SERANA胎(tai)牛血(xue)(xue)清  S-FBS-SA-055  胎(tai)牛血(xue)(xue)清沉淀

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SERANA胎(tai)牛血(xue)清(qing)  S-FBS-SA-055  胎(tai)牛血(xue)清(qing)沉淀是什么(me)？

血清(qing)中經常會出現肉眼可(ke)見的沉淀(dian)，其成分有多種類型，產(chan)生的原因(yin)有很多，主要(yao)有纖維蛋白、磷酸(suan)鈣(gai)還(huan)有一些其它成分。

1. 纖維蛋白(bai)（Fibrin）

血(xue)清(qing)中(zhong)肉眼可見(jian)(jian)的沉淀物大多屬于(yu)這一類(lei)型。由于(yu)在生(sheng)產(chan)過(guo)程中(zhong)，血(xue)清(qing)采集、過(guo)濾（3 次 0.1 μm過(guo)濾）和灌裝處理(li)都是(shi)在低溫(wen)條件下快速完(wan)成(cheng), 此時血(xue)清(qing)中(zhong)纖(xian)維蛋白原（Fibrinogen）處于(yu)溶(rong)解(jie)狀態。但在解(jie)凍之后(hou), 血(xue)清(qing)中(zhong)纖(xian)維蛋白原往(wang)往(wang)會發生(sheng)凝集，形成(cheng)肉眼可見(jian)(jian)的沉淀。

2. 磷酸鈣（Calcium Phosphate）

這(zhe)(zhe)是一種常見的(de)沉(chen)淀成分，通常會(hui)造成血清出現(xian)云霧狀渾濁。當(dang)產品(pin)在(zai) 37℃保(bao)存時，這(zhe)(zhe)種現(xian)象尤其明(ming)顯(xian)，在(zai)倒置顯(xian)微(wei)鏡下可觀(guan)察到小(xiao)黑點的(de)存在(zai)。這(zhe)(zhe)些小(xiao)黑點在(zai)布朗運(yun)動的(de)作(zuo)用(yong)下四處(chu)游動，常被誤認為是微(wei)生物污染。

3. 其他成分（Other）

血清中的(de)其(qi)他成(cheng)分也會形成(cheng)沉(chen)(chen)淀，例(li)如(ru)膽固(gu)醇(chun)形成(cheng)的(de)油脂滴和其(qi)他蛋(dan)白沉(chen)(chen)淀等。

Gibco 10099141 之胎牛血(xue)清(qing)沉淀會影響細胞(bao)培(pei)養嗎(ma)？

1. 細(xi)胞生(sheng)長(chang)

我們(men)在出廠前都會(hui)對血(xue)(xue)清(qing)進行(xing)一(yi)系列質檢(jian)測試(shi)(shi)，確保血(xue)(xue)清(qing)質量(liang)達(da)到(dao)嚴格(ge)標準。血(xue)(xue)清(qing)測試(shi)(shi)和細胞(bao)培(pei)養(yang)經驗也表(biao)明，其沉淀成分(fen)不會(hui)影響血(xue)(xue)清(qing)作為細胞(bao)培(pei)養(yang)添加物(wu)的(de)表(biao)現(xian)。這一(yi)點得到(dao)了眾多客戶和其他(ta)血(xue)(xue)清(qing)供應商的(de)肯定(ding)。解凍之后, 血(xue)(xue)清(qing)中纖維蛋白(bai)原往往會(hui)發(fa)生凝集(ji)，形成肉眼可(ke)見的(de)沉淀。

2. 懷疑(yi)污染(ran)

磷(lin)酸鈣(gai)顆粒(li)經常會(hui)被當成微生物污(wu)染(ran)而引(yin)發不必要的(de)(de)擔憂。一(yi)般情況下，當操作人(ren)員(yuan)融化血(xue)清(qing)后注(zhu)意(yi)到(dao)有霧(wu)狀渾濁時，常將其存放在(zai)(zai)(zai)(zai) 4℃冰箱中觀察，并考慮接下來是否繼續使(shi)用。但(dan)這樣會(hui)使(shi)沉淀進一(yi)步增多，反而會(hui)使(shi)血(xue)清(qing)更加(jia)渾濁，進而誤以為存在(zai)(zai)(zai)(zai)血(xue)清(qing)污(wu)染(ran)。并且，在(zai)(zai)(zai)(zai)倒置顯微鏡下，可在(zai)(zai)(zai)(zai)血(xue)清(qing)中觀察到(dao)四處游動的(de)(de)小黑點（磷(lin)酸鈣(gai)顆粒(li)的(de)(de)布朗(lang)運(yun)動），更容(rong)易(yi)使(shi)人(ren)誤以為存在(zai)(zai)(zai)(zai)微生物污(wu)染(ran)。

為防(fang)止這類誤解的(de)(de)產生，我們(men)不建議客戶培(pei)養血清(qing)來驗證是(shi)否(fou)存(cun)在(zai)(zai)污染(ran)，而是(shi)將血清(qing)直接接種在(zai)(zai)細菌培(pei)養基上(shang)進(jin)(jin)行培(pei)養，以觀察是(shi)否(fou)有細菌的(de)(de)增殖。并(bing)且，進(jin)(jin)行革蘭氏染(ran)色(se)，并(bing)在(zai)(zai)油鏡（100 X 10 倍）下觀察可(ke)直接確認是(shi)否(fou)存(cun)在(zai)(zai)微(wei)生物污染(ran)。

怎(zen)樣(yang)操作可以盡量避免沉淀出現？

1. 正(zheng)確解凍

首先，應按照(zhao)逐步解(jie)(jie)凍(dong)的方式正(zheng)確解(jie)(jie)凍(dong)血清(qing)：從-20℃取出后，置于(yu) 4℃冰箱緩(huan)慢解(jie)(jie)凍(dong)，zui后置于(yu)室溫(wen)完成解(jie)(jie)凍(dong)。如(ru)果(guo)直接(jie)從-20℃拿(na)到室溫(wen)或(huo) 37 ℃水浴解(jie)(jie)凍(dong)，則非常(chang)容易(yi)產生沉(chen)淀。在解(jie)(jie)凍(dong)過程中，請注意時不(bu)時緩(huan)慢搖晃瓶子，減(jian)少沉(chen)淀的產生。為避免反復(fu)凍(dong)融，建議(yi)您將(jiang)血清(qing)分裝使用。

2. 使用和保存注意事(shi)項

血(xue)(xue)清沉(chen)(chen)淀(dian)很難預測和避免，出現沉(chen)(chen)淀(dian)后也(ye)無需擔憂(you)，這并不會影(ying)響血(xue)(xue)清的品質。已知血(xue)(xue)清沉(chen)(chen)淀(dian)在以(yi)下(xia)條件下(xia)會有(you)增多的可能：

1) 熱(re)滅活；

2) 37℃培養；

3) 反復凍融；

4) 伽(jia)馬射線(xian)照射；

5) 2-8℃長(chang)期保存；

6) 長期保存于(yu)可自動化(hua)霜的冰箱中（溫度(du)不穩定）。

血清(qing)(qing)沉(chen)淀(dian)的(de)形成機(ji)理(li)多(duo)種(zhong)多(duo)樣，具體的(de)機(ji)理(li)尚(shang)不十分明(ming)確。我們尚(shang)不能準確預(yu)測和控制血清(qing)(qing)沉(chen)淀(dian)的(de)產生。目前(qian)市面(mian)上所有品牌的(de)血清(qing)(qing)產品都(dou)存在(zai)沉(chen)淀(dian)現象，這(zhe)一點可以在(zai)各(ge)品牌上關于沉(chen)淀(dian)問題的(de)聲明(ming)上得到證實(shi)。

出(chu)現血(xue)清沉淀(dian)該如何處(chu)理(li)？

我們建(jian)議您采用(yong)2000 rpm 離心5分鐘，取上清(qing)使(shi)用(yong)就好，比過濾方便(bian)，不需(xu)要另外(wai)準備濾心和針筒，又不容(rong)易污染。

總 結：

血清產品(pin)中出現沉淀屬于(yu)常見現象，但不會(hui)影響(xiang)血清的(de)品(pin)質，對細(xi)胞培養而言也是沒有任(ren)何(he)問題的(de)，大家可以(yi)放心使(shi)用(yong)！