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BOVOGEN血清 胎牛(niu)(niu)血清FBS 胎牛(niu)(niu)血清沉淀(dian)
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BOVOGEN血清 胎牛血清FBS 胎牛血清沉淀是(shi)什么?
血清(qing)中經(jing)常會(hui)出(chu)現(xian)肉眼(yan)可見(jian)的沉淀,其成(cheng)分有(you)多種類型(xing),產(chan)生的原因有(you)很多,主(zhu)要有(you)纖(xian)維蛋(dan)白、磷酸鈣還(huan)有(you)一些其它成(cheng)分。
1. 纖維蛋白(bai)(Fibrin)
血(xue)清中肉(rou)眼(yan)可(ke)見(jian)的沉淀物大多屬(shu)于(yu)這一類(lei)型。由于(yu)在(zai)生產過程中,血(xue)清采集(ji)、過濾(lv)(3 次(ci) 0.1 μm過濾(lv))和灌裝處理都是在(zai)低溫條件(jian)下快速(su)完成(cheng), 此(ci)時血(xue)清中纖維(wei)蛋白原(Fibrinogen)處于(yu)溶解(jie)(jie)狀態(tai)。但在(zai)解(jie)(jie)凍(dong)之后, 血(xue)清中纖維(wei)蛋白原往往會(hui)發生凝(ning)集(ji),形成(cheng)肉(rou)眼(yan)可(ke)見(jian)的沉淀。
2. 磷酸(suan)鈣(Calcium Phosphate)
這是一(yi)種常見的(de)沉淀成分,通常會造成血清出現云霧狀渾濁。當產品在 37℃保存時,這種現象尤其(qi)明顯(xian),在倒置(zhi)顯(xian)微(wei)鏡(jing)下可觀(guan)察(cha)到(dao)小黑點(dian)的(de)存在。這些小黑點(dian)在布(bu)朗運動的(de)作(zuo)用下四(si)處游(you)動,常被誤認為是微(wei)生物污染。
3. 其他成分(Other)
血清中的其他(ta)成分也會形成沉淀,例(li)如膽固(gu)醇(chun)形成的油脂滴(di)和其他(ta)蛋白沉淀等。
Gibco 10099141 之胎牛血清(qing)沉淀會(hui)影(ying)響(xiang)細胞培養嗎?
1. 細胞(bao)生(sheng)長
我們在出(chu)廠前(qian)都會(hui)對血清(qing)進行(xing)一系列質檢測(ce)試,確保(bao)血清(qing)質量達到嚴格標準(zhun)。血清(qing)測(ce)試和細胞培養經驗也表明,其(qi)沉淀(dian)成分(fen)不會(hui)影(ying)響血清(qing)作為細胞培養添加物的表現。這(zhe)一點得到了眾(zhong)多客戶和其(qi)他血清(qing)供應商的肯定。解凍(dong)之(zhi)后, 血清(qing)中纖維(wei)蛋白(bai)原往往會(hui)發(fa)生凝集,形成肉眼可見(jian)的沉淀(dian)。
2. 懷(huai)疑污(wu)染
磷酸鈣(gai)顆粒經常會被當(dang)成微(wei)生物污染而(er)引發不必(bi)要的擔憂。一(yi)般情況下(xia),當(dang)操作人員融化血(xue)清后注意到有霧狀渾(hun)(hun)濁時,常將其存(cun)放在(zai) 4℃冰(bing)箱中觀(guan)察(cha)(cha),并考慮接下(xia)來(lai)是否繼(ji)續(xu)使(shi)(shi)用(yong)。但這樣會使(shi)(shi)沉淀進一(yi)步(bu)增多,反而(er)會使(shi)(shi)血(xue)清更加渾(hun)(hun)濁,進而(er)誤(wu)以為(wei)存(cun)在(zai)血(xue)清污染。并且,在(zai)倒置顯微(wei)鏡下(xia),可在(zai)血(xue)清中觀(guan)察(cha)(cha)到四(si)處游(you)動(dong)(dong)的小黑點(磷酸鈣(gai)顆粒的布(bu)朗(lang)運動(dong)(dong)),更容易使(shi)(shi)人誤(wu)以為(wei)存(cun)在(zai)微(wei)生物污染。
為防止這類誤解的產生,我們不建議客戶培養血清來驗證是否存在污染,而是將血清直接接種在細菌培養基上進行培養,以觀察是否有細菌的增殖。并且,進行革蘭氏染色,并在油鏡(100 X 10 倍)下觀察可直接確認是否存在微生物污染。
怎樣(yang)操作可以盡(jin)量避免沉淀出現?
1. 正確解凍
首先,應按(an)照逐步解凍(dong)的(de)方式正確解凍(dong)血清:從-20℃取出后,置于 4℃冰箱緩(huan)慢解凍(dong),zui后置于室溫完成(cheng)解凍(dong)。如果直接(jie)從-20℃拿到室溫或 37 ℃水浴(yu)解凍(dong),則非常容易產(chan)生(sheng)沉(chen)淀。在(zai)解凍(dong)過(guo)程中,請(qing)注意時(shi)(shi)不(bu)時(shi)(shi)緩(huan)慢搖晃瓶子(zi),減少沉(chen)淀的(de)產(chan)生(sheng)。為避免(mian)反復凍(dong)融,建議您將血清分裝(zhuang)使用。
2. 使用和保存注意事項
血(xue)(xue)清沉(chen)淀(dian)(dian)很難預測和避免,出現沉(chen)淀(dian)(dian)后(hou)也無需擔憂,這并不(bu)會(hui)影響(xiang)血(xue)(xue)清的品(pin)質。已知血(xue)(xue)清沉(chen)淀(dian)(dian)在以下(xia)條件下(xia)會(hui)有增多的可(ke)能(neng):
1) 熱(re)滅(mie)活;
2) 37℃培養;
3) 反復(fu)凍融(rong);
4) 伽馬(ma)射(she)線照(zhao)射(she);
5) 2-8℃長期保存;
6) 長(chang)期保存(cun)于(yu)可自(zi)動化霜的冰箱中(溫(wen)度不穩定)。
血(xue)清(qing)(qing)沉淀(dian)的(de)形成機理(li)多(duo)種多(duo)樣,具體的(de)機理(li)尚不(bu)十分明確。我們尚不(bu)能準確預測和(he)控制(zhi)血(xue)清(qing)(qing)沉淀(dian)的(de)產生。目前市面上所(suo)有品牌的(de)血(xue)清(qing)(qing)產品都(dou)存在(zai)沉淀(dian)現象,這一點可以在(zai)各品牌上關于(yu)沉淀(dian)問題的(de)聲明上得到(dao)證實。
出現血清沉淀(dian)該如何(he)處理(li)?
我們建議您(nin)采用2000 rpm 離(li)心(xin)5分鐘,取上清使用就好,比過濾方(fang)便(bian),不需要另外(wai)準備濾心(xin)和針筒(tong),又不容(rong)易(yi)污染。
總(zong) 結:
血清(qing)產品(pin)(pin)中出現沉淀屬于常見現象,但不會(hui)影(ying)響血清(qing)的(de)品(pin)(pin)質,對細胞培養而言也是沒有任何問題的(de),大(da)家可(ke)以放心使用!