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SERANA胎(tai)牛血(xue)清 S-FBS-US-065 胎(tai)牛血(xue)清沉淀
SERANA胎(tai)牛血清(qing) 胎(tai)牛血清(qing)FBS S-FBS-SA-011 SOUTH AMERICA 100ML
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SERANA胎牛血清 活性炭(tan)/葡聚糖處(chu)理胎牛血清Charcoal Stripped FBS S-FBS-AU-045 AUSTRALIA 500ML
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SERANA胎(tai)牛(niu)血清(qing) S-FBS-US-065 胎(tai)牛(niu)血清(qing)沉淀 是(shi)什么?
血清中經常會出現肉眼(yan)可見的沉淀,其成(cheng)分有(you)多種(zhong)類型,產(chan)生的原因有(you)很多,主(zhu)要(yao)有(you)纖(xian)維蛋(dan)白、磷酸鈣還有(you)一些其它成(cheng)分。
1. 纖維蛋白(Fibrin)
血清(qing)中(zhong)(zhong)肉眼可見的沉淀(dian)物(wu)大(da)多屬(shu)于(yu)這一類型。由于(yu)在(zai)生(sheng)產過程中(zhong)(zhong),血清(qing)采集、過濾(lv)(3 次 0.1 μm過濾(lv))和(he)灌裝(zhuang)處理都(dou)是在(zai)低溫(wen)條件下(xia)快速完成, 此時血清(qing)中(zhong)(zhong)纖維蛋(dan)白原(Fibrinogen)處于(yu)溶(rong)解狀(zhuang)態。但在(zai)解凍之(zhi)后, 血清(qing)中(zhong)(zhong)纖維蛋(dan)白原往往會發生(sheng)凝集,形成肉眼可見的沉淀(dian)。
2. 磷酸鈣(Calcium Phosphate)
這(zhe)(zhe)是(shi)一種(zhong)常見的(de)(de)沉淀成(cheng)分,通常會造成(cheng)血清出現云(yun)霧狀(zhuang)渾濁。當產(chan)品在(zai)(zai)(zai) 37℃保存時,這(zhe)(zhe)種(zhong)現象(xiang)尤其明顯(xian),在(zai)(zai)(zai)倒置顯(xian)微鏡(jing)下可觀(guan)察到(dao)小黑點(dian)的(de)(de)存在(zai)(zai)(zai)。這(zhe)(zhe)些小黑點(dian)在(zai)(zai)(zai)布(bu)朗運(yun)動(dong)的(de)(de)作(zuo)用下四處游動(dong),常被誤(wu)認為是(shi)微生(sheng)物污染。
3. 其(qi)他成分(Other)
血清中的(de)其他(ta)成分也(ye)會形成沉(chen)淀,例如(ru)膽固醇形成的(de)油脂滴(di)和其他(ta)蛋白沉(chen)淀等。
Gibco 10099141 之胎牛(niu)血清沉淀(dian)會影(ying)響(xiang)細胞(bao)培養嗎?
1. 細胞生長
我們在出廠前都會(hui)對血(xue)清(qing)進行一(yi)系列質檢測試,確(que)保(bao)血(xue)清(qing)質量達(da)到(dao)嚴格標準(zhun)。血(xue)清(qing)測試和細胞培養(yang)經驗也表明,其(qi)沉淀成分不會(hui)影響血(xue)清(qing)作為細胞培養(yang)添加物(wu)的(de)(de)表現。這(zhe)一(yi)點得到(dao)了眾多客戶和其(qi)他(ta)血(xue)清(qing)供應商的(de)(de)肯定。解凍(dong)之后, 血(xue)清(qing)中纖維蛋白原往(wang)往(wang)會(hui)發生凝集,形成肉(rou)眼可見(jian)的(de)(de)沉淀。
2. 懷(huai)疑污(wu)染
磷(lin)(lin)酸鈣顆(ke)粒經(jing)常會被當成微生物污(wu)(wu)染(ran)而引(yin)發不(bu)必(bi)要(yao)的擔憂。一般情(qing)況下,當操作(zuo)人(ren)員融化血清后(hou)注(zhu)意(yi)到(dao)有霧狀渾濁(zhuo)時,常將其存放在(zai)(zai) 4℃冰箱中(zhong)觀(guan)察,并(bing)考慮接下來(lai)是否繼續使用。但(dan)這樣(yang)會使沉淀(dian)進(jin)一步增多(duo),反(fan)而會使血清更(geng)(geng)加(jia)渾濁(zhuo),進(jin)而誤(wu)以為存在(zai)(zai)血清污(wu)(wu)染(ran)。并(bing)且,在(zai)(zai)倒置顯微鏡(jing)下,可在(zai)(zai)血清中(zhong)觀(guan)察到(dao)四處(chu)游動的小黑點(磷(lin)(lin)酸鈣顆(ke)粒的布朗運動),更(geng)(geng)容易使人(ren)誤(wu)以為存在(zai)(zai)微生物污(wu)(wu)染(ran)。
為(wei)防(fang)止這類誤解的產(chan)生,我們(men)不建議客戶培(pei)養血(xue)清來驗證(zheng)是否(fou)存在(zai)污(wu)染,而是將血(xue)清直接(jie)接(jie)種在(zai)細(xi)菌培(pei)養基上進(jin)行培(pei)養,以觀(guan)察(cha)是否(fou)有(you)細(xi)菌的增殖。并且(qie),進(jin)行革蘭(lan)氏染色,并在(zai)油(you)鏡(100 X 10 倍(bei))下觀(guan)察(cha)可直接(jie)確認是否(fou)存在(zai)微生物污(wu)染。
怎樣操作(zuo)可以盡量避(bi)免沉淀出現?
1. 正確解凍
首先,應按(an)照逐步解(jie)(jie)凍(dong)(dong)(dong)的方(fang)式正確解(jie)(jie)凍(dong)(dong)(dong)血清(qing):從(cong)-20℃取出后(hou),置(zhi)于 4℃冰箱緩慢解(jie)(jie)凍(dong)(dong)(dong),zui后(hou)置(zhi)于室(shi)溫完成解(jie)(jie)凍(dong)(dong)(dong)。如果直(zhi)接從(cong)-20℃拿到室(shi)溫或 37 ℃水(shui)浴解(jie)(jie)凍(dong)(dong)(dong),則非(fei)常容易產(chan)生沉(chen)淀。在解(jie)(jie)凍(dong)(dong)(dong)過程中,請注意時不時緩慢搖晃瓶子,減少(shao)沉(chen)淀的產(chan)生。為避免(mian)反復凍(dong)(dong)(dong)融,建(jian)議您將血清(qing)分裝使用(yong)。
2. 使用和保存注意事項
血(xue)(xue)清(qing)沉(chen)(chen)淀很(hen)難預(yu)測和避免,出(chu)現沉(chen)(chen)淀后也無(wu)需擔(dan)憂(you),這并不會影響血(xue)(xue)清(qing)的品質。已知血(xue)(xue)清(qing)沉(chen)(chen)淀在以(yi)下(xia)條件下(xia)會有增多(duo)的可(ke)能:
1) 熱滅活;
2) 37℃培養;
3) 反復凍融(rong);
4) 伽馬(ma)射線照射;
5) 2-8℃長期保(bao)存;
6) 長(chang)期保存于可自動(dong)化霜的(de)冰箱中(溫(wen)度(du)不(bu)穩定)。
血(xue)清(qing)沉淀(dian)的形成機(ji)理多種多樣,具體的機(ji)理尚不十(shi)分明確。我(wo)們尚不能準確預測(ce)和控(kong)制血(xue)清(qing)沉淀(dian)的產生(sheng)。目前(qian)市面上(shang)所有(you)品(pin)牌(pai)的血(xue)清(qing)產品(pin)都存在沉淀(dian)現象,這一點可以在各(ge)品(pin)牌(pai)上(shang)關于沉淀(dian)問題的聲明上(shang)得到證(zheng)實。
出現血(xue)清(qing)沉淀該(gai)如何(he)處理?
我們建議您采用2000 rpm 離(li)心(xin)(xin)5分鐘,取(qu)上(shang)清使用就好,比過(guo)濾方(fang)便(bian),不(bu)(bu)需要另外準備(bei)濾心(xin)(xin)和針筒,又不(bu)(bu)容易污染。
總 結:
血(xue)清產品(pin)中出現沉淀屬于常見(jian)現象,但不會影響(xiang)血(xue)清的品(pin)質,對細胞培養而(er)言(yan)也是沒有任(ren)何問題的,大家(jia)可以放心使(shi)用!