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CNE1,人鼻咽癌細胞 消(xiao)化要有個度
產品代號:CNE1
中文名稱:人鼻咽(yan)癌細胞(bao)
種屬(shu):人
是(shi)否鑒定:已鑒定
庫存狀態:現貨(huo)
慧穎(ying)生物提(ti)供2000種(zhong)類細(xi)胞(bao)(bao)株(zhu)細(xi)胞(bao)(bao)系,400多株(zhu)已鑒(jian)定細(xi)胞(bao)(bao),涉及種(zhong)屬:人(ren),大鼠,小鼠,兔(tu)子,魚(yu),牛(niu),倉鼠等,我們提(ti)供好的產品,好的服務,好的技(ji)術,復蘇(su)周(zhou)期短,*,細(xi)胞(bao)(bao)狀(zhuang)態良好,飽(bao)滿,有光澤,無支原體。
CNE1,人鼻咽癌細胞 消化要有個度
細胞培養,尤其是細胞系的培養,就(jiu)細胞消化(hua)而言,多(duo)做(zuo)、善于(yu)總結,就(jiu)可以(yi)把細胞養的越來越好(hao)
絕大部分細胞消化(hua)只要用胰酶潤(run)洗一遍(bian)即可(ke):
吸(xi)去胰(yi)酶后(hou),殘(can)留的(de)那些無法計(ji)算(suan)體積(ji)的(de)附(fu)著在細(xi)胞表(biao)面的(de)微(wei)量胰(yi)酶在37度一(yi)般不到2min足夠消化細(xi)胞(絕(jue)大(da)部分1min不到)。對于(yu)這些細(xi)胞原(yuan)則(ze)上(shang)不要(yao)用胰(yi)酶孵育(yu)細(xi)胞,連(lian)續(xu)這樣傳(chuan)代,對細(xi)胞傷害(hai)很(hen)大(da)。簡(jian)單的(de)程序是(shi)PBS潤洗吸(xi)去,胰(yi)酶潤洗吸(xi)去,然后(hou)37度消化。
什么算是(shi)消化好了呢?
不需要(yao)把細(xi)胞(bao)全部(bu)消化成間隔(ge)分布很離散的單個圓(yuan)形才算消化好了(le)(le),一般你肉眼觀察貼(tie)壁細(xi)胞(bao)層,只(zhi)要(yao)能移動了(le)(le),多半呈沙壯移動,其實已經可以了(le)(le)。
一(yi)般能移(yi)動了(le)(le)(le),說明細胞與(yu)培養基質材料的(de)附著(zhu)已(yi)(yi)經(jing)消(xiao)(xiao)失了(le)(le)(le),細胞之間(jian)的(de)附著(zhu)也(ye)已(yi)(yi)經(jing)消(xiao)(xiao)失了(le)(le)(le),細胞已(yi)(yi)經(jing)獨(du)立分(fen)(fen)布(bu)了(le)(le)(le)(雖然沒有(you)呈現很廣的(de)離(li)散分(fen)(fen)布(bu))。這(zhe)個時候應(ying)該停(ting)止消(xiao)(xiao)化,不要(yao)等到(dao)看(kan)到(dao)鏡下所有(you)細胞都分(fen)(fen)離(li)得非常好,間(jian)隙很大,才停(ting)止。
細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)就是*成(cheng)單個細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)懸液,之(zhi)后在(zai)貼(tie)壁的過(guo)程中(zhong)仍(reng)然會聚集,這個是貼(tie)壁培養的細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao),尤其是腫瘤細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)的一個特性,你可以嘗(chang)試,準備100%的單個細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)懸液,貼(tie)壁后觀察細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao),仍(reng)然是幾個幾個細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)聚集在(zai)一起(qi)。
一些懸浮培養細(xi)胞(bao)也是(shi)如此,容易(yi)聚集(ji),不(bu)(bu)要過幾個小(xiao)時就拿出(chu)來吹打成單細(xi)胞(bao)懸液。細(xi)胞(bao)只(zhi)要能從基質上脫離下來,即使(shi)是(shi)成片(pian)的(比(bi)如Calu-3細(xi)胞(bao)),吹打不(bu)(bu)超過20次(ci)(一般10次(ci)即可),成小(xiao)規模聚集(ji)(10個細(xi)胞(bao)左右(you))是(shi)正(zheng)常的,不(bu)(bu)要再去延(yan)長消化時間,等(deng)待單細(xi)胞(bao)懸液出(chu)現。
比(bi)較(jiao)難消化的細胞:
潤(run)洗(xi)方法5min還不能消(xiao)(xiao)化,以結(jie)腸癌細(xi)(xi)(xi)胞(bao)為例,比(bi)如HCT15、LS411和(he)KM12細(xi)(xi)(xi)胞(bao),胰酶消(xiao)(xiao)化,一(yi)般10 cm 培養皿,一(yi)次多(duo)加(jia)入300ul-500ul就足夠(gou)了。即(ji)使(shi)這(zhe)樣難(nan)消(xiao)(xiao)化的細(xi)(xi)(xi)胞(bao),一(yi)般不超過5min,即(ji)可(ke)見細(xi)(xi)(xi)胞(bao)成(cheng)片移(yi)動,就應該停止消(xiao)(xiao)化。一(yi)些正常(chang)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)也會(hui)有難(nan)消(xiao)(xiao)化的時候,比(bi)如tsDC細(xi)(xi)(xi)胞(bao),用胰酶孵育,3min左(zuo)右即(ji)可(ke)看到成(cheng)片沙狀移(yi)動。
常規(gui)的細胞實驗,受消化影響不是很大:
如果不(bu)用(yong)胰酶去孵育(yu)而使用(yong)潤洗(xi)的(de)(de)方法消(xiao)化的(de)(de)話(難消(xiao)化細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)例(li)外)。但(dan)少數(shu)實驗(yan),比如病毒(du)包(bao)裝,對細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)代(dai)數(shu),對細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)狀(zhuang)態(tai)要(yao)求*。這(zhe)個時候(hou)(hou),胰酶消(xiao)化,就是潤洗(xi),都會(hui)對細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)包(bao)裝病毒(du)的(de)(de)能力有影響,傳代(dai)次數(shu)一多,細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)包(bao)裝能力就會(hui)逐漸下降。這(zhe)個時候(hou)(hou)都不(bu)用(yong)胰酶消(xiao)化,用(yong)一些鹽溶液(不(bu)是EDTA液)即可。這(zhe)些鹽溶液通過影響細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)外基質相關(guan)酶的(de)(de)活(huo)性(xing),來使得細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)脫離基質附(fu)著(zhu)表面,但(dan)不(bu)切割任何(he)蛋(dan)白。
EDTA的作用:
許多人不(bu)用(yong)(yong)(yong)胰酶(mei),只用(yong)(yong)(yong)EDTA,或(huo)者用(yong)(yong)(yong)胰酶(mei)/EDTA聯合作(zuo)用(yong)(yong)(yong)。這(zhe)里要(yao)(yao)明白(bai),胰酶(mei)切割細胞外(wai)基質的(de)(de)一(yi)些負責粘(zhan)連(lian)和(he)附著的(de)(de)蛋白(bai),而EDTA通過螯(ao)合Ca離子(zi),作(zuo)用(yong)(yong)(yong)于(yu)整聯蛋白(bai)的(de)(de)活性,所以(yi)EDTA的(de)(de)作(zuo)用(yong)(yong)(yong)更加(jia)溫和(he)。有(you)的(de)(de)人在胰酶(mei)里添加(jia)一(yi)些EDTA,或(huo)者對付特別難消(xiao)(xiao)化的(de)(de)細胞,添加(jia)多一(yi)些EDTA,就是這(zhe)個道(dao)理。一(yi)般不(bu)要(yao)(yao)試圖延長(chang)消(xiao)(xiao)化時間(如果10min還(huan)消(xiao)(xiao)化不(bu)*的(de)(de)話),而應該想(xiang)其它辦法。
PBS洗(xi)滌:
消化(hua)之前用PBS洗滌,是(shi)常(chang)見的操作,因為(wei)血清中含(han)有抑制胰酶(mei)的蛋白。對(dui)于一些(xie)(xie)難消化(hua)細(xi)胞,可以(yi)配制不(bu)含(han)Ca,Mg離(li)子的PBS,因為(wei)這些(xie)(xie)離(li)子也會抑制胰酶(mei)的活性(xing)。但對(dui)于絕大部(bu)分細(xi)胞用胰酶(mei)或者EDTA溶液潤洗即可消化(hua),不(bu)需要配制不(bu)含(han)Ca,Mg離(li)子的溶液。
細(xi)胞代號 細胞(bao)名稱 種屬 鑒定結果
CNE1,人鼻(bi)咽癌(ai)細胞(bao) 消化要有(you)個度
編號 中文名稱 是否(fou)鑒定
5637 人膀胱癌細胞 人 √
7703 人(ren)肝癌細(xi)胞 人(ren) √
143B 人(ren)骨肉瘤細胞 人(ren) √
22RV1 人前列腺(xian)癌(ai)細(xi)胞 人 √
293FT 人胚腎細(xi)胞(bao) 人 √
293T 人胚腎細胞 人 √
435S 人乳腺癌細胞/人黑素(su)瘤(liu)細(xi)胞 人 √
453 人乳腺(xian)癌細胞 人 √
6T-CEM 人T細(xi)胞白(bai)血病細(xi)胞 人(ren) √
769-P 人腎(shen)細胞腺癌細胞 人(ren) √
786-O 人腎透明細胞(bao)腺癌細胞(bao) 人(ren) √
95-D 人高(gao)轉移肺(fei)癌(ai)細胞 人 √
97H 人高轉移性肝癌細胞 人 √
A172 人膠質母細胞瘤細胞 人(ren) √
A2058 人(ren)黑色素瘤細胞 人 √
A2780 人卵(luan)巢癌(ai)細胞(bao) 人 √
A375 人黑色素瘤細胞株 人(ren) √
A431 人表(biao)皮(pi)癌細(xi)胞 人 √
A498 人腎(shen)癌細胞 人 √
A549 人非小細胞(bao)肺癌(ai)細 人 √
A-673 人橫(heng)紋肌(ji)肉瘤(liu)細胞 人 √
ACHN 人腎細(xi)胞腺癌細(xi)胞 人(ren) √
AGS 人(ren)胃(wei)腺癌細胞 人 √
AN3CA 人(ren)子宮內膜腺癌(轉(zhuan)移(yi))細(xi)胞 人(ren) √
ARH-77 人漿細胞(bao)白血病 人 √
ARO 沒(mei)有,找不到信息 人 √
ARPE-19 人(ren)視(shi)網膜(mo)上皮(pi)細胞 人 √
B-CPAP 人甲狀腺癌細胞 人 √
BEAS-2b 人正(zheng)常(chang)肺上皮細胞 人(ren) √
BEWO 人絨毛(mao)膜(mo)腫瘤細胞 人 √
BGC-823 人胃(wei)腺(xian)癌細胞(bao)(低分(fen)化) 人(ren) √
BT-474 人乳(ru)腺(xian)導管(guan)癌(ai)細胞 人 √
BT-549 人乳腺管癌細胞 人 √
BXPC-3 人原(yuan)位(wei)胰腺腺癌細(xi)胞 人 √
C-33 A 人子宮(gong)頸(jing)癌細胞 人 √
C643 人甲狀(zhuang)腺癌(ai)細胞 人 √
C8166 人(ren)T淋巴細(xi)胞(bao)白血病細(xi)胞(bao) 人 √
Ca Ski 人宮(gong)頸癌腸轉(zhuan)移細(xi)胞/人宮頸(jing)癌上皮細胞 人 √
Caco2 人結(jie)直腸腺(xian)癌(ai)細(xi)胞 人 √
CAKI-1 人腎透明細(xi)胞(bao)癌皮膚(fu)轉移細(xi)胞(bao) 人(ren) √
cal-27 人舌(she)鱗癌(ai)細胞 人 √
CALU-1 人(ren)肺癌細胞 人 √
CALU-3 人(ren)肺腺癌細胞(胸水) 人 √
CCD-1095SK 人乳腺浸潤性導管癌旁(pang)皮膚(fu)細胞 人 √
CCRF-CEM 人急性淋(lin)巴細胞白血病T淋(lin)巴(ba)細胞 人(ren) √
CEM/C1 人急(ji)性淋巴細(xi)胞白血病細(xi)胞 人 √
CFPAC-1 人胰腺癌細胞 人 √
CNE1 人鼻咽癌細胞 人 √
CNE2 人鼻(bi)咽癌細胞 人(ren) √
COLO 205 人結腸(chang)癌細胞 人 √
COLO 320DM 人結(jie)直腸腺癌細(xi)胞 人 √
CW-2 人結腸腺(xian)癌細胞 人(ren) √
DAOY Daoy細胞,具(ju)體(ti)不清楚(chu) 人 √
DAUDI 人Burkitt's淋(lin)巴瘤細胞 人(ren) √
DETROIT 562 人咽頭癌胸(xiong)水轉移細胞(bao) 人 √
DLD-1 人結(jie)直腸腺(xian)癌上(shang)皮細胞 人 √
DU 145 人前(qian)列腺癌細胞 人 √
EA.HY926 人臍靜(jing)脈(mo)細胞(bao)融合細胞(bao) 人(ren) √
ECV304 人臍靜脈內皮(pi)細胞(bao) 人 √
ES-2 人卵巢(chao)透明細胞癌(ai)細胞 人 √
FADU 人(ren)咽(yan)鱗癌細胞 人 √
FTC-133 人濾泡性甲狀腺癌(ai)細胞 人 √
GBC-SD 人膽囊癌細胞 人(ren) √
GCIY 人 √
H1299 人非小細胞肺癌細胞 人 √
H1395 人肺(fei)腺癌細胞 人 √
H1650 人非(fei)小(xiao)細(xi)胞(bao)肺癌細(xi)胞(bao) 人 √
H1703 人肺(fei)鱗癌(ai)細胞 人 √
H1755 人肺癌細(xi)胞 人 √
H1944 人非小細胞(bao)肺癌(ai)細胞(bao) 人 √
H1975 人肺(fei)腺(xian)癌細胞 人 √
H2170 人肺鱗癌細(xi)胞 人 √
H226 人肺鱗(lin)癌細胞 人(ren) √
H292 人肺(fei)癌細胞(淋巴結轉移) 人 √
H358 人非小細(xi)胞(bao)肺(fei)癌細(xi)胞(bao) 人(ren) √
H460 人大細(xi)胞(bao)肺癌細(xi)胞(bao) 人 √
H520 人肺鱗癌細胞 人(ren) √
H596 人肺腺鱗(lin)癌細胞 人 √
H661 人大細胞肺癌細胞 人 √
H716 人結(jie)直(zhi)腸腺癌細胞 人 √
H838 人非(fei)小(xiao)細胞肺(fei)癌細胞 人 √
Hacat 人永生化角質形成細胞(bao) 人 √
HBE 人支氣管上皮樣細胞 人 √
HBL-100 人整合SV40基(ji)因的乳腺上皮細(xi)胞 人(ren) √
HCC1937 人乳(ru)腺癌(ai)細胞 人 √
HCC827 人非小細(xi)(xi)胞肺癌細(xi)(xi)胞 人 √
HCCC-9810 人膽管細(xi)胞型(xing)肝(gan)癌細(xi)胞 人 √
HCCLM3 人高轉移肝癌細胞 人 √
HCT-116 人結腸癌細(xi)胞 人 √
HCT-8 人回(hui)盲腸癌細胞(bao) 人(ren) √
HEC-1-A 人子宮(gong)內膜(mo)腺(xian)癌細胞 人 √
HEC-1-B 人子宮(gong)內膜腺癌(ai)細(xi)胞 人(ren) √
HEK-293 人胚腎(shen)細胞 人 √
HEL 人紅白細胞白血(xue)病細胞 人 √
HELA229 人宮頸癌復(fu)蘇細胞 人 √
Hela-J 人(ren) √
Hep G2 人肝(gan)癌(ai)細胞 人 √
HEP-2 人喉表皮(pi)樣癌(ai)細胞 人 √
HEP3B 人肝癌細胞 人(ren) √
HEY 人卵(luan)巢癌細(xi)胞(bao) 人 √
HFF 人包皮成纖維細(xi)胞 人 √
HFL1 人胚肺成纖(xian)維細胞 人(ren) √
HFOB1.19 人SV40轉染成骨細胞 人 √
HGC-27 人胃(wei)癌(ai)細胞(未分化) 人 √
HK-2 人腎皮(pi)質(zhi)近曲小管上(shang)皮(pi)細胞 人(ren) √
HL-60 人原髓細(xi)胞白(bai)血病細(xi)胞 人(ren) √
HMEC-1 人微血管內(nei)皮(pi)細胞 人 √
HO-8910 人卵巢癌細胞 人 √
HPN1 人 √
HS683 細胞(bao)人腦視神經膠(jiao)質(zhi)瘤(liu)細胞(bao) 人 √
Hs888Lu 人肺成纖維細(xi)胞 人 √
HT-1080 人纖維肉(rou)瘤細(xi)胞 人(ren) √
HT-29 人結腸癌細胞(bao) 人(ren) √
HT-3 人 √
HTR8 人滋養細胞 人 √
HUCCT1 膽管上皮癌細胞 人 √
HuH-6 人肝母細(xi)胞(bao)瘤(liu)細(xi)胞(bao) 人 √
HUH-7 人肝癌細胞 人(ren) √
HUT78 人T淋巴細(xi)胞白(bai)血病(bing)細(xi)胞 人(ren) √
HUVEC-C 人臍靜脈內皮細胞(bao) 人 √
ISK 人 √
JAR 人 √
JEG-3 人 √
JEKO-1 人 √
Jurkat,Clone E6-1 人 √
K-562 人(ren) √
KATO III 人 √
KLE 人 √
KTC-1 人 √
KU812 人 √
KYSE-150 人 √
LI-7 人 √
LNcap clone FGC 人 √
L-O2 人 √
LOVO 人 √
LS 174T 人 √
MCF10A 人 √
MCF-7 人 √
MDA-MB-231 人 √
MDA-MB-231(DMEM) 人 √
MDA-MB-231(L-15) 人(ren) √
MDA-MB-436 人 √
MDA-MB-468 人(ren) √
MG-63 人(ren) √
MGC-803 人(ren) √
MIA PaCa-2 人(ren) √
MM.1S 人 √
MNNG/HOS Cl #5 人 √
MRC-5 人 √
MV4-11 人 √
N87 人(ren) √
NCI-H1299 人 √
NCI-H1563 人 √
NCI-H2452 人 √
NCI-H647 人 √
NK-92 人 √
NTHY-ORI-31 人 √
OCM1A 人 √
OS-RC-2 人 √
OVCAR-3 人 √
PANC-1 人(ren) √
PC-3 人(ren) √
PC-3M 人 √
PC-9 人(ren) √
PLC/PRF/5 人(ren) √
Raji 人 √
RBE 人 √
RD 人 √
RKO 人 √
RL95-2 人 √
RT4 人 √
RWPE-1 人 √
SAOS-2 人 √
SH-SY5Y 人 √
SiHa 人 √
SJCRH30 人(ren) √
SK-BR-3 人(ren) √
SK-HEP-1 人(ren) √
SK-MES-1 人(ren) √
SK-N-BE(2) 人 √
SK-NEP-1 人(ren) √
SK-N-SH 人 √
SK-OV-3 人 √
SPC-A-1 人 √
SU-DHL-6 人 √
SV-HUC-1 人 √
SW 1990 人(ren) √
SW1353 √
SW480 人 √
SW579 人 √
SW620 人 √
SW-620 人(ren) √
SW839 人 √
SW982 人(ren) √
T/G HA-VSMC 人 √
T-24 人(ren) √
T47D 人(ren) √
T82 人 √
T84 人 √
TCA-8113 人 √
TE 353.Sk 人(ren) √
TE-1 人 √
THP-1 人 √
TMK1 人(ren) √
TPC-1 人 √
TT 人 √
TTA1 人(ren) √
U-118MG 人 √
U-2 OS 人 √
U251 人 √
U87 人 √
U-87MG 人 √
U-937 人 √
UM-UC-3 人 √
VCAP 人 √
WERI-RB-1 人 √
WI-38 人(ren) √
WISH 人 √
WPMY-1 √
ZR-75-1 人 √
ZR-75-30 人(ren) √