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C-33 A,人子宮頸癌細胞 消化要有個度
產(chan)品代號:C-33 A
中文名稱:人子宮頸癌細胞(bao)
種屬(shu):人
是(shi)否鑒(jian)定:已鑒(jian)定
庫存狀態:現貨
慧穎(ying)生物(wu)提供2000種(zhong)類細(xi)胞株(zhu)細(xi)胞系,400多株(zhu)已鑒定細(xi)胞,涉及種(zhong)屬:人,大鼠(shu),小鼠(shu),兔子(zi),魚,牛,倉(cang)鼠(shu)等,我們(men)提供好(hao)的產(chan)品,好(hao)的服務,好(hao)的技術,復蘇周期短,*,細(xi)胞狀態良好(hao),飽滿,有光澤,無(wu)支原體。
C-33 A,人(ren)子宮(gong)頸癌細胞 消(xiao)化(hua)要有(you)個(ge)度
細胞(bao)培(pei)養,尤其是細胞(bao)系的(de)培(pei)養,就(jiu)細胞(bao)消化(hua)而言,多做、善于總結,就(jiu)可(ke)以把細胞(bao)養的(de)越來越好(hao)
絕大部分細胞消化只要用(yong)胰酶潤洗一遍(bian)即可(ke):
吸(xi)去胰酶(mei)后,殘(can)留的那些(xie)無法計算體積的附(fu)著(zhu)在(zai)細胞(bao)(bao)表(biao)面的微量胰酶(mei)在(zai)37度一般不到2min足夠(gou)消(xiao)化(hua)細胞(bao)(bao)(絕(jue)大部(bu)分1min不到)。對(dui)于這(zhe)些(xie)細胞(bao)(bao)原則上(shang)不要用胰酶(mei)孵(fu)育細胞(bao)(bao),連續這(zhe)樣傳代(dai),對(dui)細胞(bao)(bao)傷害很(hen)大。簡單(dan)的程(cheng)序是PBS潤洗(xi)吸(xi)去,胰酶(mei)潤洗(xi)吸(xi)去,然(ran)后37度消(xiao)化(hua)。
什么算(suan)是消化好了呢?
不需要把細(xi)胞全部消化(hua)成間隔分布很離散的單個圓形才(cai)算(suan)消化(hua)好了(le),一般你肉眼觀察貼壁細(xi)胞層,只要能移動了(le),多半(ban)呈沙壯移動,其(qi)實(shi)已經可以了(le)。
一般能移動了(le),說明(ming)細胞與培養基質(zhi)材(cai)料的(de)(de)附著已經消(xiao)(xiao)失了(le),細胞之(zhi)間的(de)(de)附著也(ye)已經消(xiao)(xiao)失了(le),細胞已經獨立分(fen)(fen)(fen)布(bu)了(le)(雖(sui)然沒有(you)呈現很廣的(de)(de)離散分(fen)(fen)(fen)布(bu))。這個時候應(ying)該停止消(xiao)(xiao)化,不要等到看(kan)到鏡下(xia)所有(you)細胞都分(fen)(fen)(fen)離得非常好,間隙很大,才停止。
細胞(bao)(bao)(bao)就(jiu)是*成單個(ge)(ge)細胞(bao)(bao)(bao)懸(xuan)液,之后在貼(tie)壁的(de)(de)(de)過程(cheng)中仍然會聚集,這個(ge)(ge)是貼(tie)壁培養的(de)(de)(de)細胞(bao)(bao)(bao),尤其是腫瘤細胞(bao)(bao)(bao)的(de)(de)(de)一(yi)個(ge)(ge)特性(xing),你可(ke)以嘗(chang)試(shi),準備100%的(de)(de)(de)單個(ge)(ge)細胞(bao)(bao)(bao)懸(xuan)液,貼(tie)壁后觀(guan)察細胞(bao)(bao)(bao),仍然是幾個(ge)(ge)幾個(ge)(ge)細胞(bao)(bao)(bao)聚集在一(yi)起。
一些懸浮培養細胞(bao)也是(shi)如此,容(rong)易聚(ju)集,不(bu)要過幾個(ge)小時就拿出(chu)來吹(chui)打成單(dan)細胞(bao)懸液。細胞(bao)只(zhi)要能從(cong)基質上脫離下來,即使是(shi)成片的(de)(比如Calu-3細胞(bao)),吹(chui)打不(bu)超過20次(一般10次即可),成小規模(mo)聚(ju)集(10個(ge)細胞(bao)左右)是(shi)正常(chang)的(de),不(bu)要再(zai)去延(yan)長消化時間,等待單(dan)細胞(bao)懸液出(chu)現。
比較難消(xiao)化(hua)的細胞:
潤洗方法5min還不能(neng)消化,以(yi)結腸癌(ai)細(xi)(xi)(xi)胞為例,比如(ru)HCT15、LS411和KM12細(xi)(xi)(xi)胞,胰酶消化,一般10 cm 培(pei)養皿,一次(ci)zui多加入300ul-500ul就足夠了。即使這樣(yang)難消化的細(xi)(xi)(xi)胞,一般不超(chao)過5min,即可見細(xi)(xi)(xi)胞成片(pian)移動,就應該(gai)停止(zhi)消化。一些正常細(xi)(xi)(xi)胞也會有難消化的時候,比如(ru)tsDC細(xi)(xi)(xi)胞,用胰酶孵育,3min左右(you)即可看(kan)到成片(pian)沙狀移動。
常(chang)規的細胞實(shi)驗(yan),受消(xiao)化影(ying)響不(bu)是很大:
如果不(bu)用(yong)胰酶(mei)去孵育而使用(yong)潤(run)(run)洗的方法消化(hua)的話(難消化(hua)細胞例外)。但(dan)少(shao)數(shu)(shu)實驗,比(bi)如病毒包裝,對(dui)細胞代(dai)數(shu)(shu),對(dui)細胞狀態(tai)要求*。這個時候(hou),胰酶(mei)消化(hua),就是潤(run)(run)洗,都會對(dui)細胞包裝病毒的能(neng)力有影響,傳代(dai)次數(shu)(shu)一(yi)多,細胞包裝能(neng)力就會逐(zhu)漸下降。這個時候(hou)都不(bu)用(yong)胰酶(mei)消化(hua),用(yong)一(yi)些鹽溶液(不(bu)是EDTA液)即可(ke)。這些鹽溶液通過影響細胞外基(ji)質相(xiang)關酶(mei)的活性,來使得細胞脫離基(ji)質附著(zhu)表面,但(dan)不(bu)切割任何蛋(dan)白。
EDTA的作(zuo)用:
許多人不(bu)用(yong)胰酶,只用(yong)EDTA,或者用(yong)胰酶/EDTA聯合作用(yong)。這(zhe)里(li)(li)要明(ming)白(bai),胰酶切割細胞外基質的(de)(de)(de)一(yi)(yi)些負責(ze)粘連和附著的(de)(de)(de)蛋白(bai),而EDTA通過螯合Ca離子,作用(yong)于(yu)整聯蛋白(bai)的(de)(de)(de)活性,所以EDTA的(de)(de)(de)作用(yong)更加(jia)溫和。有的(de)(de)(de)人在(zai)胰酶里(li)(li)添加(jia)一(yi)(yi)些EDTA,或者對付特(te)別難消化(hua)的(de)(de)(de)細胞,添加(jia)多一(yi)(yi)些EDTA,就是(shi)這(zhe)個(ge)道理。一(yi)(yi)般不(bu)要試圖延長消化(hua)時(shi)間(如(ru)果10min還消化(hua)不(bu)*的(de)(de)(de)話),而應該(gai)想其它辦(ban)法。
PBS洗(xi)滌:
消化之前(qian)用PBS洗滌,是常見的(de)(de)操作(zuo),因(yin)為血(xue)清中含有抑制(zhi)(zhi)胰(yi)酶的(de)(de)蛋白(bai)。對(dui)于一些難消化細(xi)胞,可(ke)以配(pei)制(zhi)(zhi)不(bu)含Ca,Mg離子的(de)(de)PBS,因(yin)為這些離子也(ye)會抑制(zhi)(zhi)胰(yi)酶的(de)(de)活性。但對(dui)于絕(jue)大(da)部分細(xi)胞用胰(yi)酶或者EDTA溶液潤洗即可(ke)消化,不(bu)需要配(pei)制(zhi)(zhi)不(bu)含Ca,Mg離子的(de)(de)溶液。
細胞代(dai)號 細胞(bao)名稱(cheng) 種屬 鑒(jian)定結果
C-33 A,人子宮頸癌細胞 消化要有個度(du)
編號 中文名稱 是否鑒定
5637 人膀胱癌細胞 人 √
7703 人肝(gan)癌細(xi)胞 人 √
143B 人骨肉瘤(liu)細胞 人(ren) √
22RV1 人前列腺癌細胞 人 √
293FT 人胚腎細胞 人 √
293T 人胚(pei)腎細胞 人 √
435S 人乳腺(xian)癌細胞(bao)/人黑素瘤細胞(bao) 人 √
453 人(ren)乳腺癌細胞 人 √
6T-CEM 人T細胞白血病細胞 人 √
769-P 人(ren)腎細(xi)胞(bao)腺癌(ai)細(xi)胞(bao) 人 √
786-O 人(ren)腎透明細(xi)胞腺(xian)癌細(xi)胞 人(ren) √
95-D 人(ren)高轉移肺(fei)癌細胞 人(ren) √
97H 人高轉移性肝癌細胞 人(ren) √
A172 人膠質母細胞瘤細胞 人 √
A2058 人黑色素瘤(liu)細胞 人(ren) √
A2780 人卵(luan)巢癌細胞 人 √
A375 人黑色素(su)瘤細(xi)胞株 人 √
A431 人表(biao)皮癌細胞 人 √
A498 人腎(shen)癌(ai)細胞 人 √
A549 人非小細(xi)胞肺(fei)癌(ai)細(xi) 人 √
A-673 人橫紋肌(ji)肉(rou)瘤細(xi)胞(bao) 人 √
ACHN 人腎細(xi)胞腺癌細(xi)胞 人 √
AGS 人胃腺癌細(xi)胞 人(ren) √
AN3CA 人子宮內膜腺癌(轉移)細胞(bao) 人 √
ARH-77 人漿細胞白血(xue)病 人 √
ARO 沒有,找(zhao)不到信息 人 √
ARPE-19 人視網膜(mo)上(shang)皮細胞 人(ren) √
B-CPAP 人甲狀腺癌細胞 人(ren) √
BEAS-2b 人正常肺上(shang)皮(pi)細胞 人 √
BEWO 人絨毛膜腫(zhong)瘤細胞 人 √
BGC-823 人(ren)胃(wei)腺癌細胞(bao)(低分化) 人 √
BT-474 人乳腺導管癌細胞 人 √
BT-549 人乳腺(xian)管癌細(xi)胞 人(ren) √
BXPC-3 人原位胰腺腺癌細胞 人(ren) √
C-33 A 人(ren)子(zi)宮(gong)頸癌細胞 人 √
C643 人甲狀(zhuang)腺癌(ai)細胞 人 √
C8166 人T淋巴細胞白血病細胞 人 √
Ca Ski 人宮(gong)頸癌腸轉移細(xi)胞/人(ren)宮頸癌上皮細胞 人 √
Caco2 人結直腸腺(xian)癌(ai)細胞 人(ren) √
CAKI-1 人腎透明細胞癌皮膚(fu)轉移細胞 人 √
cal-27 人(ren)舌鱗癌細胞 人 √
CALU-1 人(ren)肺癌細胞 人 √
CALU-3 人(ren)肺(fei)腺(xian)癌細胞(bao)(胸水) 人 √
CCD-1095SK 人乳腺浸潤性導管癌旁皮膚細胞 人 √
CCRF-CEM 人急(ji)性(xing)淋巴細(xi)胞白血(xue)病T淋巴細胞 人 √
CEM/C1 人急性淋巴細胞(bao)白(bai)血病細胞(bao) 人 √
CFPAC-1 人胰(yi)腺癌(ai)細胞 人 √
CNE1 人鼻咽癌細胞 人(ren) √
CNE2 人鼻咽癌細(xi)胞 人 √
COLO 205 人結腸癌細胞 人 √
COLO 320DM 人結直腸腺癌細(xi)胞(bao) 人 √
CW-2 人結腸腺癌細胞 人(ren) √
DAOY Daoy細(xi)胞,具(ju)體不清(qing)楚 人 √
DAUDI 人(ren)Burkitt's淋巴瘤(liu)細胞(bao) 人 √
DETROIT 562 人(ren)咽頭癌胸(xiong)水轉移細胞 人 √
DLD-1 人結直腸腺癌(ai)上皮細胞 人 √
DU 145 人(ren)前列腺癌細胞 人 √
EA.HY926 人臍(qi)靜(jing)脈(mo)細胞(bao)融合(he)細胞(bao) 人 √
ECV304 人臍靜脈內皮細胞 人 √
ES-2 人卵巢透明細胞癌細胞 人 √
FADU 人咽鱗癌細胞 人 √
FTC-133 人濾(lv)泡性(xing)甲狀腺癌(ai)細胞 人 √
GBC-SD 人膽(dan)囊癌細胞 人 √
GCIY 人 √
H1299 人非小(xiao)細胞(bao)肺癌細胞(bao) 人 √
H1395 人(ren)肺腺(xian)癌細(xi)胞(bao) 人 √
H1650 人非(fei)小細胞肺癌細胞 人 √
H1703 人(ren)肺(fei)鱗癌細(xi)胞(bao) 人(ren) √
H1755 人肺癌細胞(bao) 人 √
H1944 人非小細胞肺(fei)癌(ai)細胞 人 √
H1975 人肺腺癌細(xi)胞 人 √
H2170 人肺鱗癌細胞 人(ren) √
H226 人肺鱗癌細胞 人(ren) √
H292 人肺癌細胞(淋巴結轉移) 人 √
H358 人非(fei)小細胞肺癌細胞 人 √
H460 人(ren)大細胞(bao)(bao)肺(fei)癌細胞(bao)(bao) 人 √
H520 人肺鱗癌細胞 人 √
H596 人肺腺鱗癌細胞(bao) 人 √
H661 人(ren)大細胞肺癌細胞 人 √
H716 人結直腸腺(xian)癌(ai)細胞 人 √
H838 人非小細胞肺癌(ai)細胞 人(ren) √
Hacat 人永生化角質(zhi)形成細(xi)胞 人(ren) √
HBE 人支氣管上皮樣細胞 人 √
HBL-100 人(ren)整(zheng)合SV40基因的乳腺上皮(pi)細(xi)胞(bao) 人 √
HCC1937 人(ren)乳腺癌細胞 人 √
HCC827 人非小細胞(bao)肺(fei)癌細胞(bao) 人 √
HCCC-9810 人(ren)膽管細胞(bao)型肝(gan)癌(ai)細胞(bao) 人 √
HCCLM3 人(ren)高轉移肝癌細胞(bao) 人(ren) √
HCT-116 人結腸(chang)癌細胞 人 √
HCT-8 人回(hui)盲腸癌(ai)細胞 人 √
HEC-1-A 人子宮內膜腺(xian)癌細胞 人 √
HEC-1-B 人子宮內(nei)膜(mo)腺癌細胞 人 √
HEK-293 人胚腎細(xi)胞 人 √
HEL 人紅白細胞白血(xue)病細胞 人 √
HELA229 人宮頸癌復蘇細胞 人(ren) √
Hela-J 人 √
Hep G2 人肝癌(ai)細胞(bao) 人 √
HEP-2 人(ren)喉(hou)表皮(pi)樣癌細胞 人(ren) √
HEP3B 人肝癌細胞 人 √
HEY 人(ren)卵巢癌細胞 人 √
HFF 人包皮成纖(xian)維(wei)細胞 人(ren) √
HFL1 人胚肺成纖維細胞 人(ren) √
HFOB1.19 人SV40轉(zhuan)染成骨(gu)細胞 人 √
HGC-27 人胃癌細胞(未分化(hua)) 人 √
HK-2 人腎(shen)皮質近曲小管上(shang)皮細胞 人 √
HL-60 人原髓細(xi)胞(bao)白血(xue)病細(xi)胞(bao) 人 √
HMEC-1 人微血(xue)管內(nei)皮(pi)細胞(bao) 人 √
HO-8910 人卵(luan)巢癌細胞(bao) 人 √
HPN1 人 √
HS683 細胞人腦視神經膠(jiao)質(zhi)瘤細胞 人 √
Hs888Lu 人(ren)肺成纖(xian)維細胞 人 √
HT-1080 人(ren)纖維(wei)肉(rou)瘤細胞 人 √
HT-29 人結腸(chang)癌(ai)細胞(bao) 人 √
HT-3 人(ren) √
HTR8 人滋養細胞 人(ren) √
HUCCT1 膽(dan)管上皮(pi)癌(ai)細胞(bao) 人 √
HuH-6 人肝母(mu)細(xi)胞瘤細(xi)胞 人 √
HUH-7 人肝癌(ai)細胞 人 √
HUT78 人T淋巴細(xi)胞白血(xue)病細(xi)胞 人 √
HUVEC-C 人臍靜脈(mo)內皮細(xi)胞(bao) 人(ren) √
ISK 人 √
JAR 人 √
JEG-3 人 √
JEKO-1 人 √
Jurkat,Clone E6-1 人 √
K-562 人 √
KATO III 人 √
KLE 人 √
KTC-1 人 √
KU812 人 √
KYSE-150 人 √
LI-7 人(ren) √
LNcap clone FGC 人(ren) √
L-O2 人(ren) √
LOVO 人 √
LS 174T 人 √
MCF10A 人 √
MCF-7 人 √
MDA-MB-231 人(ren) √
MDA-MB-231(DMEM) 人 √
MDA-MB-231(L-15) 人 √
MDA-MB-436 人 √
MDA-MB-468 人 √
MG-63 人(ren) √
MGC-803 人(ren) √
MIA PaCa-2 人 √
MM.1S 人 √
MNNG/HOS Cl #5 人 √
MRC-5 人 √
MV4-11 人 √
N87 人 √
NCI-H1299 人 √
NCI-H1563 人 √
NCI-H2452 人 √
NCI-H647 人 √
NK-92 人 √
NTHY-ORI-31 人 √
OCM1A 人 √
OS-RC-2 人 √
OVCAR-3 人 √
PANC-1 人 √
PC-3 人(ren) √
PC-3M 人(ren) √
PC-9 人(ren) √
PLC/PRF/5 人 √
Raji 人 √
RBE 人 √
RD 人 √
RKO 人(ren) √
RL95-2 人 √
RT4 人 √
RWPE-1 人 √
SAOS-2 人(ren) √
SH-SY5Y 人 √
SiHa 人 √
SJCRH30 人 √
SK-BR-3 人(ren) √
SK-HEP-1 人 √
SK-MES-1 人 √
SK-N-BE(2) 人 √
SK-NEP-1 人(ren) √
SK-N-SH 人 √
SK-OV-3 人 √
SPC-A-1 人 √
SU-DHL-6 人 √
SV-HUC-1 人 √
SW 1990 人(ren) √
SW1353 √
SW480 人 √
SW579 人 √
SW620 人 √
SW-620 人 √
SW839 人 √
SW982 人 √
T/G HA-VSMC 人 √
T-24 人 √
T47D 人 √
T82 人(ren) √
T84 人(ren) √
TCA-8113 人 √
TE 353.Sk 人 √
TE-1 人 √
THP-1 人 √
TMK1 人 √
TPC-1 人 √
TT 人 √
TTA1 人 √
U-118MG 人 √
U-2 OS 人(ren) √
U251 人 √
U87 人 √
U-87MG 人(ren) √
U-937 人 √
UM-UC-3 人 √
VCAP 人 √
WERI-RB-1 人 √
WI-38 人 √
WISH 人 √
WPMY-1 √
ZR-75-1 人 √
ZR-75-30 人 √