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SERANA胎牛血(xue)清 FBS 胎牛血(xue)清沉(chen)淀
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SERANA胎牛血(xue)清 FBS 胎牛血(xue)清沉淀是什么?
血清中經常會出(chu)現肉眼可見的(de)沉(chen)淀,其(qi)成分(fen)有(you)多(duo)種類(lei)型(xing),產生的(de)原因有(you)很多(duo),主要有(you)纖維蛋白(bai)、磷酸鈣還有(you)一些其(qi)它(ta)成分(fen)。
1. 纖維(wei)蛋白(Fibrin)
血(xue)(xue)清中(zhong)(zhong)肉(rou)眼可(ke)(ke)見(jian)的沉淀物大多屬于(yu)這一類型。由于(yu)在(zai)生產過(guo)(guo)程中(zhong)(zhong),血(xue)(xue)清采集、過(guo)(guo)濾(3 次 0.1 μm過(guo)(guo)濾)和灌裝處理都是在(zai)低溫條件(jian)下快速完(wan)成(cheng), 此時血(xue)(xue)清中(zhong)(zhong)纖(xian)維(wei)(wei)蛋白原(Fibrinogen)處于(yu)溶解(jie)狀態(tai)。但在(zai)解(jie)凍之后, 血(xue)(xue)清中(zhong)(zhong)纖(xian)維(wei)(wei)蛋白原往往會(hui)發生凝集,形成(cheng)肉(rou)眼可(ke)(ke)見(jian)的沉淀。
2. 磷酸鈣(Calcium Phosphate)
這是(shi)一種常(chang)(chang)見的沉淀成分,通常(chang)(chang)會造成血清出現(xian)云霧狀渾濁(zhuo)。當產品在 37℃保存時(shi),這種現(xian)象(xiang)尤(you)其明顯(xian),在倒置顯(xian)微(wei)鏡(jing)下可觀察到小(xiao)黑點(dian)(dian)的存在。這些小(xiao)黑點(dian)(dian)在布朗運(yun)動的作用下四處游動,常(chang)(chang)被誤認為是(shi)微(wei)生物污染。
3. 其他成分(fen)(Other)
血清中的其他(ta)成分(fen)也(ye)會形成沉淀(dian),例如膽固(gu)醇(chun)形成的油(you)脂滴和其他(ta)蛋白(bai)沉淀(dian)等。
Gibco 10099141 之胎牛血清沉(chen)淀會影響細(xi)胞培養嗎?
1. 細胞(bao)生長
我們在出廠前都會(hui)對血(xue)(xue)清(qing)(qing)進行一系列質檢(jian)測試(shi),確保血(xue)(xue)清(qing)(qing)質量達到(dao)嚴格(ge)標準。血(xue)(xue)清(qing)(qing)測試(shi)和細(xi)胞培(pei)養經驗也(ye)表明,其沉(chen)淀成分不會(hui)影響血(xue)(xue)清(qing)(qing)作為細(xi)胞培(pei)養添加物的表現。這(zhe)一點得(de)到(dao)了眾(zhong)多(duo)客戶和其他(ta)血(xue)(xue)清(qing)(qing)供應(ying)商的肯定。解凍之后, 血(xue)(xue)清(qing)(qing)中纖維蛋白原往往會(hui)發生凝(ning)集,形成肉眼可見的沉(chen)淀。
2. 懷疑污(wu)染
磷酸(suan)鈣顆(ke)粒經常會被當成微(wei)生物污(wu)染而(er)引(yin)發不必要(yao)的(de)(de)擔(dan)憂。一般情況下(xia),當操作人員融化血(xue)清(qing)(qing)后注意到有(you)霧狀渾濁(zhuo)時,常將其存(cun)(cun)放在(zai) 4℃冰箱(xiang)中觀察,并考慮接(jie)下(xia)來是否繼續使(shi)(shi)用。但這樣會使(shi)(shi)沉淀(dian)進一步增多(duo),反而(er)會使(shi)(shi)血(xue)清(qing)(qing)更(geng)加(jia)渾濁(zhuo),進而(er)誤以為存(cun)(cun)在(zai)血(xue)清(qing)(qing)污(wu)染。并且(qie),在(zai)倒置顯(xian)微(wei)鏡下(xia),可(ke)在(zai)血(xue)清(qing)(qing)中觀察到四處(chu)游動的(de)(de)小黑點(磷酸(suan)鈣顆(ke)粒的(de)(de)布朗運動),更(geng)容易使(shi)(shi)人誤以為存(cun)(cun)在(zai)微(wei)生物污(wu)染。
為防止(zhi)這類誤解的產生,我們不建(jian)議客戶培養(yang)血清來驗證是否(fou)存在(zai)污染,而是將血清直(zhi)接(jie)接(jie)種在(zai)細菌(jun)培養(yang)基上進(jin)行培養(yang),以觀(guan)察是否(fou)有(you)細菌(jun)的增殖(zhi)。并(bing)且,進(jin)行革(ge)蘭氏(shi)染色,并(bing)在(zai)油鏡(100 X 10 倍)下(xia)觀(guan)察可直(zhi)接(jie)確認是否(fou)存在(zai)微生物污染。
怎樣(yang)操(cao)作可以盡量避免沉淀出現?
1. 正(zheng)確解凍
首先(xian),應按(an)照逐步解(jie)(jie)(jie)(jie)凍(dong)的(de)方式正確解(jie)(jie)(jie)(jie)凍(dong)血(xue)清(qing):從-20℃取出后(hou),置于 4℃冰箱緩慢(man)(man)解(jie)(jie)(jie)(jie)凍(dong),zui后(hou)置于室(shi)溫完成解(jie)(jie)(jie)(jie)凍(dong)。如果(guo)直接從-20℃拿到室(shi)溫或 37 ℃水(shui)浴解(jie)(jie)(jie)(jie)凍(dong),則非常容易產生(sheng)沉淀。在解(jie)(jie)(jie)(jie)凍(dong)過(guo)程中,請注(zhu)意時(shi)(shi)不(bu)時(shi)(shi)緩慢(man)(man)搖晃(huang)瓶子,減少沉淀的(de)產生(sheng)。為(wei)避免(mian)反(fan)復(fu)凍(dong)融,建(jian)議您將血(xue)清(qing)分(fen)裝使用(yong)。
2. 使(shi)用(yong)和保存注意事項(xiang)
血清(qing)沉(chen)淀(dian)很(hen)難(nan)預測和避免(mian),出(chu)現沉(chen)淀(dian)后也(ye)無需擔憂,這并不會(hui)影響血清(qing)的品質。已知血清(qing)沉(chen)淀(dian)在以(yi)下條件下會(hui)有增(zeng)多的可(ke)能:
1) 熱滅(mie)活;
2) 37℃培(pei)養;
3) 反復凍(dong)融;
4) 伽馬射線照射;
5) 2-8℃長(chang)期保存(cun);
6) 長(chang)期保存于可自動化霜(shuang)的冰箱中(溫度不穩定)。
血清沉淀的形(xing)成機理多(duo)種多(duo)樣,具體(ti)的機理尚不十分明確。我們尚不能(neng)準確預測和控制血清沉淀的產(chan)生。目前市面上(shang)所有品牌的血清產(chan)品都存在沉淀現象,這一(yi)點可以在各品牌上(shang)關于(yu)沉淀問題的聲明上(shang)得到證(zheng)實。
出現(xian)血清沉淀該如何處理?
我們(men)建議您采(cai)用2000 rpm 離心5分鐘,取上清使用就好,比過濾方便,不需要另外準備濾心和針筒,又不容(rong)易(yi)污(wu)染(ran)。
總 結:
血(xue)清產(chan)品中出現沉淀(dian)屬于常見(jian)現象,但(dan)不(bu)會影響血(xue)清的(de)(de)品質,對細胞培養而言也是沒有任(ren)何問題的(de)(de),大家可以放心使用!