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COLO 320DM,人結直腸腺癌細胞 消化要有個度

發(fa)布時(shi)間(jian):2018-06-13瀏覽:1500次

COLO 320DM人結(jie)直腸腺癌細胞  消化要有(you)個度

產品代號:COLO 320DM

中文名稱:人(ren)結直腸腺癌細胞(bao)

種屬(shu):人

是(shi)否鑒定(ding):已鑒定(ding)

庫存狀態(tai):現貨

 

慧穎生物提(ti)供2000種類(lei)細胞(bao)株細胞(bao)系,400多株已(yi)鑒定細胞(bao),涉及種屬:人,大鼠(shu),小(xiao)鼠(shu),兔子,魚,牛,倉鼠(shu)等,我(wo)們提(ti)供好的(de)(de)產品(pin),好的(de)(de)服(fu)務,好的(de)(de)技術,復蘇(su)周期短,*,細胞(bao)狀(zhuang)態(tai)良好,飽(bao)滿,有(you)光(guang)澤(ze),無支原體。

 

COLO 320DM人結(jie)直腸(chang)腺(xian)癌細胞  消(xiao)化要有個度

細(xi)胞培養(yang)(yang),尤其是細(xi)胞系的培養(yang)(yang),就(jiu)細(xi)胞消(xiao)化而言,多做、善于總結,就(jiu)可以(yi)把細(xi)胞養(yang)(yang)的越(yue)來越(yue)好(hao)

絕大(da)部分細胞消化只要(yao)用胰酶潤(run)洗一遍即可:

吸(xi)去(qu)胰(yi)酶后,殘留的那(nei)些(xie)無法計算體積的附(fu)著在細胞表面的微量胰(yi)酶在37度一般不到2min足夠消(xiao)化細胞(絕大(da)部(bu)分1min不到)。對于這(zhe)(zhe)些(xie)細胞原則上不要(yao)用胰(yi)酶孵育細胞,連續這(zhe)(zhe)樣傳代(dai),對細胞傷害很大(da)。簡單的程序是PBS潤洗吸(xi)去(qu),胰(yi)酶潤洗吸(xi)去(qu),然后37度消(xiao)化。

什么算是消化好了呢?

不需要把細胞全部(bu)消(xiao)化(hua)成間隔分布很離散的(de)單個圓形(xing)才算消(xiao)化(hua)好了(le),一般你肉(rou)眼觀察貼壁細胞層,只要能移動了(le),多半呈沙(sha)壯(zhuang)移動,其實已經可以了(le)。

一般能移動(dong)了(le)(le),說明(ming)細(xi)胞(bao)與培(pei)養基質材(cai)料的附著(zhu)已(yi)(yi)經(jing)消(xiao)失了(le)(le),細(xi)胞(bao)之間的附著(zhu)也已(yi)(yi)經(jing)消(xiao)失了(le)(le),細(xi)胞(bao)已(yi)(yi)經(jing)獨立分(fen)布(bu)了(le)(le)(雖然沒有(you)(you)呈現(xian)很廣的離散(san)分(fen)布(bu))。這個時候應該停止消(xiao)化,不要等到(dao)看到(dao)鏡下(xia)所有(you)(you)細(xi)胞(bao)都分(fen)離得非常(chang)好,間隙很大,才停止。

細(xi)胞(bao)就是*成單個細(xi)胞(bao)懸(xuan)液,之后(hou)在貼壁的過程中仍(reng)然會(hui)聚集,這個是貼壁培養的細(xi)胞(bao),尤其是腫瘤細(xi)胞(bao)的一(yi)個特(te)性,你可以(yi)嘗(chang)試,準備100%的單個細(xi)胞(bao)懸(xuan)液,貼壁后(hou)觀察(cha)細(xi)胞(bao),仍(reng)然是幾(ji)(ji)個幾(ji)(ji)個細(xi)胞(bao)聚集在一(yi)起。

一些懸(xuan)(xuan)浮培養細(xi)胞也是如此,容易聚(ju)集,不(bu)要(yao)(yao)過(guo)幾(ji)個(ge)(ge)小(xiao)時就(jiu)拿出來吹(chui)打(da)成單(dan)(dan)細(xi)胞懸(xuan)(xuan)液(ye)。細(xi)胞只要(yao)(yao)能從基質(zhi)上脫離(li)下(xia)來,即使是成片的(de)(de)(比(bi)如Calu-3細(xi)胞),吹(chui)打(da)不(bu)超過(guo)20次(ci)(一般10次(ci)即可),成小(xiao)規(gui)模聚(ju)集(10個(ge)(ge)細(xi)胞左右)是正常的(de)(de),不(bu)要(yao)(yao)再去(qu)延長消化時間,等待單(dan)(dan)細(xi)胞懸(xuan)(xuan)液(ye)出現。

比較難消化的細(xi)胞:

潤洗方(fang)法5min還不能消(xiao)(xiao)化,以結腸癌細(xi)(xi)胞為(wei)例(li),比如HCT15、LS411和(he)KM12細(xi)(xi)胞,胰酶消(xiao)(xiao)化,一(yi)(yi)般10 cm 培養皿,一(yi)(yi)次多加入(ru)300ul-500ul就(jiu)(jiu)足夠了(le)。即(ji)使(shi)這樣難消(xiao)(xiao)化的細(xi)(xi)胞,一(yi)(yi)般不超過5min,即(ji)可(ke)(ke)見細(xi)(xi)胞成片移(yi)動(dong),就(jiu)(jiu)應該(gai)停止消(xiao)(xiao)化。一(yi)(yi)些(xie)正常細(xi)(xi)胞也會有難消(xiao)(xiao)化的時候(hou),比如tsDC細(xi)(xi)胞,用胰酶孵育(yu),3min左右即(ji)可(ke)(ke)看(kan)到(dao)成片沙狀移(yi)動(dong)。

 

常規的細胞實驗(yan),受消(xiao)化影響不是很大:

如果不(bu)用(yong)胰酶去孵育而(er)使用(yong)潤洗的方法消化(hua)(hua)的話(難消化(hua)(hua)細(xi)(xi)胞(bao)例外(wai))。但少(shao)數(shu)實驗,比(bi)如病(bing)毒包裝(zhuang),對(dui)細(xi)(xi)胞(bao)代(dai)數(shu),對(dui)細(xi)(xi)胞(bao)狀態要求*。這(zhe)個時候,胰酶消化(hua)(hua),就是(shi)潤洗,都(dou)會對(dui)細(xi)(xi)胞(bao)包裝(zhuang)病(bing)毒的能力(li)有影響(xiang),傳(chuan)代(dai)次數(shu)一多(duo),細(xi)(xi)胞(bao)包裝(zhuang)能力(li)就會逐漸下降。這(zhe)個時候都(dou)不(bu)用(yong)胰酶消化(hua)(hua),用(yong)一些鹽(yan)溶(rong)液(不(bu)是(shi)EDTA液)即可。這(zhe)些鹽(yan)溶(rong)液通過影響(xiang)細(xi)(xi)胞(bao)外(wai)基(ji)質(zhi)相關(guan)酶的活性,來使得細(xi)(xi)胞(bao)脫離基(ji)質(zhi)附著表面,但不(bu)切割任何(he)蛋(dan)白(bai)。

 

EDTA的作用:

許多人不用(yong)(yong)(yong)胰酶,只用(yong)(yong)(yong)EDTA,或(huo)者用(yong)(yong)(yong)胰酶/EDTA聯合作(zuo)用(yong)(yong)(yong)。這里要(yao)明白,胰酶切(qie)割細(xi)胞(bao)外(wai)基質(zhi)的(de)一些負(fu)責粘(zhan)連和附著的(de)蛋白,而EDTA通(tong)過螯合Ca離(li)子,作(zuo)用(yong)(yong)(yong)于整(zheng)聯蛋白的(de)活性,所以EDTA的(de)作(zuo)用(yong)(yong)(yong)更加(jia)(jia)溫和。有的(de)人在胰酶里添(tian)加(jia)(jia)一些EDTA,或(huo)者對付特(te)別難(nan)消(xiao)化的(de)細(xi)胞(bao),添(tian)加(jia)(jia)多一些EDTA,就是這個道理。一般不要(yao)試圖延(yan)長消(xiao)化時間(如果(guo)10min還消(xiao)化不*的(de)話),而應(ying)該想其它(ta)辦法。

 

PBS洗滌(di):

消化(hua)之前用(yong)PBS洗滌,是常見(jian)的(de)操作,因(yin)(yin)為血清(qing)中含(han)有抑制(zhi)胰(yi)酶(mei)的(de)蛋白。對于(yu)一些難消化(hua)細胞(bao),可(ke)以配制(zhi)不含(han)Ca,Mg離(li)子的(de)PBS,因(yin)(yin)為這些離(li)子也會抑制(zhi)胰(yi)酶(mei)的(de)活(huo)性。但對于(yu)絕大部分細胞(bao)用(yong)胰(yi)酶(mei)或者EDTA溶(rong)液潤洗即可(ke)消化(hua),不需要配制(zhi)不含(han)Ca,Mg離(li)子的(de)溶(rong)液。

細胞代號(hao)         細胞名稱(cheng)         種屬         鑒定結(jie)果(guo)

COLO 320DM人(ren)結(jie)直腸腺癌細(xi)胞  消化要有個度

編(bian)號 中(zhong)文名稱(cheng)  是(shi)否鑒定

5637         人膀胱癌(ai)細胞             

7703         人(ren)肝癌細胞         

143B         人骨肉瘤細胞             

22RV1      人前列腺癌細(xi)胞     人(ren)    

293FT       人(ren)胚腎(shen)細胞         

293T         人胚腎(shen)細胞     人(ren)    

435S          人乳(ru)腺癌(ai)細胞/人黑(hei)素(su)瘤細胞            

453  人(ren)乳腺癌細(xi)胞         人(ren)    

6T-CEM    T細胞白血病細胞         

769-P        人(ren)腎(shen)細胞腺(xian)癌細胞         人(ren)    

786-O       人腎透明細(xi)(xi)胞(bao)腺癌細(xi)(xi)胞(bao)             

95-D          人高轉移肺癌細胞(bao)         人(ren)    

97H  人高轉移性肝癌細胞(bao)         

A172         人膠(jiao)質(zhi)母細(xi)胞(bao)瘤細(xi)胞(bao)     人(ren)    

A2058       人黑色素瘤細胞         

A2780       人卵巢癌細(xi)胞             

A375         人黑色(se)素瘤細胞株         人(ren)    

A431         人表皮癌細胞             

A498         人腎(shen)癌(ai)細(xi)胞(bao)     人(ren)    

A549         人非小細胞肺(fei)癌細             

A-673        人橫紋肌肉瘤(liu)細胞         人(ren)    

ACHN       人腎細胞(bao)腺癌細胞(bao)         人(ren)    

AGS  人胃腺癌細(xi)胞             

AN3CA     人子宮內膜腺癌(轉移)細胞      

ARH-77    人漿細胞白血病     人(ren)    

ARO 沒有(you),找(zhao)不到信息(xi)             

ARPE-19   人視網膜上皮細胞             

B-CPAP     人甲狀(zhuang)腺癌細(xi)胞(bao)         

BEAS-2b   人正常肺上(shang)皮細胞(bao)             

BEWO       人絨(rong)毛膜(mo)腫(zhong)瘤細胞             

BGC-823  人胃(wei)腺癌細(xi)胞(bao)(低分化)              

BT-474     人乳腺(xian)導(dao)管癌細胞             

BT-549     人(ren)乳(ru)腺管癌細胞     人(ren)    

BXPC-3     人原位胰腺腺癌(ai)細(xi)胞     人(ren)    

C-33 A      人(ren)子宮頸癌細胞(bao)     人(ren)    

C643         人甲狀(zhuang)腺癌(ai)細胞         

C8166       人(ren)T淋(lin)巴細胞白(bai)血病(bing)細胞        

Ca Ski        人(ren)宮(gong)頸癌腸轉移(yi)細胞/人宮頸(jing)癌上(shang)皮(pi)細胞   人(ren)    

Caco2       人結(jie)直腸腺癌細(xi)胞            

CAKI-1      人腎透明細胞癌皮(pi)膚轉移細胞         

cal-27       人舌鱗(lin)癌細胞(bao)             

CALU-1     人(ren)肺(fei)癌細胞         

CALU-3     人肺(fei)腺癌細胞(胸水)           

CCD-1095SK     人(ren)乳腺浸潤性導(dao)管癌(ai)旁(pang)皮膚細胞(bao)             

CCRF-CEM        人急性(xing)淋(lin)巴細胞白血(xue)病T淋巴細胞         

CEM/C1   人急性淋巴細胞(bao)白血病細胞(bao)             

CFPAC-1   人胰腺癌細(xi)胞             

CNE1        人鼻咽癌細胞            

CNE2        人鼻咽癌細胞(bao)            

COLO 205         人結腸癌細胞(bao)             

COLO 320DM  人(ren)結直腸腺癌細胞             

CW-2        人結腸腺癌細胞     人(ren)    

DAOY        Daoy細胞(bao),具體不清楚            

DAUDI      Burkitt's淋巴瘤細(xi)胞     

DETROIT 562   人咽(yan)頭(tou)癌胸水轉移細(xi)胞             

DLD-1       人結直腸(chang)腺癌上(shang)皮細胞(bao)             

DU 145     人前列腺癌細(xi)胞         

EA.HY926         人臍靜脈細(xi)胞(bao)融合細(xi)胞(bao)             

ECV304    人(ren)臍靜脈(mo)內皮細胞             

ES-2 人卵巢透(tou)明細(xi)胞(bao)癌細(xi)胞(bao)        人(ren)    

FADU        人咽鱗癌(ai)細胞(bao)             

FTC-133   人濾泡性(xing)甲(jia)狀腺癌細(xi)胞             

GBC-SD    人(ren)膽(dan)囊癌細胞         人(ren)    

GCIY                   人(ren)    

H1299      人非小細(xi)胞肺癌細(xi)胞         

H1395      人肺腺癌細胞(bao)             

H1650      人非小細胞肺癌細胞         

H1703      人肺(fei)鱗(lin)癌細胞             

H1755      人肺癌細胞       

H1944      人(ren)非小細(xi)胞肺癌細(xi)胞         

H1975      人(ren)肺腺癌細胞             

H2170      人肺鱗癌細胞             

H226         人(ren)肺鱗癌細胞             

H292         人(ren)肺癌細胞(淋巴結轉移)           

H358         人(ren)非小細胞(bao)肺癌細胞(bao)       

H460         人(ren)大細胞(bao)肺癌細胞(bao)            

H520         人肺鱗(lin)癌細胞(bao)            

H596         人肺腺(xian)鱗癌細胞         

H661         人大細胞(bao)肺癌細胞(bao)             

H716         人結直(zhi)腸腺癌(ai)細胞             

H838         人(ren)非小細(xi)胞(bao)(bao)肺癌細(xi)胞(bao)(bao)         

Hacat       人永(yong)生化(hua)角(jiao)質(zhi)形(xing)成(cheng)細(xi)胞             

HBE 人支氣管上(shang)皮(pi)樣細(xi)胞(bao)         

HBL-100   人整合SV40基因(yin)的乳(ru)腺上皮細(xi)胞       人(ren)    

HCC1937 人乳腺癌細胞(bao)             

HCC827   人非小細胞(bao)肺癌細胞(bao)         

HCCC-9810      人膽(dan)管(guan)細胞(bao)(bao)型肝癌(ai)細胞(bao)(bao)         人(ren)    

HCCLM3  人高轉移(yi)肝癌細(xi)胞             

HCT-116  人(ren)結腸癌細胞             

HCT-8       人回(hui)盲(mang)腸癌(ai)細胞         

HEC-1-A   人子(zi)宮內膜(mo)腺癌細胞         

HEC-1-B   人子宮內(nei)膜腺癌細胞(bao)         

HEK-293   人胚腎細胞         

HEL  人(ren)紅(hong)白細胞(bao)白血病(bing)細胞(bao)           

HELA229  人宮(gong)頸癌復蘇細胞             

Hela-J                    

Hep G2     人肝(gan)癌(ai)細胞         

HEP-2       人喉表皮(pi)樣癌細胞            

HEP3B      人(ren)肝癌細(xi)胞         

HEY          人卵巢癌細胞             

HFF  人包皮成纖維細胞        人(ren)    

HFL1         人(ren)胚肺(fei)成纖(xian)維細(xi)胞(bao)             

HFOB1.19         人(ren)SV40轉染成骨細(xi)胞               

HGC-27    人胃癌細胞(bao)(未分化)         

HK-2          人腎皮質近曲小管上皮細(xi)胞             

HL-60        人原(yuan)髓細胞白(bai)血病細胞        人(ren)    

HMEC-1   人(ren)微血管內皮細胞            

HO-8910  人(ren)卵巢癌細胞             

HPN1                人(ren)    

HS683       細(xi)胞(bao)人腦視神經膠質瘤細(xi)胞(bao)            

Hs888Lu  人肺(fei)成(cheng)纖維(wei)細胞         

HT-1080   人纖維肉(rou)瘤細胞         

HT-29       人結腸癌細胞        人(ren)    

HT-3                   人(ren)    

HTR8        人滋養細胞(bao)         

HUCCT1   膽管上皮癌細胞          人(ren)    

HuH-6       人肝母細胞瘤細胞     人(ren)    

HUH-7      人肝癌細胞         

HUT78      T淋巴細胞(bao)白血病(bing)細胞(bao)         

HUVEC-C 人臍靜脈內(nei)皮細胞         人(ren)    

ISK                 

JAR            人(ren)    

JEG-3                 人(ren)    

JEKO-1               人(ren)    

JurkatClone E6-1              

K-562                     

KATO III                 

KLE                

KTC-1                     

KU812                    

KYSE-150               

LI-7                

LNcap clone FGC                   

L-O2              

LOVO                     

LS 174T                  

MCF10A                

MCF-7                人(ren)    

MDA-MB-231               

MDA-MB-231(DMEM)                  

MDA-MB-231(L-15)              

MDA-MB-436           人(ren)    

MDA-MB-468               

MG-63               人(ren)    

MGC-803              

MIA PaCa-2                   

MM.1S                  

MNNG/HOS Cl #5                  

MRC-5                   

MV4-11             人(ren)    

N87               

NCI-H1299                     

NCI-H1563                     

NCI-H2452                 人(ren)    

NCI-H647                       

NK-92                     

NTHY-ORI-31                

OCM1A                 

OS-RC-2                 

OVCAR-3               

PANC-1                  

PC-3              

PC-3M                   

PC-9          人(ren)    

PLC/PRF/5                  人(ren)    

Raji                

RBE           人(ren)    

RD                 

RKO               

RL95-2                   

RT4           人(ren)    

RWPE-1                 

SAOS-2                   

SH-SY5Y                 

SiHa              

SJCRH30               

SK-BR-3                 

SK-HEP-1               

SK-MES-1              

SK-N-BE(2)                     

SK-NEP-1               

SK-N-SH                 

SK-OV-3                

SPC-A-1                 

SU-DHL-6              

SV-HUC-1                       

SW 1990                

SW1353                     

SW480                   

SW579               人(ren)    

SW620                   

SW-620                  

SW839                   

SW982                   

T/G HA-VSMC               

T-24              

T47D                      

T82                

T84                

TCA-8113                       

TE 353.Sk                      

TE-1              

THP-1                     

TMK1                     

TPC-1                 人(ren)    

TT                  

TTA1                       

U-118MG                   人(ren)    

U-2 OS                   

U251                      

U87                       

U-87MG                

U-937                     

UM-UC-3              

VCAP                      

WERI-RB-1                     

WI-38                     

WISH                      

WPMY-1                    

ZR-75-1                 

ZR-75-30               

 

 

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