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SERANA胎牛血(xue)清 S-FBS-SA-055 胎牛血(xue)清沉淀
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SERANA胎牛血清(qing) S-FBS-SA-055 胎牛血清(qing)沉淀是(shi)什么?
血清中(zhong)經常(chang)會(hui)出現肉(rou)眼可見的(de)沉淀,其成分(fen)有多種類型(xing),產生的(de)原(yuan)因有很(hen)多,主要有纖維蛋(dan)白、磷酸鈣還有一些其它成分(fen)。
1. 纖維蛋白(Fibrin)
血清中(zhong)(zhong)肉(rou)眼(yan)可見(jian)的沉(chen)淀物大多屬于(yu)這(zhe)一類型。由于(yu)在(zai)生產(chan)過程中(zhong)(zhong),血清采集(ji)、過濾(3 次 0.1 μm過濾)和灌裝處(chu)(chu)理都是在(zai)低溫條件下快速完成(cheng), 此時血清中(zhong)(zhong)纖維蛋白原(Fibrinogen)處(chu)(chu)于(yu)溶解狀態。但在(zai)解凍之后(hou), 血清中(zhong)(zhong)纖維蛋白原往(wang)往(wang)會發生凝集(ji),形成(cheng)肉(rou)眼(yan)可見(jian)的沉(chen)淀。
2. 磷酸鈣(Calcium Phosphate)
這(zhe)(zhe)是一(yi)種常(chang)見(jian)的(de)沉淀成分,通(tong)常(chang)會造成血清出現云霧狀(zhuang)渾濁。當產品在 37℃保存(cun)(cun)時,這(zhe)(zhe)種現象尤其明顯,在倒置顯微鏡下可觀察(cha)到小黑(hei)點的(de)存(cun)(cun)在。這(zhe)(zhe)些小黑(hei)點在布朗運動的(de)作用下四(si)處游動,常(chang)被誤認為是微生物污染。
3. 其他(ta)成分(Other)
血清中的(de)其他成分也會形(xing)成沉淀,例如膽固醇形(xing)成的(de)油(you)脂滴(di)和其他蛋白沉淀等。
Gibco 10099141 之胎牛(niu)血清沉淀會影響細胞(bao)培養(yang)嗎?
1. 細胞生長
我們在出(chu)廠前都會對血(xue)清(qing)(qing)進行一(yi)系列質檢測(ce)試(shi),確(que)保血(xue)清(qing)(qing)質量(liang)達到嚴格標準。血(xue)清(qing)(qing)測(ce)試(shi)和細胞培養經驗也(ye)表明(ming),其(qi)沉淀(dian)成(cheng)分不會影響血(xue)清(qing)(qing)作為細胞培養添加物的表現。這一(yi)點(dian)得(de)到了眾多客戶和其(qi)他血(xue)清(qing)(qing)供應商的肯定。解凍(dong)之后, 血(xue)清(qing)(qing)中(zhong)纖維蛋白原往(wang)往(wang)會發生凝集,形成(cheng)肉眼可見的沉淀(dian)。
2. 懷疑污染
磷酸(suan)鈣(gai)顆(ke)粒(li)經(jing)常會被當成微(wei)生物污(wu)染而(er)引發不必要的(de)擔(dan)憂。一般情況下,當操(cao)作人員融化(hua)血(xue)清后注意到有霧(wu)狀渾(hun)(hun)濁時,常將(jiang)其存放(fang)在(zai)(zai) 4℃冰箱(xiang)中觀察,并考慮接下來是否繼(ji)續(xu)使(shi)用。但(dan)這(zhe)樣(yang)會使(shi)沉淀(dian)進一步增多,反而(er)會使(shi)血(xue)清更加渾(hun)(hun)濁,進而(er)誤以為存在(zai)(zai)血(xue)清污(wu)染。并且(qie),在(zai)(zai)倒置顯(xian)微(wei)鏡下,可在(zai)(zai)血(xue)清中觀察到四處(chu)游動的(de)小黑點(磷酸(suan)鈣(gai)顆(ke)粒(li)的(de)布(bu)朗運動),更容易使(shi)人誤以為存在(zai)(zai)微(wei)生物污(wu)染。
為防(fang)止這類誤解的(de)產生,我(wo)們不建議客戶培(pei)養血清來驗證是(shi)(shi)否存在污染(ran),而是(shi)(shi)將(jiang)血清直(zhi)接接種在細菌培(pei)養基上進(jin)行(xing)培(pei)養,以觀察是(shi)(shi)否有細菌的(de)增殖(zhi)。并且,進(jin)行(xing)革蘭氏染(ran)色,并在油鏡(100 X 10 倍)下觀察可直(zhi)接確認是(shi)(shi)否存在微生物污染(ran)。
怎樣(yang)操(cao)作可以盡量(liang)避(bi)免沉(chen)淀(dian)出現?
1. 正確解(jie)凍(dong)
首先,應(ying)按照逐(zhu)步(bu)解(jie)(jie)凍(dong)的方式正確解(jie)(jie)凍(dong)血清:從(cong)-20℃取出后,置于 4℃冰(bing)箱緩慢解(jie)(jie)凍(dong),zui后置于室溫完成解(jie)(jie)凍(dong)。如果直接從(cong)-20℃拿到室溫或(huo) 37 ℃水浴解(jie)(jie)凍(dong),則非(fei)常容(rong)易產生沉(chen)淀(dian)。在解(jie)(jie)凍(dong)過程中,請(qing)注意時(shi)(shi)不時(shi)(shi)緩慢搖(yao)晃瓶子,減少(shao)沉(chen)淀(dian)的產生。為(wei)避免(mian)反復凍(dong)融,建議您將血清分(fen)裝使用。
2. 使用和保存注意事項
血清沉(chen)(chen)淀很(hen)難預測和避免,出現沉(chen)(chen)淀后也無需(xu)擔憂,這并不會影(ying)響(xiang)血清的品(pin)質。已知(zhi)血清沉(chen)(chen)淀在以(yi)下條件(jian)下會有增多的可能:
1) 熱滅(mie)活;
2) 37℃培養;
3) 反復凍融;
4) 伽(jia)馬射線照射;
5) 2-8℃長期保存;
6) 長期保(bao)存于可自動化霜的冰箱中(溫度不(bu)穩定)。
血清(qing)沉(chen)淀(dian)的(de)(de)形成機(ji)理多(duo)種多(duo)樣(yang),具(ju)體的(de)(de)機(ji)理尚不十分明(ming)確(que)。我們尚不能準確(que)預測(ce)和(he)控制血清(qing)沉(chen)淀(dian)的(de)(de)產生。目前市(shi)面上所有品(pin)牌的(de)(de)血清(qing)產品(pin)都存在沉(chen)淀(dian)現(xian)象,這一點可(ke)以在各品(pin)牌上關于沉(chen)淀(dian)問(wen)題的(de)(de)聲明(ming)上得到證實(shi)。
出現(xian)血清沉淀該如何處理?
我們建議您采用2000 rpm 離(li)心(xin)5分鐘,取上清使用就好(hao),比過(guo)濾(lv)方便,不(bu)需要(yao)另外準備(bei)濾(lv)心(xin)和針筒,又不(bu)容易污染。
總 結:
血清(qing)產(chan)品(pin)中出現沉淀屬于常見現象,但不會影響血清(qing)的(de)品(pin)質(zhi),對細胞(bao)培(pei)養而言也(ye)是(shi)沒有任(ren)何問題(ti)的(de),大家可(ke)以放心使用(yong)!