖維蛋白、磷酸鈣還有一些其它成分。

1. 纖(xian)維蛋白(Fibrin)

血(xue)清(qing)中(zhong)肉眼(yan)(yan)可見的(de)沉淀(dian)物(wu)大多(duo)屬(shu)于(yu)這一類型。由于(yu)在生產過(guo)程中(zhong),血(xue)清(qing)采(cai)集(ji)(ji)、過(guo)濾(3 次 0.1 μm過(guo)濾)和灌裝處理都是在低溫條件下(xia)快速完(wan)成, 此時(shi)血(xue)清(qing)中(zhong)纖維(wei)(wei)蛋(dan)白(bai)原(yuan)(yuan)(Fibrinogen)處于(yu)溶解(jie)(jie)狀態。但在解(jie)(jie)凍之(zhi)后, 血(xue)清(qing)中(zhong)纖維(wei)(wei)蛋(dan)白(bai)原(yuan)(yuan)往往會發生凝集(ji)(ji),形成肉眼(yan)(yan)可見的(de)沉淀(dian)。

2. 磷酸(suan)鈣(Calcium Phosphate)

這(zhe)是一種常(chang)(chang)見的(de)沉淀(dian)成分,通(tong)常(chang)(chang)會造成血(xue)清出現云霧狀渾濁(zhuo)。當產品在(zai) 37℃保存(cun)時,這(zhe)種現象尤其明顯(xian),在(zai)倒置顯(xian)微鏡(jing)下可觀察(cha)到小黑點(dian)的(de)存(cun)在(zai)。這(zhe)些小黑點(dian)在(zai)布朗運動的(de)作(zuo)用下四處游(you)動,常(chang)(chang)被(bei)誤認為是微生(sheng)物污(wu)染(ran)。

 

3. 其他成分(Other)

血清中的(de)其他成(cheng)分也(ye)會形成(cheng)沉淀,例(li)如膽固醇形成(cheng)的(de)油脂滴和其他蛋(dan)白沉淀等。

Gibco 10099141 之胎牛血(xue)清沉淀會影響細胞培養嗎?

1. 細胞(bao)生長

我們在出廠前都會對血(xue)清(qing)(qing)進(jin)行一系列質(zhi)檢測(ce)試,確保血(xue)清(qing)(qing)質(zhi)量達到嚴格標準。血(xue)清(qing)(qing)測(ce)試和(he)細胞(bao)培養(yang)經驗也表明,其(qi)沉(chen)淀成分不會影響血(xue)清(qing)(qing)作為細胞(bao)培養(yang)添加物的表現。這一點得(de)到了眾(zhong)多客戶和(he)其(qi)他(ta)血(xue)清(qing)(qing)供應商的肯定(ding)。解凍之(zhi)后, 血(xue)清(qing)(qing)中纖維蛋(dan)白原往(wang)往(wang)會發生(sheng)凝集(ji),形成肉眼可(ke)見的沉(chen)淀。

 

2. 懷疑污染

磷(lin)酸(suan)鈣(gai)顆(ke)粒經常會(hui)被當成(cheng)微(wei)(wei)生物(wu)污(wu)染(ran)而引發不必要的擔憂。一般情況下,當操作人(ren)員融化血(xue)清(qing)(qing)后(hou)注意到(dao)有霧狀(zhuang)渾濁(zhuo)時(shi),常將其存(cun)放在(zai)(zai)(zai)(zai) 4℃冰箱中(zhong)觀察(cha)(cha),并考(kao)慮接(jie)下來是否繼續使(shi)(shi)用。但這樣會(hui)使(shi)(shi)沉淀(dian)進(jin)一步增多,反(fan)而會(hui)使(shi)(shi)血(xue)清(qing)(qing)更(geng)加渾濁(zhuo),進(jin)而誤以為(wei)存(cun)在(zai)(zai)(zai)(zai)血(xue)清(qing)(qing)污(wu)染(ran)。并且(qie),在(zai)(zai)(zai)(zai)倒(dao)置(zhi)顯(xian)微(wei)(wei)鏡下,可在(zai)(zai)(zai)(zai)血(xue)清(qing)(qing)中(zhong)觀察(cha)(cha)到(dao)四處游動的小(xiao)黑(hei)點(磷(lin)酸(suan)鈣(gai)顆(ke)粒的布朗運動),更(geng)容易(yi)使(shi)(shi)人(ren)誤以為(wei)存(cun)在(zai)(zai)(zai)(zai)微(wei)(wei)生物(wu)污(wu)染(ran)。

 

為防止這類誤解(jie)的產生,我們不建議客戶(hu)培養血清來(lai)驗證是(shi)(shi)否(fou)存在污(wu)染,而是(shi)(shi)將(jiang)血清直接(jie)接(jie)種(zhong)在細菌培養基上進行(xing)培養,以觀察是(shi)(shi)否(fou)有細菌的增殖。并且,進行(xing)革蘭氏染色,并在油鏡(100 X 10 倍)下觀察可直接(jie)確(que)認(ren)是(shi)(shi)否(fou)存在微(wei)生物(wu)污(wu)染。

怎(zen)樣操作可以盡(jin)量避免沉淀出(chu)現?

1. 正確解凍

首先,應(ying)按照逐步解(jie)(jie)(jie)凍(dong)(dong)(dong)(dong)的方式(shi)正(zheng)確解(jie)(jie)(jie)凍(dong)(dong)(dong)(dong)血(xue)清:從(cong)-20℃取出(chu)后,置于(yu) 4℃冰箱緩(huan)慢(man)解(jie)(jie)(jie)凍(dong)(dong)(dong)(dong),zui后置于(yu)室(shi)溫(wen)完成解(jie)(jie)(jie)凍(dong)(dong)(dong)(dong)。如果直接從(cong)-20℃拿(na)到室(shi)溫(wen)或(huo) 37 ℃水浴解(jie)(jie)(jie)凍(dong)(dong)(dong)(dong),則非常容易產生沉淀。在解(jie)(jie)(jie)凍(dong)(dong)(dong)(dong)過程中(zhong),請注意時不時緩(huan)慢(man)搖(yao)晃(huang)瓶(ping)子,減(jian)少(shao)沉淀的產生。為避免反復凍(dong)(dong)(dong)(dong)融(rong),建(jian)議您將血(xue)清分裝使用。

 

2. 使用和保存注意事項

血清沉(chen)(chen)淀(dian)很難(nan)預測和避免,出(chu)現沉(chen)(chen)淀(dian)后也無需(xu)擔憂,這并不會影響血清的品質。已知血清沉(chen)(chen)淀(dian)在以下條件下會有增多的可能:

1) 熱滅活;

2) 37℃培(pei)養;

3) 反復凍融;

4) 伽馬射線(xian)照(zhao)射;

5) 2-8℃長期保存;

6) 長期保(bao)存于可自(zi)動(dong)化霜的(de)冰箱中(溫度不穩定)。

 

血清(qing)沉淀(dian)的(de)(de)形成機(ji)理多種(zhong)多樣,具體(ti)的(de)(de)機(ji)理尚不(bu)十分明確。我們尚不(bu)能準(zhun)確預測和控制(zhi)血清(qing)沉淀(dian)的(de)(de)產(chan)生(sheng)。目前市面(mian)上所(suo)有品牌的(de)(de)血清(qing)產(chan)品都存(cun)在沉淀(dian)現象,這一(yi)點可(ke)以在各(ge)品牌上關于沉淀(dian)問題的(de)(de)聲明上得到證實。

出現血清(qing)沉淀該如何處理?

我們建議(yi)您采用2000 rpm 離心5分鐘,取上(shang)清使用就好,比過(guo)濾(lv)方(fang)便,不需要(yao)另外準備濾(lv)心和針筒,又(you)不容易(yi)污(wu)染。

總 結:

血(xue)清產(chan)品(pin)中出(chu)現沉(chen)淀屬于常見現象,但不會影(ying)響血(xue)清的(de)品(pin)質,對(dui)細胞培養而言也是沒有任何問題(ti)的(de),大家可以放(fang)心使用!

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