GBC-SD，人膽囊癌細胞(bao)  消化要有個(ge)度

產品代號：GBC-SD

中文名稱：人膽囊癌細胞

種屬：人

是否鑒(jian)定：已鑒(jian)定

庫存(cun)狀態：現(xian)貨

慧穎生物提供2000種類細(xi)胞(bao)株(zhu)細(xi)胞(bao)系(xi)，400多株(zhu)已(yi)鑒定細(xi)胞(bao)，涉及(ji)種屬：人，大鼠，小鼠，兔(tu)子(zi)，魚，牛，倉鼠等，我(wo)們提供好(hao)的(de)產品，好(hao)的(de)服務(wu)，好(hao)的(de)技(ji)術，復(fu)蘇周期(qi)短，*，細(xi)胞(bao)狀態良(liang)好(hao)，飽(bao)滿，有光(guang)澤，無(wu)支原(yuan)體。

GBC-SD，人膽囊癌(ai)細(xi)胞  消化要(yao)有個度

細胞(bao)培養(yang)，尤其(qi)是細胞(bao)系的(de)培養(yang)，就(jiu)(jiu)細胞(bao)消化(hua)而言(yan)，多做、善于總結，就(jiu)(jiu)可以把細胞(bao)養(yang)的(de)越(yue)來越(yue)好(hao)

絕大部分細胞消化只要用胰酶潤洗一遍即(ji)可：

吸(xi)去胰(yi)酶后，殘留(liu)的那些無(wu)法計算體積的附著(zhu)在(zai)細胞表面(mian)的微量(liang)胰(yi)酶在(zai)37度一般不到2min足夠消(xiao)化細胞（絕(jue)大(da)部(bu)分1min不到）。對于這(zhe)些細胞原則(ze)上不要用胰(yi)酶孵育(yu)細胞，連續這(zhe)樣(yang)傳(chuan)代(dai)，對細胞傷害很大(da)。簡單的程序是PBS潤(run)(run)洗(xi)吸(xi)去，胰(yi)酶潤(run)(run)洗(xi)吸(xi)去，然后37度消(xiao)化。

什么算是消化好了呢？

不(bu)需(xu)要(yao)把細胞全(quan)部(bu)消化成間(jian)隔分布很離散的單個圓形(xing)才算消化好(hao)了(le)，一(yi)般(ban)你肉眼觀察貼壁細胞層(ceng)，只要(yao)能移動了(le)，多半呈沙壯移動，其實已經可以了(le)。

一般能移動(dong)了，說(shuo)明細(xi)(xi)胞與(yu)培(pei)養基質材料的(de)附著已(yi)經(jing)消失(shi)了，細(xi)(xi)胞之間的(de)附著也已(yi)經(jing)消失(shi)了，細(xi)(xi)胞已(yi)經(jing)獨立分布(bu)了（雖然沒有呈現(xian)很廣的(de)離(li)散分布(bu)）。這(zhe)個時候應該停(ting)(ting)止(zhi)消化，不要(yao)等到看到鏡下所有細(xi)(xi)胞都分離(li)得非常好(hao)，間隙(xi)很大，才(cai)停(ting)(ting)止(zhi)。

細胞(bao)(bao)(bao)就是*成(cheng)單(dan)個(ge)(ge)細胞(bao)(bao)(bao)懸液，之后(hou)在(zai)(zai)貼壁(bi)的(de)過程中仍然(ran)會聚集，這(zhe)個(ge)(ge)是貼壁(bi)培養的(de)細胞(bao)(bao)(bao)，尤其是腫瘤細胞(bao)(bao)(bao)的(de)一個(ge)(ge)特性，你可以(yi)嘗(chang)試，準備100%的(de)單(dan)個(ge)(ge)細胞(bao)(bao)(bao)懸液，貼壁(bi)后(hou)觀察細胞(bao)(bao)(bao)，仍然(ran)是幾個(ge)(ge)幾個(ge)(ge)細胞(bao)(bao)(bao)聚集在(zai)(zai)一起。

一些懸浮培養細胞也是(shi)如此(ci)，容易聚集，不要過幾個小時就拿出來(lai)吹(chui)打成(cheng)單細胞懸液。細胞只(zhi)要能從基質上(shang)脫(tuo)離下來(lai)，即使(shi)是(shi)成(cheng)片的（比如Calu-3細胞），吹(chui)打不超過20次（一般(ban)10次即可），成(cheng)小規模聚集（10個細胞左右）是(shi)正常(chang)的，不要再去延長(chang)消(xiao)化時間，等(deng)待單細胞懸液出現。

比較難消化的(de)細胞：

潤洗方(fang)法5min還不(bu)能(neng)消化，以結腸(chang)癌(ai)細(xi)胞為例，比(bi)如HCT15、LS411和(he)KM12細(xi)胞，胰(yi)酶(mei)消化，一(yi)般(ban)(ban)10 cm 培(pei)養皿，一(yi)次(ci)多(duo)加入(ru)300ul-500ul就足(zu)夠了。即使這樣難(nan)(nan)消化的細(xi)胞，一(yi)般(ban)(ban)不(bu)超過5min，即可見細(xi)胞成(cheng)片移動，就應該(gai)停止消化。一(yi)些(xie)正常細(xi)胞也會有難(nan)(nan)消化的時候，比(bi)如tsDC細(xi)胞，用胰(yi)酶(mei)孵(fu)育，3min左右即可看到成(cheng)片沙狀移動。

常規的(de)細(xi)胞實(shi)驗，受消化影響不是很大：

如果不用(yong)胰(yi)(yi)酶去(qu)孵(fu)育而(er)使用(yong)潤(run)洗的(de)方法消(xiao)(xiao)化的(de)話（難消(xiao)(xiao)化細(xi)胞(bao)(bao)例外）。但(dan)少(shao)數(shu)實驗，比(bi)如病(bing)毒包(bao)(bao)(bao)裝，對細(xi)胞(bao)(bao)代(dai)數(shu)，對細(xi)胞(bao)(bao)狀態要求*。這個時候，胰(yi)(yi)酶消(xiao)(xiao)化，就是(shi)(shi)潤(run)洗，都會對細(xi)胞(bao)(bao)包(bao)(bao)(bao)裝病(bing)毒的(de)能力有影(ying)響(xiang)，傳代(dai)次數(shu)一多，細(xi)胞(bao)(bao)包(bao)(bao)(bao)裝能力就會逐漸下降。這個時候都不用(yong)胰(yi)(yi)酶消(xiao)(xiao)化，用(yong)一些(xie)鹽溶液（不是(shi)(shi)EDTA液）即可。這些(xie)鹽溶液通過影(ying)響(xiang)細(xi)胞(bao)(bao)外基(ji)(ji)質相(xiang)關酶的(de)活性，來使得細(xi)胞(bao)(bao)脫(tuo)離基(ji)(ji)質附(fu)著(zhu)表面(mian)，但(dan)不切(qie)割任何蛋白。

EDTA的作(zuo)用：

許多人不用胰(yi)酶，只用EDTA，或(huo)者用胰(yi)酶/EDTA聯(lian)合(he)(he)作(zuo)用。這里(li)要明白(bai)，胰(yi)酶切割細胞外基質(zhi)的(de)(de)一些(xie)(xie)負責粘連和附著的(de)(de)蛋(dan)白(bai)，而EDTA通(tong)過螯合(he)(he)Ca離子(zi)，作(zuo)用于(yu)整聯(lian)蛋(dan)白(bai)的(de)(de)活(huo)性，所(suo)以EDTA的(de)(de)作(zuo)用更加(jia)(jia)溫和。有的(de)(de)人在胰(yi)酶里(li)添(tian)加(jia)(jia)一些(xie)(xie)EDTA，或(huo)者對付特別難消(xiao)化的(de)(de)細胞，添(tian)加(jia)(jia)多一些(xie)(xie)EDTA，就是這個道理。一般不要試圖延長消(xiao)化時間（如果(guo)10min還消(xiao)化不*的(de)(de)話(hua)），而應該想其它辦(ban)法。

PBS洗(xi)滌：

消(xiao)化(hua)之前用PBS洗(xi)滌，是常(chang)見的(de)操作，因(yin)為血(xue)清中含(han)有抑制胰酶(mei)的(de)蛋白(bai)。對于(yu)一些難消(xiao)化(hua)細(xi)胞(bao)，可以配(pei)制不含(han)Ca，Mg離子的(de)PBS，因(yin)為這些離子也會抑制胰酶(mei)的(de)活性。但對于(yu)絕大部分細(xi)胞(bao)用胰酶(mei)或者EDTA溶(rong)液(ye)潤(run)洗(xi)即可消(xiao)化(hua)，不需要(yao)配(pei)制不含(han)Ca，Mg離子的(de)溶(rong)液(ye)。

細(xi)胞代號(hao)         細胞(bao)名稱         種屬         鑒定結果(guo)

GBC-SD，人膽囊癌(ai)細(xi)胞  消(xiao)化(hua)要有個度

編號 中文(wen)名(ming)稱(cheng)  是否鑒(jian)定(ding)

5637         人膀胱癌細胞         人(ren)     √

7703         人(ren)肝癌細胞(bao)     人     √

143B         人骨肉瘤細(xi)胞         人     √

22RV1      人(ren)前列(lie)腺癌細胞     人(ren)     √

293FT       人胚腎細胞     人(ren)     √

293T         人胚腎細胞(bao)     人     √

435S          人(ren)乳(ru)腺癌細(xi)胞/人黑素(su)瘤細胞        人     √

453  人乳腺癌細胞(bao)         人(ren)     √

6T-CEM    人T細胞白血病細胞     人     √

769-P        人腎細胞腺癌細胞         人     √

786-O       人腎透明(ming)細胞腺癌(ai)細胞         人(ren)     √

95-D          人高轉移肺(fei)癌(ai)細(xi)胞         人     √

97H  人高轉移性肝癌細胞     人(ren)     √

A172         人膠質母細(xi)(xi)胞瘤細(xi)(xi)胞     人     √

A2058       人黑色素瘤(liu)細胞     人     √

A2780       人卵巢癌細胞         人     √

A375         人黑(hei)色素(su)瘤細胞株         人(ren)     √

A431         人(ren)表皮(pi)癌(ai)細胞         人     √

A498         人腎(shen)癌細胞     人     √

A549         人非小(xiao)細胞(bao)肺(fei)癌細         人     √

A-673        人(ren)橫紋肌肉瘤細胞         人     √

ACHN       人腎(shen)細胞腺癌細胞         人     √

AGS  人胃腺癌細胞         人     √

AN3CA     人子宮內(nei)膜腺癌(轉移)細(xi)胞  人     √

ARH-77    人漿(jiang)細胞白血病(bing)     人     √

ARO 沒(mei)有，找不到信(xin)息         人     √

ARPE-19   人視網膜上皮細胞         人(ren)     √

B-CPAP     人(ren)甲狀(zhuang)腺(xian)癌細(xi)胞     人     √

BEAS-2b   人正常(chang)肺上皮(pi)細胞         人(ren)     √

BEWO       人絨毛膜腫瘤細(xi)胞         人     √

BGC-823  人胃(wei)腺癌細(xi)胞(低分化)          人(ren)     √

BT-474     人乳(ru)腺導(dao)管癌(ai)細胞         人     √

BT-549     人乳腺管癌細胞     人     √

BXPC-3     人原(yuan)位胰腺腺癌細胞(bao)     人     √

C-33 A      人子宮頸癌細胞     人(ren)     √

C643         人(ren)甲(jia)狀腺(xian)癌(ai)細胞     人(ren)     √

C8166       人T淋巴(ba)細胞(bao)白血病細胞(bao)    人     √

Ca Ski        人宮頸癌腸轉移(yi)細胞/人宮頸癌上皮細胞   人     √

Caco2       人結直腸腺癌細胞        人     √

CAKI-1      人(ren)腎(shen)透明細胞癌皮膚轉(zhuan)移(yi)細胞     人     √

cal-27       人舌鱗癌(ai)細(xi)胞         人(ren)     √

CALU-1     人(ren)肺(fei)癌細胞     人     √

CALU-3     人肺(fei)腺癌細(xi)胞(胸水)       人     √

CCD-1095SK     人乳腺浸潤性導管癌(ai)旁皮膚(fu)細(xi)胞         人(ren)     √

CCRF-CEM        人急性淋巴細胞白血病T淋巴細胞     人(ren)     √

CEM/C1   人急(ji)性淋巴細胞(bao)白血病細胞(bao)         人     √

CFPAC-1   人胰腺癌細胞         人     √

CNE1        人鼻咽癌(ai)細胞        人     √

CNE2        人(ren)鼻咽癌細胞(bao)        人     √

COLO 205         人(ren)結腸(chang)癌(ai)細胞         人(ren)     √

COLO 320DM  人結直腸腺癌細胞         人     √

CW-2        人結腸腺癌細胞     人     √

DAOY        Daoy細胞，具體不清楚(chu)        人     √

DAUDI      人Burkitt's淋巴(ba)瘤細胞 人(ren)     √

DETROIT 562   人咽(yan)頭(tou)癌胸水轉移(yi)細胞(bao)         人(ren)     √

DLD-1       人(ren)結直腸腺(xian)癌上皮細胞         人     √

DU 145     人(ren)前列腺癌細胞     人     √

EA.HY926         人臍靜脈細胞(bao)融合細胞(bao)         人     √

ECV304    人臍靜(jing)脈(mo)內皮細胞         人     √

ES-2 人卵巢透(tou)明細(xi)胞癌細(xi)胞        人     √

FADU        人咽鱗癌細胞(bao)         人(ren)     √

FTC-133   人(ren)濾泡(pao)性甲狀腺癌(ai)細胞         人     √

GBC-SD    人膽囊(nang)癌細胞         人     √

GCIY                   人     √

H1299      人非小細(xi)(xi)胞(bao)肺(fei)癌細(xi)(xi)胞(bao)     人     √

H1395      人肺腺癌(ai)細胞         人     √

H1650      人非小(xiao)細胞肺癌(ai)細胞     人     √

H1703      人肺鱗(lin)癌細胞         人     √

H1755      人(ren)肺癌細胞   人     √

H1944      人非小細(xi)胞肺癌(ai)細(xi)胞     人     √

H1975      人肺腺癌細(xi)胞         人     √

H2170      人肺鱗癌細胞         人(ren)     √

H226         人肺鱗癌細胞         人(ren)     √

H292         人肺癌細胞(淋巴結轉移)       人     √

H358         人非小(xiao)細(xi)胞肺癌細(xi)胞   人(ren)     √

H460         人大細(xi)胞肺癌細(xi)胞        人     √

H520         人肺鱗癌細胞        人(ren)     √

H596         人肺腺鱗癌細胞     人(ren)     √

H661         人大(da)細胞肺癌細胞         人     √

H716         人結(jie)直腸(chang)腺癌(ai)細胞(bao)         人     √

H838         人非小細胞肺癌細胞     人(ren)     √

Hacat       人永(yong)生化角質(zhi)形成(cheng)細胞         人     √

HBE 人支氣管上皮(pi)樣細胞(bao)     人     √

HBL-100   人整合SV40基(ji)因的乳腺(xian)上皮細胞       人     √

HCC1937 人乳腺(xian)癌細胞         人     √

HCC827   人非小細胞肺癌(ai)細胞     人     √

HCCC-9810      人膽管(guan)細胞(bao)型肝癌細胞(bao)         人     √

HCCLM3  人高轉移肝(gan)癌細胞         人     √

HCT-116  人結腸癌細(xi)胞         人     √

HCT-8       人回盲腸癌細(xi)胞     人     √

HEC-1-A   人子宮內膜腺癌細胞     人     √

HEC-1-B   人子宮(gong)內膜腺(xian)癌細(xi)胞     人     √

HEK-293   人胚腎(shen)細胞     人     √

HEL  人紅(hong)白細(xi)胞(bao)白血病細(xi)胞(bao)       人(ren)     √

HELA229  人宮頸癌復(fu)蘇細胞(bao)         人(ren)     √

Hela-J                人     √

Hep G2     人(ren)肝癌細胞     人     √

HEP-2       人喉表皮(pi)樣癌細胞        人     √

HEP3B      人肝癌細(xi)胞     人(ren)     √

HEY          人卵(luan)巢癌細(xi)胞         人     √

HFF  人包皮成纖維細胞        人     √

HFL1         人胚肺成纖維細胞         人     √

HFOB1.19         人(ren)SV40轉染成骨細胞           人(ren)     √

HGC-27    人(ren)胃癌細胞(未分化)     人(ren)     √

HK-2          人(ren)腎(shen)皮質(zhi)近曲(qu)小管上皮細胞         人(ren)     √

HL-60        人原髓細胞白血病細胞        人     √

HMEC-1   人微血(xue)管(guan)內皮(pi)細(xi)胞        人     √

HO-8910  人卵巢癌細胞         人     √

HPN1                人     √

HS683       細胞人腦(nao)視神經膠質瘤細胞        人     √

Hs888Lu  人肺成纖(xian)維細胞(bao)     人     √

HT-1080   人纖維肉瘤(liu)細胞     人     √

HT-29       人結腸癌細胞        人     √

HT-3                   人(ren)     √

HTR8        人(ren)滋養(yang)細胞     人     √

HUCCT1   膽管上皮癌(ai)細胞          人     √

HuH-6       人肝母細胞(bao)瘤細胞(bao)     人     √

HUH-7      人肝(gan)癌細胞     人(ren)     √

HUT78      人T淋巴細胞(bao)白血病細胞(bao)     人     √

HUVEC-C 人(ren)臍靜脈內皮細胞         人     √

ISK             人     √

JAR            人     √

JEG-3                 人     √

JEKO-1               人     √

Jurkat，Clone E6-1          人     √

K-562                 人     √

KATO III             人(ren)     √

KLE            人(ren)     √

KTC-1                 人     √

KU812                人     √

KYSE-150           人     √

LI-7            人     √

LNcap clone FGC               人     √

L-O2          人     √

LOVO                 人     √

LS 174T              人     √

MCF10A            人     √

MCF-7                人     √

MDA-MB-231           人     √

MDA-MB-231(DMEM)              人     √

MDA-MB-231(L-15)          人(ren)     √

MDA-MB-436           人(ren)     √

MDA-MB-468           人(ren)     √

MG-63               人     √

MGC-803          人     √

MIA PaCa-2               人     √

MM.1S              人     √

MNNG/HOS Cl #5              人     √

MRC-5               人(ren)     √

MV4-11             人     √

N87           人     √

NCI-H1299                 人     √

NCI-H1563                 人     √

NCI-H2452                 人     √

NCI-H647                   人(ren)     √

NK-92                 人     √

NTHY-ORI-31            人     √

OCM1A             人(ren)     √

OS-RC-2             人     √

OVCAR-3           人     √

PANC-1              人(ren)     √

PC-3          人(ren)     √

PC-3M               人     √

PC-9          人(ren)     √

PLC/PRF/5                  人     √

Raji            人(ren)     √

RBE           人     √

RD             人(ren)     √

RKO           人(ren)     √

RL95-2               人     √

RT4           人(ren)     √

RWPE-1             人     √

SAOS-2               人(ren)     √

SH-SY5Y             人     √

SiHa          人     √

SJCRH30           人     √

SK-BR-3             人     √

SK-HEP-1           人     √

SK-MES-1          人     √

SK-N-BE(2)                 人     √

SK-NEP-1           人     √

SK-N-SH             人(ren)     √

SK-OV-3            人     √

SPC-A-1             人     √

SU-DHL-6          人     √

SV-HUC-1                   人(ren)     √

SW 1990            人(ren)     √

SW1353                      √

SW480               人     √

SW579               人     √

SW620               人     √

SW-620              人     √

SW839               人(ren)     √

SW982               人     √

T/G HA-VSMC           人     √

T-24          人     √

T47D                  人(ren)     √

T82            人     √

T84            人(ren)     √

TCA-8113                   人     √

TE 353.Sk                  人     √

TE-1          人     √

THP-1                 人     √

TMK1                 人     √

TPC-1                 人(ren)     √

TT              人     √

TTA1                   人     √

U-118MG                   人     √

U-2 OS               人     √

U251                  人(ren)     √

U87                   人     √

U-87MG            人     √

U-937                 人     √

UM-UC-3          人(ren)     √

VCAP                  人     √

WERI-RB-1                 人(ren)     √

WI-38                 人     √

WISH                  人     √

WPMY-1                     √

ZR-75-1             人     √

ZR-75-30           人     √