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COLO 320DM,人結(jie)直腸腺癌細胞 消化要有(you)個度
產品代號:COLO 320DM
中文名稱:人(ren)結直腸腺癌細胞(bao)
種屬(shu):人
是(shi)否鑒定(ding):已鑒定(ding)
庫存狀態(tai):現貨
慧穎生物提(ti)供2000種類(lei)細胞(bao)株細胞(bao)系,400多株已(yi)鑒定細胞(bao),涉及種屬:人,大鼠(shu),小(xiao)鼠(shu),兔子,魚,牛,倉鼠(shu)等,我(wo)們提(ti)供好的(de)(de)產品(pin),好的(de)(de)服(fu)務,好的(de)(de)技術,復蘇(su)周期短,*,細胞(bao)狀(zhuang)態(tai)良好,飽(bao)滿,有(you)光(guang)澤(ze),無支原體。
COLO 320DM,人結(jie)直腸(chang)腺(xian)癌細胞 消(xiao)化要有個度
細(xi)胞培養(yang)(yang),尤其是細(xi)胞系的培養(yang)(yang),就(jiu)細(xi)胞消(xiao)化而言,多做、善于總結,就(jiu)可以(yi)把細(xi)胞養(yang)(yang)的越(yue)來越(yue)好(hao)
絕大(da)部分細胞消化只要(yao)用胰酶潤(run)洗一遍即可:
吸(xi)去(qu)胰(yi)酶后,殘留的那(nei)些(xie)無法計算體積的附(fu)著在細胞表面的微量胰(yi)酶在37度一般不到2min足夠消(xiao)化細胞(絕大(da)部(bu)分1min不到)。對于這(zhe)(zhe)些(xie)細胞原則上不要(yao)用胰(yi)酶孵育細胞,連續這(zhe)(zhe)樣傳代(dai),對細胞傷害很大(da)。簡單的程序是PBS潤洗吸(xi)去(qu),胰(yi)酶潤洗吸(xi)去(qu),然后37度消(xiao)化。
什么算是消化好了呢?
不需要把細胞全部(bu)消(xiao)化(hua)成間隔分布很離散的(de)單個圓形(xing)才算消(xiao)化(hua)好了(le),一般你肉(rou)眼觀察貼壁細胞層,只要能移動了(le),多半呈沙(sha)壯(zhuang)移動,其實已經可以了(le)。
一般能移動(dong)了(le)(le),說明(ming)細(xi)胞(bao)與培(pei)養基質材(cai)料的附著(zhu)已(yi)(yi)經(jing)消(xiao)失了(le)(le),細(xi)胞(bao)之間的附著(zhu)也已(yi)(yi)經(jing)消(xiao)失了(le)(le),細(xi)胞(bao)已(yi)(yi)經(jing)獨立分(fen)布(bu)了(le)(le)(雖然沒有(you)(you)呈現(xian)很廣的離散(san)分(fen)布(bu))。這個時候應該停止消(xiao)化,不要等到(dao)看到(dao)鏡下(xia)所有(you)(you)細(xi)胞(bao)都分(fen)離得非常(chang)好,間隙很大,才停止。
細(xi)胞(bao)就是*成單個細(xi)胞(bao)懸(xuan)液,之后(hou)在貼壁的過程中仍(reng)然會(hui)聚集,這個是貼壁培養的細(xi)胞(bao),尤其是腫瘤細(xi)胞(bao)的一(yi)個特(te)性,你可以(yi)嘗(chang)試,準備100%的單個細(xi)胞(bao)懸(xuan)液,貼壁后(hou)觀察(cha)細(xi)胞(bao),仍(reng)然是幾(ji)(ji)個幾(ji)(ji)個細(xi)胞(bao)聚集在一(yi)起。
一些懸(xuan)(xuan)浮培養細(xi)胞也是如此,容易聚(ju)集,不(bu)要(yao)(yao)過(guo)幾(ji)個(ge)(ge)小(xiao)時就(jiu)拿出來吹(chui)打(da)成單(dan)(dan)細(xi)胞懸(xuan)(xuan)液(ye)。細(xi)胞只要(yao)(yao)能從基質(zhi)上脫離(li)下(xia)來,即使是成片的(de)(de)(比(bi)如Calu-3細(xi)胞),吹(chui)打(da)不(bu)超過(guo)20次(ci)(一般10次(ci)即可),成小(xiao)規(gui)模聚(ju)集(10個(ge)(ge)細(xi)胞左右)是正常的(de)(de),不(bu)要(yao)(yao)再去(qu)延長消化時間,等待單(dan)(dan)細(xi)胞懸(xuan)(xuan)液(ye)出現。
比較難消化的細(xi)胞:
潤洗方(fang)法5min還不能消(xiao)(xiao)化,以結腸癌細(xi)(xi)胞為(wei)例(li),比如HCT15、LS411和(he)KM12細(xi)(xi)胞,胰酶消(xiao)(xiao)化,一(yi)(yi)般10 cm 培養皿,一(yi)(yi)次多加入(ru)300ul-500ul就(jiu)(jiu)足夠了(le)。即(ji)使(shi)這樣難消(xiao)(xiao)化的細(xi)(xi)胞,一(yi)(yi)般不超過5min,即(ji)可(ke)(ke)見細(xi)(xi)胞成片移(yi)動(dong),就(jiu)(jiu)應該(gai)停止消(xiao)(xiao)化。一(yi)(yi)些(xie)正常細(xi)(xi)胞也會有難消(xiao)(xiao)化的時候(hou),比如tsDC細(xi)(xi)胞,用胰酶孵育(yu),3min左右即(ji)可(ke)(ke)看(kan)到(dao)成片沙狀移(yi)動(dong)。
常規的細胞實驗(yan),受消(xiao)化影響不是很大:
如果不(bu)用(yong)胰酶去孵育而(er)使用(yong)潤洗的方法消化(hua)(hua)的話(難消化(hua)(hua)細(xi)(xi)胞(bao)例外(wai))。但少(shao)數(shu)實驗,比(bi)如病(bing)毒包裝(zhuang),對(dui)細(xi)(xi)胞(bao)代(dai)數(shu),對(dui)細(xi)(xi)胞(bao)狀態要求*。這(zhe)個時候,胰酶消化(hua)(hua),就是(shi)潤洗,都(dou)會對(dui)細(xi)(xi)胞(bao)包裝(zhuang)病(bing)毒的能力(li)有影響(xiang),傳(chuan)代(dai)次數(shu)一多(duo),細(xi)(xi)胞(bao)包裝(zhuang)能力(li)就會逐漸下降。這(zhe)個時候都(dou)不(bu)用(yong)胰酶消化(hua)(hua),用(yong)一些鹽(yan)溶(rong)液(不(bu)是(shi)EDTA液)即可。這(zhe)些鹽(yan)溶(rong)液通過影響(xiang)細(xi)(xi)胞(bao)外(wai)基(ji)質(zhi)相關(guan)酶的活性,來使得細(xi)(xi)胞(bao)脫離基(ji)質(zhi)附著表面,但不(bu)切割任何(he)蛋(dan)白(bai)。
EDTA的作用:
許多人不用(yong)(yong)(yong)胰酶,只用(yong)(yong)(yong)EDTA,或(huo)者用(yong)(yong)(yong)胰酶/EDTA聯合作(zuo)用(yong)(yong)(yong)。這里要(yao)明白,胰酶切(qie)割細(xi)胞(bao)外(wai)基質(zhi)的(de)一些負(fu)責粘(zhan)連和附著的(de)蛋白,而EDTA通(tong)過螯合Ca離(li)子,作(zuo)用(yong)(yong)(yong)于整(zheng)聯蛋白的(de)活性,所以EDTA的(de)作(zuo)用(yong)(yong)(yong)更加(jia)(jia)溫和。有的(de)人在胰酶里添(tian)加(jia)(jia)一些EDTA,或(huo)者對付特(te)別難(nan)消(xiao)化的(de)細(xi)胞(bao),添(tian)加(jia)(jia)多一些EDTA,就是這個道理。一般不要(yao)試圖延(yan)長消(xiao)化時間(如果(guo)10min還消(xiao)化不*的(de)話),而應(ying)該想其它(ta)辦法。
PBS洗滌(di):
消化(hua)之前用(yong)PBS洗滌,是常見(jian)的(de)操作,因(yin)(yin)為血清(qing)中含(han)有抑制(zhi)胰(yi)酶(mei)的(de)蛋白。對于(yu)一些難消化(hua)細胞(bao),可(ke)以配制(zhi)不含(han)Ca,Mg離(li)子的(de)PBS,因(yin)(yin)為這些離(li)子也會抑制(zhi)胰(yi)酶(mei)的(de)活(huo)性。但對于(yu)絕大部分細胞(bao)用(yong)胰(yi)酶(mei)或者EDTA溶(rong)液潤洗即可(ke)消化(hua),不需要配制(zhi)不含(han)Ca,Mg離(li)子的(de)溶(rong)液。
細胞代號(hao) 細胞名稱(cheng) 種屬 鑒定結(jie)果(guo)
COLO 320DM,人(ren)結(jie)直腸腺癌細(xi)胞 消化要有個度
編(bian)號 中(zhong)文名稱(cheng) 是(shi)否鑒定
5637 人膀胱癌(ai)細胞 人 √
7703 人(ren)肝癌細胞 人 √
143B 人骨肉瘤細胞 人 √
22RV1 人前列腺癌細(xi)胞 人(ren) √
293FT 人(ren)胚腎(shen)細胞 人 √
293T 人胚腎(shen)細胞 人(ren) √
435S 人乳(ru)腺癌(ai)細胞/人黑(hei)素(su)瘤細胞 人 √
453 人(ren)乳腺癌細(xi)胞 人(ren) √
6T-CEM 人T細胞白血病細胞 人 √
769-P 人(ren)腎(shen)細胞腺(xian)癌細胞 人(ren) √
786-O 人腎透明細(xi)(xi)胞(bao)腺癌細(xi)(xi)胞(bao) 人 √
95-D 人高轉移肺癌細胞(bao) 人(ren) √
97H 人高轉移性肝癌細胞(bao) 人 √
A172 人膠(jiao)質(zhi)母細(xi)胞(bao)瘤細(xi)胞(bao) 人(ren) √
A2058 人黑色素瘤細胞 人 √
A2780 人卵巢癌細(xi)胞 人 √
A375 人黑色(se)素瘤細胞株 人(ren) √
A431 人表皮癌細胞 人 √
A498 人腎(shen)癌(ai)細(xi)胞(bao) 人(ren) √
A549 人非小細胞肺(fei)癌細 人 √
A-673 人橫紋肌肉瘤(liu)細胞 人(ren) √
ACHN 人腎細胞(bao)腺癌細胞(bao) 人(ren) √
AGS 人胃腺癌細(xi)胞 人 √
AN3CA 人子宮內膜腺癌(轉移)細胞 人 √
ARH-77 人漿細胞白血病 人(ren) √
ARO 沒有(you),找(zhao)不到信息(xi) 人 √
ARPE-19 人視網膜上皮細胞 人 √
B-CPAP 人甲狀(zhuang)腺癌細(xi)胞(bao) 人 √
BEAS-2b 人正常肺上(shang)皮細胞(bao) 人 √
BEWO 人絨(rong)毛膜(mo)腫(zhong)瘤細胞 人 √
BGC-823 人胃(wei)腺癌細(xi)胞(bao)(低分化) 人 √
BT-474 人乳腺(xian)導(dao)管癌細胞 人 √
BT-549 人(ren)乳(ru)腺管癌細胞 人(ren) √
BXPC-3 人原位胰腺腺癌(ai)細(xi)胞 人(ren) √
C-33 A 人(ren)子宮頸癌細胞(bao) 人(ren) √
C643 人甲狀(zhuang)腺癌(ai)細胞 人 √
C8166 人(ren)T淋(lin)巴細胞白(bai)血病(bing)細胞 人 √
Ca Ski 人(ren)宮(gong)頸癌腸轉移(yi)細胞/人宮頸(jing)癌上(shang)皮(pi)細胞 人(ren) √
Caco2 人結(jie)直腸腺癌細(xi)胞 人 √
CAKI-1 人腎透明細胞癌皮(pi)膚轉移細胞 人 √
cal-27 人舌鱗(lin)癌細胞(bao) 人 √
CALU-1 人(ren)肺(fei)癌細胞 人 √
CALU-3 人肺(fei)腺癌細胞(胸水) 人 √
CCD-1095SK 人(ren)乳腺浸潤性導(dao)管癌(ai)旁(pang)皮膚細胞(bao) 人 √
CCRF-CEM 人急性(xing)淋(lin)巴細胞白血(xue)病T淋巴細胞 人 √
CEM/C1 人急性淋巴細胞(bao)白血病細胞(bao) 人 √
CFPAC-1 人胰腺癌細(xi)胞 人 √
CNE1 人鼻咽癌細胞 人 √
CNE2 人鼻咽癌細胞(bao) 人 √
COLO 205 人結腸癌細胞(bao) 人 √
COLO 320DM 人(ren)結直腸腺癌細胞 人 √
CW-2 人結腸腺癌細胞 人(ren) √
DAOY Daoy細胞(bao),具體不清楚 人 √
DAUDI 人Burkitt's淋巴瘤細(xi)胞 人 √
DETROIT 562 人咽(yan)頭(tou)癌胸水轉移細(xi)胞 人 √
DLD-1 人結直腸(chang)腺癌上(shang)皮細胞(bao) 人 √
DU 145 人前列腺癌細(xi)胞 人 √
EA.HY926 人臍靜脈細(xi)胞(bao)融合細(xi)胞(bao) 人 √
ECV304 人(ren)臍靜脈(mo)內皮細胞 人 √
ES-2 人卵巢透(tou)明細(xi)胞(bao)癌細(xi)胞(bao) 人(ren) √
FADU 人咽鱗癌(ai)細胞(bao) 人 √
FTC-133 人濾泡性(xing)甲(jia)狀腺癌細(xi)胞 人 √
GBC-SD 人(ren)膽(dan)囊癌細胞 人(ren) √
GCIY 人(ren) √
H1299 人非小細(xi)胞肺癌細(xi)胞 人 √
H1395 人肺腺癌細胞(bao) 人 √
H1650 人非小細胞肺癌細胞 人 √
H1703 人肺(fei)鱗(lin)癌細胞 人 √
H1755 人肺癌細胞 人 √
H1944 人(ren)非小細(xi)胞肺癌細(xi)胞 人 √
H1975 人(ren)肺腺癌細胞 人 √
H2170 人肺鱗癌細胞 人 √
H226 人(ren)肺鱗癌細胞 人 √
H292 人(ren)肺癌細胞(淋巴結轉移) 人 √
H358 人(ren)非小細胞(bao)肺癌細胞(bao) 人 √
H460 人(ren)大細胞(bao)肺癌細胞(bao) 人 √
H520 人肺鱗(lin)癌細胞(bao) 人 √
H596 人肺腺(xian)鱗癌細胞 人 √
H661 人大細胞(bao)肺癌細胞(bao) 人 √
H716 人結直(zhi)腸腺癌(ai)細胞 人 √
H838 人(ren)非小細(xi)胞(bao)(bao)肺癌細(xi)胞(bao)(bao) 人 √
Hacat 人永(yong)生化(hua)角(jiao)質(zhi)形(xing)成(cheng)細(xi)胞 人 √
HBE 人支氣管上(shang)皮(pi)樣細(xi)胞(bao) 人 √
HBL-100 人整合SV40基因(yin)的乳(ru)腺上皮細(xi)胞 人(ren) √
HCC1937 人乳腺癌細胞(bao) 人 √
HCC827 人非小細胞(bao)肺癌細胞(bao) 人 √
HCCC-9810 人膽(dan)管(guan)細胞(bao)(bao)型肝癌(ai)細胞(bao)(bao) 人(ren) √
HCCLM3 人高轉移(yi)肝癌細(xi)胞 人 √
HCT-116 人(ren)結腸癌細胞 人 √
HCT-8 人回(hui)盲(mang)腸癌(ai)細胞 人 √
HEC-1-A 人子(zi)宮內膜(mo)腺癌細胞 人 √
HEC-1-B 人子宮內(nei)膜腺癌細胞(bao) 人 √
HEK-293 人胚腎細胞 人 √
HEL 人(ren)紅(hong)白細胞(bao)白血病(bing)細胞(bao) 人 √
HELA229 人宮(gong)頸癌復蘇細胞 人 √
Hela-J 人 √
Hep G2 人肝(gan)癌(ai)細胞 人 √
HEP-2 人喉表皮(pi)樣癌細胞 人 √
HEP3B 人(ren)肝癌細(xi)胞 人 √
HEY 人卵巢癌細胞 人 √
HFF 人包皮成纖維細胞 人(ren) √
HFL1 人(ren)胚肺(fei)成纖(xian)維細(xi)胞(bao) 人 √
HFOB1.19 人(ren)SV40轉染成骨細(xi)胞 人 √
HGC-27 人胃癌細胞(bao)(未分化) 人 √
HK-2 人腎皮質近曲小管上皮細(xi)胞 人 √
HL-60 人原(yuan)髓細胞白(bai)血病細胞 人(ren) √
HMEC-1 人(ren)微血管內皮細胞 人 √
HO-8910 人(ren)卵巢癌細胞 人 √
HPN1 人(ren) √
HS683 細(xi)胞(bao)人腦視神經膠質瘤細(xi)胞(bao) 人 √
Hs888Lu 人肺(fei)成(cheng)纖維(wei)細胞 人 √
HT-1080 人纖維肉(rou)瘤細胞 人 √
HT-29 人結腸癌細胞 人(ren) √
HT-3 人(ren) √
HTR8 人滋養細胞(bao) 人 √
HUCCT1 膽管上皮癌細胞 人(ren) √
HuH-6 人肝母細胞瘤細胞 人(ren) √
HUH-7 人肝癌細胞 人 √
HUT78 人T淋巴細胞(bao)白血病(bing)細胞(bao) 人 √
HUVEC-C 人臍靜脈內(nei)皮細胞 人(ren) √
ISK 人 √
JAR 人(ren) √
JEG-3 人(ren) √
JEKO-1 人(ren) √
Jurkat,Clone E6-1 人 √
K-562 人 √
KATO III 人 √
KLE 人 √
KTC-1 人 √
KU812 人 √
KYSE-150 人 √
LI-7 人 √
LNcap clone FGC 人 √
L-O2 人 √
LOVO 人 √
LS 174T 人 √
MCF10A 人 √
MCF-7 人(ren) √
MDA-MB-231 人 √
MDA-MB-231(DMEM) 人 √
MDA-MB-231(L-15) 人 √
MDA-MB-436 人(ren) √
MDA-MB-468 人 √
MG-63 人(ren) √
MGC-803 人 √
MIA PaCa-2 人 √
MM.1S 人 √
MNNG/HOS Cl #5 人 √
MRC-5 人 √
MV4-11 人(ren) √
N87 人 √
NCI-H1299 人 √
NCI-H1563 人 √
NCI-H2452 人(ren) √
NCI-H647 人 √
NK-92 人 √
NTHY-ORI-31 人 √
OCM1A 人 √
OS-RC-2 人 √
OVCAR-3 人 √
PANC-1 人 √
PC-3 人 √
PC-3M 人 √
PC-9 人(ren) √
PLC/PRF/5 人(ren) √
Raji 人 √
RBE 人(ren) √
RD 人 √
RKO 人 √
RL95-2 人 √
RT4 人(ren) √
RWPE-1 人 √
SAOS-2 人 √
SH-SY5Y 人 √
SiHa 人 √
SJCRH30 人 √
SK-BR-3 人 √
SK-HEP-1 人 √
SK-MES-1 人 √
SK-N-BE(2) 人 √
SK-NEP-1 人 √
SK-N-SH 人 √
SK-OV-3 人 √
SPC-A-1 人 √
SU-DHL-6 人 √
SV-HUC-1 人 √
SW 1990 人 √
SW1353 √
SW480 人 √
SW579 人(ren) √
SW620 人 √
SW-620 人 √
SW839 人 √
SW982 人 √
T/G HA-VSMC 人 √
T-24 人 √
T47D 人 √
T82 人 √
T84 人 √
TCA-8113 人 √
TE 353.Sk 人 √
TE-1 人 √
THP-1 人 √
TMK1 人 √
TPC-1 人(ren) √
TT 人 √
TTA1 人 √
U-118MG 人(ren) √
U-2 OS 人 √
U251 人 √
U87 人 √
U-87MG 人 √
U-937 人 √
UM-UC-3 人 √
VCAP 人 √
WERI-RB-1 人 √
WI-38 人 √
WISH 人 √
WPMY-1 √
ZR-75-1 人 √
ZR-75-30 人 √