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ECV304,人臍(qi)靜(jing)脈內皮細(xi)胞(bao) 消化要有個度
產品代號:ECV304
中文名稱:人臍(qi)靜脈(mo)內皮細胞
種屬:人(ren)
是否鑒定(ding):已鑒定(ding)
庫存狀(zhuang)態:現貨
慧穎生物提供(gong)2000種(zhong)類細胞株細胞系(xi),400多(duo)株已鑒定細胞,涉及種(zhong)屬:人(ren),大鼠(shu),小鼠(shu),兔子,魚(yu),牛,倉鼠(shu)等,我們提供(gong)好(hao)的(de)產品,好(hao)的(de)服務,好(hao)的(de)技術,復(fu)蘇(su)周期短,*,細胞狀態良好(hao),飽滿,有光澤,無支原(yuan)體。
ECV304,人(ren)臍靜脈內皮細胞(bao) 消化要有個度
細(xi)胞(bao)培養(yang),尤其是細(xi)胞(bao)系的培養(yang),就細(xi)胞(bao)消(xiao)化而言,多做、善于總結,就可以把(ba)細(xi)胞(bao)養(yang)的越來越好
絕大部分細胞消化只要用胰酶潤洗一(yi)遍即可:
吸去(qu)胰(yi)酶(mei)后,殘留的(de)(de)那些無(wu)法計(ji)算體積的(de)(de)附著(zhu)在細(xi)胞表面的(de)(de)微量胰(yi)酶(mei)在37度一般不(bu)到2min足夠消(xiao)化(hua)細(xi)胞(絕大部分1min不(bu)到)。對于(yu)這(zhe)些細(xi)胞原則上(shang)不(bu)要用胰(yi)酶(mei)孵育細(xi)胞,連續這(zhe)樣(yang)傳代,對細(xi)胞傷害很大。簡單(dan)的(de)(de)程序是PBS潤(run)洗(xi)吸去(qu),胰(yi)酶(mei)潤(run)洗(xi)吸去(qu),然后37度消(xiao)化(hua)。
什么算是消化好了呢(ni)?
不需要把細(xi)胞全部消化成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好(hao)了(le),一般你肉眼觀(guan)察貼壁(bi)細(xi)胞層,只要能移(yi)動了(le),多半(ban)呈沙(sha)壯移(yi)動,其實已經(jing)可以了(le)。
一(yi)般能(neng)移動(dong)了,說明細(xi)(xi)(xi)胞與培養基質(zhi)材(cai)料的附(fu)著(zhu)已經(jing)消(xiao)失(shi)了,細(xi)(xi)(xi)胞之間的附(fu)著(zhu)也已經(jing)消(xiao)失(shi)了,細(xi)(xi)(xi)胞已經(jing)獨立分布了(雖(sui)然沒有呈(cheng)現很廣的離散分布)。這個時(shi)候應該停止(zhi)消(xiao)化,不要等到看到鏡(jing)下所(suo)有細(xi)(xi)(xi)胞都分離得非常好,間隙很大(da),才停止(zhi)。
細(xi)胞(bao)(bao)(bao)就是(shi)*成單個(ge)(ge)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)懸(xuan)液,之后在貼(tie)壁的(de)過程中(zhong)仍(reng)然(ran)會聚集,這個(ge)(ge)是(shi)貼(tie)壁培養的(de)細(xi)胞(bao)(bao)(bao),尤其是(shi)腫(zhong)瘤細(xi)胞(bao)(bao)(bao)的(de)一個(ge)(ge)特性(xing),你可以嘗(chang)試,準備100%的(de)單個(ge)(ge)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)懸(xuan)液,貼(tie)壁后觀察細(xi)胞(bao)(bao)(bao),仍(reng)然(ran)是(shi)幾個(ge)(ge)幾個(ge)(ge)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)聚集在一起。
一些懸浮(fu)培養(yang)細胞也是(shi)如此,容易聚集,不(bu)要過幾個小時就(jiu)拿出來吹打(da)成單細胞懸液(ye)。細胞只(zhi)要能從基質(zhi)上脫離下來,即使是(shi)成片的(比如Calu-3細胞),吹打(da)不(bu)超過20次(ci)(一般(ban)10次(ci)即可),成小規(gui)模聚集(10個細胞左右)是(shi)正常的,不(bu)要再去延長消化(hua)時間,等待單細胞懸液(ye)出現(xian)。
比較難消化的細胞:
潤洗(xi)方法(fa)5min還不(bu)能消(xiao)(xiao)(xiao)(xiao)化,以結腸癌(ai)細(xi)胞(bao)(bao)為(wei)例,比如HCT15、LS411和KM12細(xi)胞(bao)(bao),胰酶(mei)消(xiao)(xiao)(xiao)(xiao)化,一般10 cm 培養皿,一次多加入(ru)300ul-500ul就(jiu)足夠了。即使這樣(yang)難消(xiao)(xiao)(xiao)(xiao)化的細(xi)胞(bao)(bao),一般不(bu)超(chao)過5min,即可見(jian)細(xi)胞(bao)(bao)成片移動,就(jiu)應該停止消(xiao)(xiao)(xiao)(xiao)化。一些正常細(xi)胞(bao)(bao)也(ye)會(hui)有難消(xiao)(xiao)(xiao)(xiao)化的時候(hou),比如tsDC細(xi)胞(bao)(bao),用胰酶(mei)孵育,3min左右即可看到成片沙狀(zhuang)移動。
常規的細胞(bao)實驗,受(shou)消化影響(xiang)不是很大:
如(ru)(ru)果(guo)不(bu)用胰(yi)酶去孵育而(er)使(shi)用潤洗的(de)方法(fa)消化的(de)話(難消化細(xi)胞(bao)例外)。但少數(shu)實驗(yan),比如(ru)(ru)病毒(du)包裝(zhuang)(zhuang),對細(xi)胞(bao)代數(shu),對細(xi)胞(bao)狀態要求(qiu)*。這個時候(hou),胰(yi)酶消化,就是(shi)潤洗,都(dou)會對細(xi)胞(bao)包裝(zhuang)(zhuang)病毒(du)的(de)能力有(you)影(ying)響,傳(chuan)代次數(shu)一多,細(xi)胞(bao)包裝(zhuang)(zhuang)能力就會逐漸下(xia)降。這個時候(hou)都(dou)不(bu)用胰(yi)酶消化,用一些(xie)鹽(yan)溶液(不(bu)是(shi)EDTA液)即可。這些(xie)鹽(yan)溶液通過影(ying)響細(xi)胞(bao)外基質相關酶的(de)活性,來使(shi)得細(xi)胞(bao)脫離基質附著(zhu)表(biao)面,但不(bu)切(qie)割任何蛋白。
EDTA的(de)作用:
許多人不用胰(yi)(yi)酶(mei)(mei),只用EDTA,或(huo)者(zhe)用胰(yi)(yi)酶(mei)(mei)/EDTA聯合作用。這(zhe)里要(yao)明白(bai),胰(yi)(yi)酶(mei)(mei)切割細(xi)胞外基(ji)質的(de)(de)(de)一些(xie)負責粘連和附著的(de)(de)(de)蛋白(bai),而EDTA通(tong)過螯(ao)合Ca離子,作用于整聯蛋白(bai)的(de)(de)(de)活(huo)性,所以EDTA的(de)(de)(de)作用更加溫和。有的(de)(de)(de)人在(zai)胰(yi)(yi)酶(mei)(mei)里添(tian)加一些(xie)EDTA,或(huo)者(zhe)對(dui)付特別(bie)難消(xiao)化(hua)的(de)(de)(de)細(xi)胞,添(tian)加多一些(xie)EDTA,就是(shi)這(zhe)個道(dao)理。一般不要(yao)試(shi)圖延長消(xiao)化(hua)時(shi)間(如(ru)果10min還(huan)消(xiao)化(hua)不*的(de)(de)(de)話(hua)),而應該想(xiang)其它辦法(fa)。
PBS洗(xi)滌:
消(xiao)化之(zhi)前(qian)用(yong)PBS洗滌,是常見的(de)操作,因為(wei)血清中(zhong)含有抑制胰酶(mei)的(de)蛋白。對(dui)于一些難(nan)消(xiao)化細胞(bao),可(ke)以配制不(bu)含Ca,Mg離子的(de)PBS,因為(wei)這(zhe)些離子也(ye)會抑制胰酶(mei)的(de)活(huo)性。但對(dui)于絕大部分細胞(bao)用(yong)胰酶(mei)或者EDTA溶液潤洗即可(ke)消(xiao)化,不(bu)需要(yao)配制不(bu)含Ca,Mg離子的(de)溶液。
細胞(bao)代號 細胞(bao)名稱(cheng) 種屬 鑒定結果
ECV304,人臍靜脈內皮細胞 消化要有個度(du)
編號 中文(wen)名稱(cheng) 是否鑒(jian)定
5637 人(ren)膀胱(guang)癌細胞 人 √
7703 人肝癌(ai)細胞 人(ren) √
143B 人骨肉瘤細胞(bao) 人 √
22RV1 人前(qian)列腺(xian)癌細胞 人 √
293FT 人胚腎細胞(bao) 人 √
293T 人(ren)胚腎細胞(bao) 人 √
435S 人乳腺癌細胞/人黑素瘤細(xi)胞(bao) 人 √
453 人乳腺(xian)癌細胞(bao) 人 √
6T-CEM 人T細胞(bao)白血病細胞(bao) 人 √
769-P 人腎(shen)細胞腺(xian)癌細胞 人 √
786-O 人腎透明(ming)細胞腺(xian)癌細胞 人 √
95-D 人高轉移肺癌(ai)細胞(bao) 人 √
97H 人高轉移性肝(gan)癌(ai)細胞 人(ren) √
A172 人(ren)膠質母細胞(bao)瘤(liu)細胞(bao) 人 √
A2058 人(ren)黑色素瘤(liu)細胞 人(ren) √
A2780 人卵巢(chao)癌細胞 人 √
A375 人黑色素瘤細胞(bao)株(zhu) 人 √
A431 人表(biao)皮癌細胞 人 √
A498 人腎癌細(xi)胞 人 √
A549 人非小細胞肺癌細 人 √
A-673 人橫(heng)紋(wen)肌肉(rou)瘤細胞 人 √
ACHN 人腎細(xi)胞腺癌細(xi)胞 人 √
AGS 人胃腺癌細胞 人 √
AN3CA 人(ren)子(zi)宮內膜腺癌(轉(zhuan)移)細胞 人(ren) √
ARH-77 人漿細(xi)胞(bao)白(bai)血病 人(ren) √
ARO 沒有,找不到信(xin)息(xi) 人 √
ARPE-19 人(ren)視網膜上皮細胞 人 √
B-CPAP 人甲(jia)狀(zhuang)腺癌細胞 人 √
BEAS-2b 人正常肺上皮細胞 人(ren) √
BEWO 人絨毛膜(mo)腫瘤(liu)細胞 人 √
BGC-823 人胃腺癌細胞(bao)(低分化) 人 √
BT-474 人(ren)乳腺導管癌細胞 人 √
BT-549 人乳腺管癌(ai)細(xi)胞 人 √
BXPC-3 人原位胰腺腺癌細(xi)胞 人 √
C-33 A 人子(zi)宮頸癌細胞 人 √
C643 人甲(jia)狀腺癌細(xi)胞 人(ren) √
C8166 人T淋巴細(xi)胞白(bai)血病細(xi)胞 人 √
Ca Ski 人宮頸(jing)癌腸轉(zhuan)移細胞(bao)/人宮頸癌上(shang)皮細(xi)胞 人(ren) √
Caco2 人結直腸腺癌細胞 人 √
CAKI-1 人腎透明細(xi)胞癌皮膚(fu)轉移細(xi)胞 人 √
cal-27 人舌鱗癌細胞 人 √
CALU-1 人肺癌細胞 人(ren) √
CALU-3 人肺(fei)腺癌細胞(bao)(胸水(shui)) 人 √
CCD-1095SK 人乳腺浸潤性導(dao)管癌旁皮(pi)膚細胞 人 √
CCRF-CEM 人急(ji)性淋巴細胞白血病T淋巴細胞(bao) 人 √
CEM/C1 人急性(xing)淋巴細胞白(bai)血(xue)病細胞 人 √
CFPAC-1 人(ren)胰(yi)腺癌細胞 人 √
CNE1 人鼻咽癌細胞 人 √
CNE2 人鼻(bi)咽癌細胞(bao) 人 √
COLO 205 人結腸癌細(xi)胞 人 √
COLO 320DM 人結直腸腺癌細胞(bao) 人 √
CW-2 人結腸(chang)腺癌細胞(bao) 人 √
DAOY Daoy細胞(bao),具體(ti)(ti)不清楚 人 √
DAUDI 人Burkitt's淋巴(ba)瘤細胞 人 √
DETROIT 562 人咽頭癌胸水轉(zhuan)移細胞 人 √
DLD-1 人結直腸腺癌上皮(pi)細胞 人 √
DU 145 人(ren)前列腺癌細胞(bao) 人 √
EA.HY926 人臍(qi)靜脈(mo)細胞(bao)融合細胞(bao) 人 √
ECV304 人臍靜脈內皮細胞 人 √
ES-2 人卵(luan)巢透明細胞(bao)癌細胞(bao) 人 √
FADU 人咽鱗癌細胞 人 √
FTC-133 人濾泡性甲狀腺癌細胞 人 √
GBC-SD 人膽囊癌細胞 人 √
GCIY 人(ren) √
H1299 人非小(xiao)細胞肺癌細胞 人 √
H1395 人肺腺癌細(xi)胞 人 √
H1650 人非小細(xi)胞肺(fei)癌細(xi)胞 人 √
H1703 人肺(fei)鱗(lin)癌(ai)細(xi)胞 人 √
H1755 人肺癌細(xi)胞 人 √
H1944 人非小細胞肺癌(ai)細胞 人 √
H1975 人肺腺癌細胞 人 √
H2170 人(ren)肺鱗癌細胞 人 √
H226 人肺鱗癌細胞 人(ren) √
H292 人肺癌細(xi)胞(bao)(淋巴結轉移) 人(ren) √
H358 人非小(xiao)細(xi)胞(bao)肺癌細(xi)胞(bao) 人 √
H460 人大細(xi)胞(bao)肺癌細(xi)胞(bao) 人 √
H520 人(ren)肺鱗癌細胞 人 √
H596 人肺腺鱗癌(ai)細(xi)胞 人 √
H661 人大細胞肺癌細胞 人 √
H716 人結直腸腺癌(ai)細胞 人 √
H838 人(ren)非(fei)小細胞(bao)肺(fei)癌細胞(bao) 人 √
Hacat 人永生化(hua)角質形成細胞(bao) 人 √
HBE 人(ren)支(zhi)氣管上皮樣(yang)細胞 人 √
HBL-100 人整合SV40基因(yin)的乳腺(xian)上皮細胞 人 √
HCC1937 人乳腺癌細胞 人 √
HCC827 人(ren)非小細胞肺癌細胞 人 √
HCCC-9810 人(ren)膽管細胞型肝癌細胞 人 √
HCCLM3 人高轉移肝癌細胞 人 √
HCT-116 人結(jie)腸(chang)癌(ai)細胞 人(ren) √
HCT-8 人回盲(mang)腸癌細胞(bao) 人 √
HEC-1-A 人子宮內膜腺癌細胞 人 √
HEC-1-B 人子(zi)宮內(nei)膜腺(xian)癌細胞 人(ren) √
HEK-293 人胚腎(shen)細胞 人(ren) √
HEL 人紅白細胞白血病(bing)細胞 人 √
HELA229 人宮頸癌復蘇細胞 人 √
Hela-J 人 √
Hep G2 人(ren)肝癌細胞(bao) 人 √
HEP-2 人喉表皮樣癌細胞(bao) 人 √
HEP3B 人(ren)肝癌細(xi)胞 人(ren) √
HEY 人卵巢癌細胞 人 √
HFF 人包皮成纖維細胞 人(ren) √
HFL1 人胚肺(fei)成纖(xian)維細胞 人 √
HFOB1.19 人SV40轉染成骨細(xi)胞 人 √
HGC-27 人胃癌細胞(未(wei)分化(hua)) 人 √
HK-2 人腎皮質近曲小(xiao)管上皮細胞 人 √
HL-60 人原髓(sui)細(xi)胞白血病細(xi)胞 人(ren) √
HMEC-1 人(ren)微血管內皮細胞 人 √
HO-8910 人卵巢癌細胞 人(ren) √
HPN1 人 √
HS683 細(xi)胞人腦視神經膠質瘤(liu)細(xi)胞 人 √
Hs888Lu 人肺(fei)成纖維細(xi)胞(bao) 人 √
HT-1080 人纖維(wei)肉(rou)瘤細(xi)胞(bao) 人(ren) √
HT-29 人結腸癌(ai)細(xi)胞 人(ren) √
HT-3 人 √
HTR8 人滋養細胞 人 √
HUCCT1 膽管上(shang)皮癌(ai)細(xi)胞 人 √
HuH-6 人肝母細胞(bao)(bao)瘤細胞(bao)(bao) 人 √
HUH-7 人肝癌細胞 人(ren) √
HUT78 人(ren)T淋(lin)巴細(xi)胞白血病細(xi)胞 人 √
HUVEC-C 人臍(qi)靜(jing)脈內(nei)皮細胞 人 √
ISK 人 √
JAR 人(ren) √
JEG-3 人(ren) √
JEKO-1 人 √
Jurkat,Clone E6-1 人 √
K-562 人 √
KATO III 人(ren) √
KLE 人 √
KTC-1 人(ren) √
KU812 人 √
KYSE-150 人 √
LI-7 人(ren) √
LNcap clone FGC 人 √
L-O2 人 √
LOVO 人 √
LS 174T 人 √
MCF10A 人 √
MCF-7 人 √
MDA-MB-231 人(ren) √
MDA-MB-231(DMEM) 人 √
MDA-MB-231(L-15) 人 √
MDA-MB-436 人 √
MDA-MB-468 人 √
MG-63 人 √
MGC-803 人(ren) √
MIA PaCa-2 人 √
MM.1S 人 √
MNNG/HOS Cl #5 人 √
MRC-5 人 √
MV4-11 人 √
N87 人 √
NCI-H1299 人 √
NCI-H1563 人 √
NCI-H2452 人 √
NCI-H647 人 √
NK-92 人 √
NTHY-ORI-31 人 √
OCM1A 人 √
OS-RC-2 人(ren) √
OVCAR-3 人(ren) √
PANC-1 人 √
PC-3 人 √
PC-3M 人 √
PC-9 人 √
PLC/PRF/5 人 √
Raji 人 √
RBE 人 √
RD 人(ren) √
RKO 人 √
RL95-2 人 √
RT4 人 √
RWPE-1 人 √
SAOS-2 人 √
SH-SY5Y 人 √
SiHa 人 √
SJCRH30 人 √
SK-BR-3 人 √
SK-HEP-1 人 √
SK-MES-1 人 √
SK-N-BE(2) 人 √
SK-NEP-1 人 √
SK-N-SH 人(ren) √
SK-OV-3 人 √
SPC-A-1 人 √
SU-DHL-6 人(ren) √
SV-HUC-1 人 √
SW 1990 人 √
SW1353 √
SW480 人 √
SW579 人 √
SW620 人 √
SW-620 人 √
SW839 人 √
SW982 人 √
T/G HA-VSMC 人 √
T-24 人 √
T47D 人 √
T82 人 √
T84 人 √
TCA-8113 人(ren) √
TE 353.Sk 人 √
TE-1 人 √
THP-1 人 √
TMK1 人 √
TPC-1 人 √
TT 人 √
TTA1 人 √
U-118MG 人 √
U-2 OS 人 √
U251 人(ren) √
U87 人 √
U-87MG 人 √
U-937 人 √
UM-UC-3 人 √
VCAP 人 √
WERI-RB-1 人(ren) √
WI-38 人(ren) √
WISH 人 √
WPMY-1 √
ZR-75-1 人 √
ZR-75-30 人 √