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SERANA胎牛血清 FBS 胎牛血清沉淀

發布時間:2017-12-08瀏覽(lan):2176次

SERANA胎牛(niu)血清    FBS 胎牛(niu)血清沉淀

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SERANA胎牛(niu)血清(qing)    FBS 胎牛(niu)血清(qing)沉淀是(shi)什么?

血(xue)清中經常會出現肉眼可見的沉淀(dian),其(qi)成(cheng)分有多種類(lei)型,產生的原因有很多,主要有纖維蛋白、磷酸鈣還(huan)有一些其(qi)它(ta)成(cheng)分。

1. 纖維蛋(dan)白(Fibrin)

血(xue)清中(zhong)肉眼可見的沉淀物大多屬于(yu)這一類型。由于(yu)在(zai)生(sheng)產過程中(zhong),血(xue)清采集、過濾(lv)(3 次 0.1 μm過濾(lv))和灌(guan)裝處理都是在(zai)低溫(wen)條件下快速完成(cheng), 此(ci)時血(xue)清中(zhong)纖(xian)(xian)維蛋白原(yuan)(Fibrinogen)處于(yu)溶解(jie)狀態。但在(zai)解(jie)凍(dong)之后, 血(xue)清中(zhong)纖(xian)(xian)維蛋白原(yuan)往(wang)(wang)往(wang)(wang)會發生(sheng)凝集,形(xing)成(cheng)肉眼可見的沉淀。

2. 磷酸鈣(Calcium Phosphate)

這是一種常見的沉淀(dian)成分,通常會造成血清出現云(yun)霧狀渾(hun)濁(zhuo)。當產品在 37℃保存時,這種現象(xiang)尤其明(ming)顯(xian),在倒(dao)置顯(xian)微(wei)鏡下(xia)可觀(guan)察到小黑點的存在。這些小黑點在布朗運動的作用下(xia)四處游動,常被誤認為是微(wei)生物污染。

 

3. 其他成分(Other)

血清中(zhong)的其他成(cheng)分也會(hui)形成(cheng)沉(chen)淀,例如(ru)膽固(gu)醇形成(cheng)的油脂滴和其他蛋白沉(chen)淀等。

Gibco 10099141 之胎牛血清沉淀會影響細胞培養嗎?

1. 細胞生長

我們在出廠前都(dou)會對血(xue)清(qing)進行一系列質檢(jian)測(ce)試(shi)(shi),確保血(xue)清(qing)質量(liang)達(da)到(dao)嚴格標準。血(xue)清(qing)測(ce)試(shi)(shi)和(he)細胞(bao)培養(yang)(yang)經(jing)驗(yan)也(ye)表明,其沉淀成(cheng)分不會影響(xiang)血(xue)清(qing)作為細胞(bao)培養(yang)(yang)添加物的表現。這一點得到(dao)了眾(zhong)多客戶和(he)其他血(xue)清(qing)供應商的肯定。解凍之(zhi)后, 血(xue)清(qing)中(zhong)纖維蛋白原往往會發生凝(ning)集,形成(cheng)肉眼可見(jian)的沉淀。

 

2. 懷疑(yi)污染

磷酸(suan)鈣(gai)顆粒(li)經常會(hui)被當成微(wei)(wei)生物污染(ran)而(er)引發不必(bi)要(yao)的擔憂。一(yi)般情況下,當操作人員融(rong)化血(xue)清后注(zhu)意到有霧狀(zhuang)渾濁時,常將(jiang)其存放在(zai)(zai) 4℃冰(bing)箱中觀(guan)察(cha)(cha),并考慮接下來(lai)是否(fou)繼續使用。但這樣會(hui)使沉淀進一(yi)步增多,反而(er)會(hui)使血(xue)清更加渾濁,進而(er)誤以為存在(zai)(zai)血(xue)清污染(ran)。并且,在(zai)(zai)倒(dao)置顯微(wei)(wei)鏡下,可在(zai)(zai)血(xue)清中觀(guan)察(cha)(cha)到四處游動的小黑點(磷酸(suan)鈣(gai)顆粒(li)的布朗(lang)運(yun)動),更容(rong)易使人誤以為存在(zai)(zai)微(wei)(wei)生物污染(ran)。

 

為防止(zhi)這(zhe)類(lei)誤(wu)解的(de)產(chan)生(sheng),我(wo)們(men)不建議客戶培養血清來驗(yan)證是(shi)否存(cun)在(zai)污染(ran)(ran),而是(shi)將血清直接(jie)接(jie)種在(zai)細菌培養基上(shang)進行(xing)培養,以觀(guan)察是(shi)否有細菌的(de)增殖。并(bing)且,進行(xing)革蘭氏(shi)染(ran)(ran)色(se),并(bing)在(zai)油(you)鏡(100 X 10 倍)下觀(guan)察可直接(jie)確認(ren)是(shi)否存(cun)在(zai)微(wei)生(sheng)物污染(ran)(ran)。

怎樣操(cao)作可以盡(jin)量避免沉淀出現?

1. 正(zheng)確解凍

首先,應按照逐步解(jie)凍(dong)(dong)(dong)的方式正確解(jie)凍(dong)(dong)(dong)血清:從-20℃取出后,置于 4℃冰箱緩慢解(jie)凍(dong)(dong)(dong),zui后置于室溫完成(cheng)解(jie)凍(dong)(dong)(dong)。如(ru)果(guo)直接從-20℃拿到(dao)室溫或 37 ℃水(shui)浴解(jie)凍(dong)(dong)(dong),則非(fei)常容易產(chan)生(sheng)沉淀。在解(jie)凍(dong)(dong)(dong)過程中,請注意時不(bu)時緩慢搖(yao)晃瓶子,減少沉淀的產(chan)生(sheng)。為避免反復凍(dong)(dong)(dong)融,建議您將血清分裝使用(yong)。

 

2. 使用和保存注意事項

血清沉淀(dian)很難預測和避免,出現沉淀(dian)后也無需擔憂,這并不(bu)會(hui)(hui)影響血清的(de)品質。已(yi)知血清沉淀(dian)在以下條件下會(hui)(hui)有增多的(de)可(ke)能(neng):

1) 熱滅活;

2) 37℃培養;

3) 反復凍融;

4) 伽馬射(she)線照射(she);

5) 2-8℃長期保(bao)存;

6) 長期保存于可自動化霜的冰箱中(溫度不穩定)。

 

血(xue)清沉淀的(de)(de)形成機(ji)理多(duo)(duo)種多(duo)(duo)樣,具(ju)體的(de)(de)機(ji)理尚不十分明(ming)確(que)。我們尚不能準確(que)預(yu)測和控(kong)制血(xue)清沉淀的(de)(de)產生。目前市面上(shang)所有品(pin)牌的(de)(de)血(xue)清產品(pin)都存在沉淀現象,這(zhe)一點可以在各品(pin)牌上(shang)關(guan)于沉淀問題的(de)(de)聲明(ming)上(shang)得到證實。

出(chu)現血清沉淀該(gai)如何處(chu)理?

我們建議您采用(yong)2000 rpm 離心5分鐘,取上(shang)清使用(yong)就好,比(bi)過濾(lv)方便(bian),不需要(yao)另外(wai)準(zhun)備濾(lv)心和針筒,又不容易(yi)污(wu)染。

總 結:

血(xue)清產品中出現沉淀屬于常見現象,但不(bu)會影響血(xue)清的品質,對(dui)細胞培(pei)養而言也是沒有任何問題的,大家(jia)可以(yi)放心(xin)使用!

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