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SERANA胎牛血清 S-FBS-AU-015 胎牛血清沉淀

發布時間:2017-12-08瀏覽(lan):1184次

SERANA胎牛血清 S-FBS-AU-015 胎牛血清沉淀(dian)

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SERANA胎牛血清 S-FBS-AU-015 胎牛血清沉(chen)淀是什么(me)?

血清中經常會出現(xian)肉眼可見的沉淀(dian),其(qi)成分(fen)有(you)多種類型,產生的原因有(you)很多,主要有(you)纖維蛋白、磷酸(suan)鈣還有(you)一(yi)些其(qi)它成分(fen)。

1. 纖維蛋白(Fibrin)

血(xue)清中(zhong)肉眼可見的(de)(de)沉淀物大(da)多屬(shu)于這(zhe)一(yi)類型。由于在生(sheng)產過(guo)程(cheng)中(zhong),血(xue)清采集、過(guo)濾(3 次 0.1 μm過(guo)濾)和灌裝(zhuang)處理都是(shi)在低溫條件下(xia)快速完(wan)成, 此時血(xue)清中(zhong)纖(xian)維蛋白(bai)原(yuan)(Fibrinogen)處于溶解狀(zhuang)態。但在解凍(dong)之后(hou), 血(xue)清中(zhong)纖(xian)維蛋白(bai)原(yuan)往往會(hui)發生(sheng)凝集,形(xing)成肉眼可見的(de)(de)沉淀。

2. 磷酸鈣(Calcium Phosphate)

這是一種(zhong)常見的沉淀(dian)成分,通常會造成血(xue)清出現(xian)云(yun)霧狀渾濁(zhuo)。當產品(pin)在(zai) 37℃保存(cun)時,這種(zhong)現(xian)象(xiang)尤其明(ming)顯,在(zai)倒置(zhi)顯微鏡(jing)下可(ke)觀察(cha)到(dao)小黑點的存(cun)在(zai)。這些小黑點在(zai)布朗運(yun)動(dong)的作用(yong)下四(si)處游(you)動(dong),常被(bei)誤認為(wei)是微生物污染。

 

3. 其他成分(Other)

血清中的(de)其他成分也(ye)會形成沉淀,例如膽固醇形成的(de)油脂滴和其他蛋白沉淀等。

Gibco 10099141 之胎(tai)牛血清沉淀會(hui)影響細胞培養嗎?

1. 細胞生長(chang)

我們在出廠前都會對血(xue)(xue)(xue)清進(jin)行一系(xi)列質(zhi)檢測(ce)試,確保血(xue)(xue)(xue)清質(zhi)量達到嚴格標(biao)準。血(xue)(xue)(xue)清測(ce)試和(he)細胞培養(yang)(yang)經驗也表明,其沉(chen)淀成分不(bu)會影響血(xue)(xue)(xue)清作為細胞培養(yang)(yang)添加物的表現。這一點得(de)到了眾多客戶(hu)和(he)其他血(xue)(xue)(xue)清供應商(shang)的肯定。解凍之(zhi)后(hou), 血(xue)(xue)(xue)清中(zhong)纖(xian)維(wei)蛋白原往往會發生凝集,形成肉眼可見(jian)的沉(chen)淀。

 

2. 懷疑污染

磷(lin)酸鈣顆粒(li)經(jing)常(chang)會(hui)被當(dang)成微生(sheng)物污染而引發(fa)不必要的擔(dan)憂(you)。一(yi)般情況下(xia),當(dang)操作人(ren)員融化血(xue)清(qing)(qing)后注意到有霧狀渾濁(zhuo)(zhuo)時,常(chang)將(jiang)其存(cun)放在(zai) 4℃冰(bing)箱中觀察(cha),并(bing)考慮接下(xia)來是否(fou)繼續(xu)使用。但這樣(yang)會(hui)使沉(chen)淀(dian)進一(yi)步增多,反而會(hui)使血(xue)清(qing)(qing)更加(jia)渾濁(zhuo)(zhuo),進而誤以(yi)為存(cun)在(zai)血(xue)清(qing)(qing)污染。并(bing)且(qie),在(zai)倒置顯(xian)微鏡下(xia),可(ke)在(zai)血(xue)清(qing)(qing)中觀察(cha)到四處游動的小(xiao)黑點(磷(lin)酸鈣顆粒(li)的布朗(lang)運動),更容易使人(ren)誤以(yi)為存(cun)在(zai)微生(sheng)物污染。

 

為(wei)防(fang)止(zhi)這類誤解(jie)的產生,我們不建議客戶培(pei)(pei)養(yang)(yang)血清來驗證是(shi)否存在污染(ran),而是(shi)將(jiang)血清直(zhi)接接種在細菌培(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)上進行(xing)培(pei)(pei)養(yang)(yang),以觀察(cha)是(shi)否有細菌的增殖(zhi)。并且,進行(xing)革(ge)蘭氏染(ran)色,并在油鏡(100 X 10 倍)下觀察(cha)可(ke)直(zhi)接確認是(shi)否存在微生物(wu)污染(ran)。

怎樣操(cao)作可以盡量避免沉(chen)淀出現?

1. 正確解凍(dong)

首先,應按照逐步解(jie)凍(dong)的(de)方式正確解(jie)凍(dong)血清:從(cong)-20℃取出后(hou),置(zhi)于 4℃冰箱緩慢(man)解(jie)凍(dong),zui后(hou)置(zhi)于室溫完成解(jie)凍(dong)。如果(guo)直接從(cong)-20℃拿到室溫或 37 ℃水浴解(jie)凍(dong),則非常容易產生(sheng)沉淀(dian)。在(zai)解(jie)凍(dong)過程中(zhong),請(qing)注意時不時緩慢(man)搖(yao)晃瓶子,減少沉淀(dian)的(de)產生(sheng)。為避免反復凍(dong)融,建議(yi)您將(jiang)血清分裝使用。

 

2. 使用和保存注意事(shi)項(xiang)

血清(qing)沉(chen)淀(dian)很難預測和(he)避免,出現沉(chen)淀(dian)后也(ye)無(wu)需擔憂,這(zhe)并不會(hui)影響血清(qing)的(de)品質。已知血清(qing)沉(chen)淀(dian)在以下(xia)條(tiao)件下(xia)會(hui)有增(zeng)多的(de)可能(neng):

1) 熱滅活;

2) 37℃培養;

3) 反復凍融;

4) 伽(jia)馬射線照(zhao)射;

5) 2-8℃長期保(bao)存;

6) 長(chang)期保存于可(ke)自動化霜的冰箱中(溫度不穩定)。

 

血清(qing)沉淀的(de)(de)形成機理多種多樣,具體的(de)(de)機理尚(shang)不(bu)十分明確。我們尚(shang)不(bu)能(neng)準確預測和(he)控制血清(qing)沉淀的(de)(de)產(chan)生。目前(qian)市面上所有品牌(pai)的(de)(de)血清(qing)產(chan)品都存(cun)在沉淀現象,這一點可以在各品牌(pai)上關(guan)于沉淀問題的(de)(de)聲明上得到證實。

出現血清沉淀該如何處理(li)?

我們建(jian)議您采用2000 rpm 離心(xin)5分鐘,取(qu)上清使用就好,比過濾方便,不需要另外(wai)準(zhun)備濾心(xin)和針筒(tong),又不容易(yi)污染。

總 結:

血清產品中出(chu)現沉淀(dian)屬于常見現象,但不會影響血清的(de)品質,對(dui)細(xi)胞培養(yang)而(er)言(yan)也是沒有任何問題的(de),大家可以放心使用!

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