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BOVOGEN血清 SFBS 胎牛血清沉淀

發(fa)布(bu)時間:2017-12-08瀏覽:1644次

BOVOGEN血(xue)清   SFBS 胎(tai)牛血(xue)清沉淀(dian)   

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BOVOGEN血清   SFBS 胎(tai)牛血清沉淀是什么?

血清中經(jing)常會出現肉(rou)眼可見的沉淀,其(qi)成(cheng)分有多種類(lei)型,產生的原因有很多,主要(yao)有纖維蛋(dan)白(bai)、磷酸(suan)鈣還有一些其(qi)它(ta)成(cheng)分。

1. 纖(xian)維蛋白(bai)(Fibrin)

血(xue)清(qing)中肉(rou)眼(yan)可見的(de)沉淀(dian)物(wu)大多屬于這(zhe)一類型。由于在(zai)(zai)生產過(guo)程中,血(xue)清(qing)采集、過(guo)濾(3 次(ci) 0.1 μm過(guo)濾)和灌(guan)裝處理(li)都是在(zai)(zai)低(di)溫條件下(xia)快速完成(cheng), 此時血(xue)清(qing)中纖維(wei)蛋白(bai)原(Fibrinogen)處于溶解狀(zhuang)態。但(dan)在(zai)(zai)解凍之后, 血(xue)清(qing)中纖維(wei)蛋白(bai)原往(wang)往(wang)會發(fa)生凝集,形成(cheng)肉(rou)眼(yan)可見的(de)沉淀(dian)。

2. 磷(lin)酸鈣(gai)(Calcium Phosphate)

這是一種(zhong)常見(jian)的沉淀成分,通常會造成血清出現云霧狀(zhuang)渾濁。當產品在(zai)(zai) 37℃保存時,這種(zhong)現象尤其明顯,在(zai)(zai)倒(dao)置顯微(wei)(wei)鏡下可觀察到小黑點(dian)的存在(zai)(zai)。這些小黑點(dian)在(zai)(zai)布(bu)朗運(yun)動的作用下四處游動,常被(bei)誤認(ren)為是微(wei)(wei)生物污染。

3. 其(qi)他成分(Other)

血(xue)清(qing)中(zhong)的其(qi)他(ta)成(cheng)分也(ye)會形成(cheng)沉淀(dian),例如膽固醇形成(cheng)的油脂(zhi)滴和其(qi)他(ta)蛋(dan)白沉淀(dian)等。

Gibco 10099141 之(zhi)胎牛血清沉(chen)淀會影響細(xi)胞培養嗎?

1. 細胞生長

我(wo)們在出廠(chang)前都會(hui)對血清(qing)(qing)進行一(yi)系列質(zhi)檢測試(shi),確保血清(qing)(qing)質(zhi)量達到嚴(yan)格標(biao)準。血清(qing)(qing)測試(shi)和細(xi)胞(bao)培養經驗也表明(ming),其沉(chen)淀(dian)(dian)成分不會(hui)影響血清(qing)(qing)作為細(xi)胞(bao)培養添(tian)加物的表現。這一(yi)點得(de)到了(le)眾多客戶和其他血清(qing)(qing)供應商的肯定。解(jie)凍(dong)之后, 血清(qing)(qing)中纖維蛋白原往(wang)往(wang)會(hui)發生凝集,形成肉眼可見(jian)的沉(chen)淀(dian)(dian)。

2. 懷(huai)疑污染

磷(lin)酸鈣顆粒(li)經常(chang)會被當成微(wei)(wei)生物(wu)污染而引發不必要的(de)擔憂。一般情況下(xia),當操作人員融(rong)化血清(qing)后注意到有霧狀(zhuang)渾濁時,常(chang)將其(qi)存放在(zai) 4℃冰箱中觀(guan)察(cha),并(bing)考慮接下(xia)來是否繼續(xu)使用(yong)。但這樣會使沉淀進(jin)一步增多,反而會使血清(qing)更(geng)加渾濁,進(jin)而誤以(yi)為存在(zai)血清(qing)污染。并(bing)且,在(zai)倒置顯微(wei)(wei)鏡下(xia),可(ke)在(zai)血清(qing)中觀(guan)察(cha)到四(si)處游動的(de)小黑點(磷(lin)酸鈣顆粒(li)的(de)布朗運動),更(geng)容易使人誤以(yi)為存在(zai)微(wei)(wei)生物(wu)污染。

為防止這類誤解的產生,我們不建議客戶培養血清來驗證是否存在污染,而是將血清直接接種在細菌培養基上進行培養,以觀察是否有細菌的增殖。并且,進行革蘭氏染色,并在油鏡(100 X 10 倍)下觀察可直接確認是否存在微生物污染。

怎樣操作可以盡量(liang)避免沉淀出現?

1. 正確解凍

首先,應按照逐步解(jie)凍(dong)(dong)的方式正確解(jie)凍(dong)(dong)血清(qing):從-20℃取出后,置(zhi)于(yu) 4℃冰箱緩慢解(jie)凍(dong)(dong),zui后置(zhi)于(yu)室溫(wen)完(wan)成解(jie)凍(dong)(dong)。如果直(zhi)接從-20℃拿到室溫(wen)或 37 ℃水浴解(jie)凍(dong)(dong),則(ze)非(fei)常容(rong)易產生沉淀(dian)。在(zai)解(jie)凍(dong)(dong)過程中,請注意時不時緩慢搖晃瓶子,減少沉淀(dian)的產生。為避免反復凍(dong)(dong)融(rong),建(jian)議您將血清(qing)分裝(zhuang)使用。

2. 使用和保存注意(yi)事項

血清(qing)沉淀很難預(yu)測和避免,出現沉淀后也無需擔憂,這并不會影響血清(qing)的品質。已知血清(qing)沉淀在以下(xia)(xia)條(tiao)件下(xia)(xia)會有增多的可(ke)能:

1) 熱滅(mie)活;

2) 37℃培養;

3) 反復凍融;

4) 伽馬射線照射;

5) 2-8℃長(chang)期保存;

6) 長(chang)期(qi)保存于可自動化霜的冰箱中(溫度(du)不穩定(ding))。

血(xue)清(qing)沉(chen)淀的(de)形成機理(li)多種多樣,具體(ti)的(de)機理(li)尚(shang)(shang)不十分明確。我們(men)尚(shang)(shang)不能準確預測和控制血(xue)清(qing)沉(chen)淀的(de)產(chan)生。目前市面上所(suo)有品牌的(de)血(xue)清(qing)產(chan)品都存在沉(chen)淀現(xian)象,這一點可以在各品牌上關于(yu)沉(chen)淀問題的(de)聲(sheng)明上得到證實。

出現血清沉淀該(gai)如(ru)何處理(li)?

我們建議您采用(yong)2000 rpm 離心5分鐘,取上清使用(yong)就好(hao),比過濾方(fang)便,不需要另外(wai)準備濾心和針筒(tong),又不容易污染。

總(zong) 結:

血(xue)清產品中出(chu)現沉淀屬(shu)于常見現象(xiang),但不(bu)會影響血(xue)清的品質,對細胞培(pei)養而(er)言也是沒有任(ren)何(he)問題的,大家可以(yi)放心(xin)使(shi)用(yong)!

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