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PAA|BI|SIGMA H4522 人AB血(xue)清(qing)之沉淀
PAA|BI|SIGMA血(xue)清(qing) 胎牛血(xue)清(qing)FBS A15-101 EU 500ML
PAA|BI|SIGMA血清(qing) 胎(tai)牛(niu)血清(qing)FBS A15-151 EU 500ML
PAA|BI|SIGMA血清(qing)(qing) 胎牛血清(qing)(qing)FBS 04-001-1ACS SOUTH AMERICA 500ML
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PAA|BI|SIGMA血(xue)清 胎牛血(xue)清FBS 100-908 SOUTH AMERICA 500ML
PAA|BI|SIGMA血清 胎牛(niu)血清FBS 100-700 AUSTRALIA 500ML
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PAA|BI|SIGMA血清 人(ren)AB血清 H4522 USA 100ML
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PAA|BI|SIGMA H4522 人AB血清之沉淀 是(shi)什么?
血清中(zhong)經常會(hui)出現(xian)肉眼可(ke)見的(de)沉淀,其成分有(you)多(duo)(duo)種類型,產生(sheng)的(de)原(yuan)因有(you)很多(duo)(duo),主(zhu)要(yao)有(you)纖維蛋白(bai)、磷(lin)酸鈣還有(you)一些其它成分。
1. 纖維蛋白(Fibrin)
血(xue)清中(zhong)肉眼(yan)可(ke)見(jian)的沉(chen)淀(dian)物大多屬于(yu)(yu)(yu)這一類型。由于(yu)(yu)(yu)在生產過程中(zhong),血(xue)清采集、過濾(3 次 0.1 μm過濾)和灌(guan)裝處理都是在低溫條件下快速完成, 此時血(xue)清中(zhong)纖(xian)維蛋白原(Fibrinogen)處于(yu)(yu)(yu)溶解狀態。但在解凍之(zhi)后(hou), 血(xue)清中(zhong)纖(xian)維蛋白原往(wang)往(wang)會發(fa)生凝集,形成肉眼(yan)可(ke)見(jian)的沉(chen)淀(dian)。
2. 磷酸(suan)鈣(Calcium Phosphate)
這是一種常見的沉淀成(cheng)分,通(tong)常會造(zao)成(cheng)血(xue)清出現(xian)云(yun)霧狀渾濁。當產(chan)品在(zai) 37℃保存(cun)時,這種現(xian)象尤其明顯(xian),在(zai)倒置顯(xian)微鏡下可觀察到小(xiao)黑點的存(cun)在(zai)。這些小(xiao)黑點在(zai)布朗運動的作用下四處游(you)動,常被誤認(ren)為是微生物污染。
3. 其他成分(Other)
血清中的其他(ta)成(cheng)分也會形(xing)成(cheng)沉淀,例如膽(dan)固醇形(xing)成(cheng)的油脂滴和其他(ta)蛋(dan)白沉淀等。
Gibco 10099141 之胎牛血(xue)清沉淀會影響細胞培養嗎?
1. 細胞生長
我們(men)在出(chu)廠(chang)前(qian)都(dou)會對血清(qing)(qing)進行(xing)一(yi)系列質檢測(ce)試(shi)(shi),確保血清(qing)(qing)質量達到嚴格標準。血清(qing)(qing)測(ce)試(shi)(shi)和(he)細胞培養經驗也(ye)表(biao)明,其沉淀成分不會影響血清(qing)(qing)作為細胞培養添(tian)加(jia)物(wu)的表(biao)現。這一(yi)點(dian)得到了(le)眾多客戶和(he)其他血清(qing)(qing)供(gong)應商的肯(ken)定(ding)。解凍之后, 血清(qing)(qing)中纖維蛋白(bai)原往(wang)往(wang)會發生(sheng)凝集,形成肉眼可見的沉淀。
2. 懷疑污染
磷(lin)酸鈣顆粒經(jing)常會(hui)被當成微(wei)生(sheng)物污染而引(yin)發不必要的擔憂。一般情況下(xia),當操作(zuo)人(ren)員融化血清后(hou)注意到有霧狀渾濁(zhuo)時,常將其存(cun)放在 4℃冰箱中觀察,并考慮(lv)接下(xia)來是否繼續使(shi)(shi)用(yong)。但這樣會(hui)使(shi)(shi)沉淀進一步增多,反而會(hui)使(shi)(shi)血清更加渾濁(zhuo),進而誤(wu)以(yi)為存(cun)在血清污染。并且,在倒置顯微(wei)鏡下(xia),可在血清中觀察到四處(chu)游動的小黑點(磷(lin)酸鈣顆粒的布朗(lang)運(yun)動),更容(rong)易使(shi)(shi)人(ren)誤(wu)以(yi)為存(cun)在微(wei)生(sheng)物污染。
為防止這類誤解的產生,我們不建議客戶培養血清來驗證是否存在污染,而是將血清直接接種在細菌培養基上進行培養,以觀察是否有細菌的增殖。并且,進行革蘭氏染色,并在油鏡(100 X 10 倍)下觀察可直接確認是否存在微生物污染。
怎(zen)樣操作可以盡(jin)量避免沉淀出現?
1. 正確解凍
首先,應按照逐步解(jie)凍(dong)(dong)(dong)的(de)方式正確解(jie)凍(dong)(dong)(dong)血清(qing):從(cong)-20℃取出后,置于 4℃冰(bing)箱(xiang)緩慢解(jie)凍(dong)(dong)(dong),zui后置于室(shi)溫完成解(jie)凍(dong)(dong)(dong)。如果直接從(cong)-20℃拿到室(shi)溫或 37 ℃水(shui)浴(yu)解(jie)凍(dong)(dong)(dong),則非(fei)常(chang)容易產(chan)生沉淀。在解(jie)凍(dong)(dong)(dong)過程中,請注意時不時緩慢搖晃瓶子,減少(shao)沉淀的(de)產(chan)生。為(wei)避(bi)免(mian)反復凍(dong)(dong)(dong)融,建議您將血清(qing)分(fen)裝使用。
2. 使用和(he)保存(cun)注意事項(xiang)
血清(qing)(qing)沉(chen)淀(dian)很難預測和避免,出現沉(chen)淀(dian)后(hou)也無需(xu)擔憂(you),這(zhe)并不會(hui)影(ying)響血清(qing)(qing)的品質(zhi)。已知血清(qing)(qing)沉(chen)淀(dian)在以下條件下會(hui)有增(zeng)多的可能:
1) 熱滅活(huo);
2) 37℃培養;
3) 反復凍融;
4) 伽馬射線照射;
5) 2-8℃長(chang)期保存;
6) 長期保存于可自動化霜的冰箱中(zhong)(溫度不(bu)穩定(ding))。
血(xue)清(qing)(qing)(qing)沉(chen)淀(dian)的(de)(de)形成機(ji)理(li)多(duo)種(zhong)多(duo)樣(yang),具體的(de)(de)機(ji)理(li)尚不十分明確(que)。我(wo)們(men)尚不能準確(que)預測和控制血(xue)清(qing)(qing)(qing)沉(chen)淀(dian)的(de)(de)產生。目前市面上所有品(pin)牌的(de)(de)血(xue)清(qing)(qing)(qing)產品(pin)都(dou)存在沉(chen)淀(dian)現(xian)象,這一點可以在各品(pin)牌上關(guan)于沉(chen)淀(dian)問(wen)題的(de)(de)聲明上得(de)到證實。
出現(xian)血清(qing)沉淀該如(ru)何處理?
我們(men)建議(yi)您采用(yong)2000 rpm 離心5分鐘,取上清使用(yong)就好(hao),比過(guo)濾方便,不(bu)需要(yao)另外準備濾心和針筒,又不(bu)容易(yi)污染。
總 結:
血清產品中(zhong)出現沉淀屬于常(chang)見現象,但不(bu)會(hui)影響血清的(de)品質,對細(xi)胞培養而言(yan)也是沒有任何問題的(de),大家(jia)可以(yi)放心(xin)使用!
PAA|BI|SIGMA H4522 人AB血清之沉淀