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SERANA胎牛血清 S-FBS-AU-015 胎牛血清沉淀

發布時間:2017-12-08瀏(liu)覽:1914次

SERANA胎牛(niu)血(xue)清  S-FBS-AU-015 胎牛(niu)血(xue)清沉淀

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SERANA胎牛(niu)血(xue)清(qing)  S-FBS-AU-015 胎牛(niu)血(xue)清(qing)沉淀是什(shen)么?

血清中經常(chang)會出現(xian)肉眼(yan)可見的沉淀,其成分(fen)有多(duo)種類型(xing),產生(sheng)的原因有很多(duo),主要(yao)有纖維蛋白、磷酸鈣還有一些其它成分(fen)。

1. 纖維蛋白(Fibrin)

血清中肉眼可見(jian)的(de)(de)沉(chen)淀(dian)物大多屬(shu)于這一類型。由于在生(sheng)產過(guo)(guo)程中,血清采(cai)集、過(guo)(guo)濾(3 次 0.1 μm過(guo)(guo)濾)和(he)灌裝處理都是在低溫(wen)條件(jian)下快速完成, 此(ci)時血清中纖(xian)維蛋白(bai)原(yuan)(Fibrinogen)處于溶解狀態(tai)。但在解凍之(zhi)后, 血清中纖(xian)維蛋白(bai)原(yuan)往(wang)(wang)往(wang)(wang)會發(fa)生(sheng)凝集,形成肉眼可見(jian)的(de)(de)沉(chen)淀(dian)。

2. 磷(lin)酸(suan)鈣(Calcium Phosphate)

這(zhe)(zhe)是一種(zhong)常見的沉淀成分,通常會(hui)造成血清出現云霧狀渾濁。當(dang)產品在(zai) 37℃保存時,這(zhe)(zhe)種(zhong)現象尤其明(ming)顯(xian),在(zai)倒置顯(xian)微鏡下(xia)可(ke)觀察到(dao)小黑(hei)點的存在(zai)。這(zhe)(zhe)些(xie)小黑(hei)點在(zai)布朗運動的作用(yong)下(xia)四處游動,常被誤(wu)認為是微生物污染。

 

3. 其他(ta)成分(fen)(Other)

血清中的其他成(cheng)分也會形成(cheng)沉淀(dian),例如膽固醇(chun)形成(cheng)的油脂滴(di)和其他蛋(dan)白沉淀(dian)等。

Gibco 10099141 之胎牛血清沉淀會影響(xiang)細(xi)胞培養嗎?

1. 細胞生長

我們在出廠(chang)前(qian)都會(hui)對血(xue)清(qing)進行(xing)一(yi)系(xi)列質(zhi)檢測(ce)試(shi),確保血(xue)清(qing)質(zhi)量(liang)達到(dao)嚴(yan)格(ge)標準。血(xue)清(qing)測(ce)試(shi)和細胞培養(yang)經(jing)驗也(ye)表(biao)明,其沉淀成(cheng)分不會(hui)影響血(xue)清(qing)作為細胞培養(yang)添(tian)加物的表(biao)現。這一(yi)點得到(dao)了(le)眾多客(ke)戶(hu)和其他血(xue)清(qing)供應商的肯定(ding)。解(jie)凍之后, 血(xue)清(qing)中(zhong)纖維蛋白原往往會(hui)發生(sheng)凝集,形成(cheng)肉眼可見(jian)的沉淀。

 

2. 懷疑污染(ran)

磷(lin)酸鈣顆(ke)(ke)粒(li)經常會(hui)被當成微(wei)生物污染而引發不必要的(de)擔憂。一般(ban)情況下(xia),當操(cao)作人(ren)員融化血(xue)清后注意到有霧狀渾濁(zhuo)時,常將(jiang)其存放在(zai) 4℃冰箱中(zhong)觀察,并(bing)考慮接下(xia)來是否繼續使(shi)用。但(dan)這樣會(hui)使(shi)沉淀進一步增多,反而會(hui)使(shi)血(xue)清更加渾濁(zhuo),進而誤(wu)以(yi)為存在(zai)血(xue)清污染。并(bing)且,在(zai)倒置顯微(wei)鏡下(xia),可(ke)在(zai)血(xue)清中(zhong)觀察到四處游(you)動的(de)小(xiao)黑點(dian)(磷(lin)酸鈣顆(ke)(ke)粒(li)的(de)布朗運動),更容易使(shi)人(ren)誤(wu)以(yi)為存在(zai)微(wei)生物污染。

 

為防止這類(lei)誤解的產生,我們(men)不建(jian)議客戶培養血清(qing)來(lai)驗證是(shi)否存在污染(ran)(ran),而是(shi)將血清(qing)直接(jie)接(jie)種在細菌(jun)培養基(ji)上進(jin)行(xing)培養,以觀察是(shi)否有(you)細菌(jun)的增殖。并且,進(jin)行(xing)革蘭氏染(ran)(ran)色,并在油鏡(jing)(100 X 10 倍)下(xia)觀察可(ke)直接(jie)確(que)認是(shi)否存在微生物污染(ran)(ran)。

怎樣操作(zuo)可(ke)以盡(jin)量避免沉淀出現(xian)?

1. 正確解凍

首(shou)先,應按照逐步解凍(dong)(dong)(dong)的方式正確解凍(dong)(dong)(dong)血(xue)清(qing):從(cong)-20℃取出(chu)后,置(zhi)于 4℃冰箱緩慢(man)解凍(dong)(dong)(dong),zui后置(zhi)于室(shi)溫完成解凍(dong)(dong)(dong)。如果(guo)直(zhi)接(jie)從(cong)-20℃拿到(dao)室(shi)溫或(huo) 37 ℃水浴(yu)解凍(dong)(dong)(dong),則非常(chang)容易產(chan)生(sheng)沉(chen)淀。在(zai)解凍(dong)(dong)(dong)過(guo)程(cheng)中,請注意時(shi)不(bu)時(shi)緩慢(man)搖晃瓶子,減(jian)少沉(chen)淀的產(chan)生(sheng)。為避免反復凍(dong)(dong)(dong)融,建議您將血(xue)清(qing)分裝使用。

 

2. 使用和保(bao)存注意事項

血(xue)清沉淀很(hen)難預測(ce)和避免,出現沉淀后也無(wu)需擔憂,這并不會(hui)影響血(xue)清的(de)品質。已知血(xue)清沉淀在以下條件下會(hui)有(you)增(zeng)多的(de)可(ke)能:

1) 熱滅活(huo);

2) 37℃培(pei)養;

3) 反復凍(dong)融;

4) 伽馬(ma)射線照射;

5) 2-8℃長期保存;

6) 長(chang)期保存(cun)于可自動化霜的冰箱(xiang)中(溫度(du)不穩定)。

 

血(xue)清(qing)沉淀的(de)形成機(ji)理多(duo)種多(duo)樣(yang),具體(ti)的(de)機(ji)理尚(shang)不十分明確。我們尚(shang)不能準確預測和控(kong)制(zhi)血(xue)清(qing)沉淀的(de)產生。目前(qian)市面上(shang)所有品(pin)牌的(de)血(xue)清(qing)產品(pin)都存(cun)在沉淀現象,這一點可以在各品(pin)牌上(shang)關于(yu)沉淀問(wen)題的(de)聲明上(shang)得到證實(shi)。

出現血(xue)清沉淀該如(ru)何處理?

我們建議您(nin)采用2000 rpm 離心5分鐘,取(qu)上清使(shi)用就好,比過(guo)濾方便,不需(xu)要另外(wai)準備濾心和(he)針筒,又不容易污染。

總 結:

血清產(chan)品中出現沉淀屬于(yu)常見現象,但不會(hui)影響血清的品質(zhi),對細胞培(pei)養而言也是沒有任何問(wen)題(ti)的,大家(jia)可以放心使用!

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