H1299，人非小細胞肺癌細胞  消化要有個度

產品代號：H1299

中文名稱：人非小細(xi)胞肺(fei)癌細(xi)胞

種屬：人

是否(fou)鑒(jian)定：已鑒(jian)定

庫存(cun)狀態：現(xian)貨(huo)

慧穎(ying)生(sheng)物提供2000種類(lei)細胞(bao)株細胞(bao)系，400多(duo)株已鑒定細胞(bao)，涉及種屬(shu)：人，大鼠(shu)，小鼠(shu)，兔子，魚，牛，倉鼠(shu)等，我們(men)提供好的產品，好的服務，好的技術(shu)，復蘇周期(qi)短，*，細胞(bao)狀態(tai)良好，飽(bao)滿，有光澤，無支(zhi)原體。

H1299，人非小細胞肺癌細胞  消化要有個度(du)

細(xi)胞(bao)(bao)培養(yang)(yang)，尤(you)其是細(xi)胞(bao)(bao)系的培養(yang)(yang)，就細(xi)胞(bao)(bao)消化而言，多做、善于總結，就可(ke)以把(ba)細(xi)胞(bao)(bao)養(yang)(yang)的越(yue)來越(yue)好

絕大(da)部分細(xi)胞消化(hua)只(zhi)要用胰(yi)酶潤洗(xi)一遍即可：

吸(xi)(xi)去(qu)(qu)胰酶(mei)后，殘留的那些(xie)無法計算體積(ji)的附著在(zai)細(xi)胞表面的微量胰酶(mei)在(zai)37度(du)一般不到(dao)2min足夠(gou)消(xiao)化細(xi)胞（絕大部分1min不到(dao)）。對(dui)于這些(xie)細(xi)胞原則上不要用胰酶(mei)孵育(yu)細(xi)胞，連續這樣傳代(dai)，對(dui)細(xi)胞傷害很(hen)大。簡單的程序是PBS潤洗吸(xi)(xi)去(qu)(qu)，胰酶(mei)潤洗吸(xi)(xi)去(qu)(qu)，然后37度(du)消(xiao)化。

什么算(suan)是(shi)消(xiao)化好了呢？

不需要把細胞全部消化成間隔分布很離散的單個(ge)圓形才算消化好了，一般你肉(rou)眼觀察(cha)貼壁細胞層(ceng)，只要能移動(dong)了，多半呈沙壯移動(dong)，其實(shi)已經(jing)可(ke)以了。

一(yi)般能移(yi)動了，說明細(xi)胞(bao)與培養(yang)基質材料的(de)(de)附(fu)著(zhu)(zhu)已經(jing)消失(shi)了，細(xi)胞(bao)之間的(de)(de)附(fu)著(zhu)(zhu)也已經(jing)消失(shi)了，細(xi)胞(bao)已經(jing)獨立分(fen)布(bu)了（雖然沒有呈現很廣的(de)(de)離(li)散分(fen)布(bu)）。這個時候應該(gai)停止消化，不要等到(dao)看到(dao)鏡下所(suo)有細(xi)胞(bao)都分(fen)離(li)得(de)非常好，間隙很大，才停止。

細(xi)胞(bao)(bao)就是(shi)*成單(dan)(dan)個(ge)細(xi)胞(bao)(bao)懸液，之后在貼(tie)壁(bi)的(de)過程中(zhong)仍(reng)(reng)然(ran)會聚(ju)集，這(zhe)個(ge)是(shi)貼(tie)壁(bi)培養(yang)的(de)細(xi)胞(bao)(bao)，尤(you)其(qi)是(shi)腫瘤(liu)細(xi)胞(bao)(bao)的(de)一(yi)(yi)個(ge)特性，你可以嘗試，準備100%的(de)單(dan)(dan)個(ge)細(xi)胞(bao)(bao)懸液，貼(tie)壁(bi)后觀(guan)察細(xi)胞(bao)(bao)，仍(reng)(reng)然(ran)是(shi)幾個(ge)幾個(ge)細(xi)胞(bao)(bao)聚(ju)集在一(yi)(yi)起。

一些懸浮(fu)培養細(xi)胞(bao)也是(shi)如(ru)此(ci)，容易聚(ju)集，不(bu)要過幾個小時(shi)就拿出來(lai)吹打成(cheng)(cheng)單(dan)細(xi)胞(bao)懸液。細(xi)胞(bao)只要能從基質上脫離下來(lai)，即使是(shi)成(cheng)(cheng)片(pian)的(de)（比如(ru)Calu-3細(xi)胞(bao)），吹打不(bu)超過20次（一般10次即可(ke)），成(cheng)(cheng)小規模聚(ju)集（10個細(xi)胞(bao)左右）是(shi)正常的(de)，不(bu)要再去延長消化時(shi)間(jian)，等待(dai)單(dan)細(xi)胞(bao)懸液出現。

比(bi)較難消化的細胞(bao)：

潤(run)洗方法5min還(huan)不能消(xiao)(xiao)化(hua)(hua)(hua)(hua)，以結腸癌細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)為例，比如HCT15、LS411和KM12細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)，胰酶(mei)消(xiao)(xiao)化(hua)(hua)(hua)(hua)，一般(ban)10 cm 培養(yang)皿，一次多加入300ul-500ul就足夠了。即(ji)使這樣難消(xiao)(xiao)化(hua)(hua)(hua)(hua)的細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)，一般(ban)不超過5min，即(ji)可見(jian)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)成(cheng)片移動，就應該停止消(xiao)(xiao)化(hua)(hua)(hua)(hua)。一些正常細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)也會有難消(xiao)(xiao)化(hua)(hua)(hua)(hua)的時候，比如tsDC細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)，用胰酶(mei)孵育，3min左右即(ji)可看到成(cheng)片沙狀移動。

常規的細胞實(shi)驗，受消(xiao)化影(ying)響不是很(hen)大：

如果(guo)不(bu)用胰(yi)酶去孵育(yu)而使用潤洗(xi)(xi)的方法(fa)消(xiao)化(hua)的話（難消(xiao)化(hua)細(xi)胞(bao)例外）。但(dan)少數(shu)實驗，比如病毒(du)包裝，對細(xi)胞(bao)代(dai)數(shu)，對細(xi)胞(bao)狀態要求*。這(zhe)個(ge)時候(hou)，胰(yi)酶消(xiao)化(hua)，就(jiu)(jiu)是潤洗(xi)(xi)，都會對細(xi)胞(bao)包裝病毒(du)的能力有影響，傳代(dai)次數(shu)一(yi)多(duo)，細(xi)胞(bao)包裝能力就(jiu)(jiu)會逐漸下降。這(zhe)個(ge)時候(hou)都不(bu)用胰(yi)酶消(xiao)化(hua)，用一(yi)些(xie)(xie)鹽(yan)溶液（不(bu)是EDTA液）即可。這(zhe)些(xie)(xie)鹽(yan)溶液通過影響細(xi)胞(bao)外基(ji)(ji)質相關酶的活性，來使得細(xi)胞(bao)脫離(li)基(ji)(ji)質附著表(biao)面，但(dan)不(bu)切割任何蛋(dan)白。

EDTA的作用(yong)：

許(xu)多人不用(yong)胰(yi)酶(mei)，只用(yong)EDTA，或者(zhe)用(yong)胰(yi)酶(mei)/EDTA聯合作用(yong)。這(zhe)里(li)要明白(bai)，胰(yi)酶(mei)切割細胞(bao)外基質的(de)一(yi)些負責粘連(lian)和附(fu)著(zhu)的(de)蛋(dan)白(bai)，而EDTA通過螯合Ca離子，作用(yong)于整聯蛋(dan)白(bai)的(de)活(huo)性(xing)，所以EDTA的(de)作用(yong)更(geng)加溫和。有的(de)人在胰(yi)酶(mei)里(li)添加一(yi)些EDTA，或者(zhe)對付特別難(nan)消化(hua)的(de)細胞(bao)，添加多一(yi)些EDTA，就(jiu)是這(zhe)個道理。一(yi)般(ban)不要試圖延長消化(hua)時(shi)間（如(ru)果10min還消化(hua)不*的(de)話），而應(ying)該想其它辦(ban)法(fa)。

PBS洗滌：

消(xiao)(xiao)化(hua)之(zhi)前用PBS洗(xi)滌，是常見的操(cao)作，因(yin)為血清中含(han)(han)有抑制胰(yi)酶的蛋白。對于(yu)一(yi)些難(nan)消(xiao)(xiao)化(hua)細胞，可(ke)以(yi)配制不(bu)含(han)(han)Ca，Mg離子(zi)(zi)的PBS，因(yin)為這些離子(zi)(zi)也會(hui)抑制胰(yi)酶的活性。但對于(yu)絕大部分細胞用胰(yi)酶或(huo)者(zhe)EDTA溶(rong)液潤洗(xi)即可(ke)消(xiao)(xiao)化(hua)，不(bu)需要配制不(bu)含(han)(han)Ca，Mg離子(zi)(zi)的溶(rong)液。

細胞代號         細胞名稱(cheng)         種屬         鑒定結(jie)果

H1299，人非小細胞肺癌(ai)細胞  消化要有(you)個度

編號 中(zhong)文名(ming)稱  是否鑒定

5637         人膀胱(guang)癌(ai)細(xi)胞         人     √

7703         人肝癌細胞     人(ren)     √

143B         人骨(gu)肉瘤細胞         人     √

22RV1      人前(qian)列腺癌細胞     人     √

293FT       人胚(pei)腎細胞     人     √

293T         人胚腎細胞     人     √

435S          人乳腺癌細(xi)胞/人(ren)黑素瘤細胞(bao)        人     √

453  人乳腺癌細(xi)胞         人     √

6T-CEM    人T細胞白血病(bing)細胞     人     √

769-P        人腎細胞腺癌細胞         人     √

786-O       人腎透明細胞(bao)腺癌(ai)細胞(bao)         人     √

95-D          人高轉(zhuan)移肺(fei)癌細胞         人     √

97H  人高轉移性(xing)肝癌細胞(bao)     人     √

A172         人膠質母細胞瘤細胞     人(ren)     √

A2058       人(ren)黑色素(su)瘤(liu)細胞     人(ren)     √

A2780       人(ren)卵巢(chao)癌細(xi)胞         人     √

A375         人(ren)黑色素瘤(liu)細(xi)胞(bao)株         人(ren)     √

A431         人表皮癌細(xi)胞         人     √

A498         人腎(shen)癌細胞(bao)     人     √

A549         人非小(xiao)細(xi)胞肺癌細(xi)         人     √

A-673        人(ren)橫紋肌肉瘤細(xi)胞         人     √

ACHN       人腎細(xi)(xi)胞腺(xian)癌細(xi)(xi)胞         人     √

AGS  人胃腺(xian)癌(ai)細胞(bao)         人     √

AN3CA     人(ren)子宮內膜腺癌(ai)(轉移)細胞  人     √

ARH-77    人漿(jiang)細胞白血病     人     √

ARO 沒有，找不到信(xin)息(xi)         人     √

ARPE-19   人視(shi)網膜上(shang)皮(pi)細胞(bao)         人     √

B-CPAP     人甲狀腺癌細胞(bao)     人(ren)     √

BEAS-2b   人(ren)正(zheng)常(chang)肺上皮(pi)細(xi)胞         人(ren)     √

BEWO       人絨毛膜(mo)腫瘤細胞         人     √

BGC-823  人胃腺癌(ai)細胞(bao)(低分化)          人(ren)     √

BT-474     人乳腺(xian)導管癌細胞         人     √

BT-549     人(ren)乳腺管癌(ai)細胞     人     √

BXPC-3     人原位胰腺腺癌細胞     人     √

C-33 A      人子宮頸癌細胞     人(ren)     √

C643         人甲狀腺癌細胞     人     √

C8166       人T淋巴(ba)細胞白血病細胞    人     √

Ca Ski        人(ren)宮(gong)頸癌腸轉移細胞/人宮(gong)頸癌(ai)上皮細(xi)胞(bao)   人(ren)     √

Caco2       人(ren)結直腸腺癌細(xi)胞        人     √

CAKI-1      人(ren)腎(shen)透明細胞癌皮膚(fu)轉(zhuan)移細胞     人     √

cal-27       人舌鱗(lin)癌細胞         人(ren)     √

CALU-1     人肺(fei)癌細胞     人     √

CALU-3     人肺腺癌(ai)細(xi)胞(胸水(shui))       人     √

CCD-1095SK     人(ren)乳(ru)腺(xian)浸(jin)潤性(xing)導管癌旁皮膚(fu)細胞         人     √

CCRF-CEM        人(ren)急性淋巴細(xi)胞白血病(bing)T淋巴細(xi)胞     人     √

CEM/C1   人急性淋巴細胞(bao)白血(xue)病細胞(bao)         人(ren)     √

CFPAC-1   人胰腺(xian)癌(ai)細胞         人(ren)     √

CNE1        人鼻咽癌細胞        人     √

CNE2        人(ren)鼻(bi)咽癌細胞        人     √

COLO 205         人結腸癌細(xi)胞         人     √

COLO 320DM  人結(jie)直腸腺癌細胞         人     √

CW-2        人結(jie)腸腺癌(ai)細胞(bao)     人     √

DAOY        Daoy細胞，具體不清楚(chu)        人     √

DAUDI      人Burkitt's淋(lin)巴瘤細胞 人     √

DETROIT 562   人咽頭(tou)癌胸水轉移細胞(bao)         人(ren)     √

DLD-1       人結直(zhi)腸腺癌上皮細胞         人     √

DU 145     人前列腺癌細胞     人(ren)     √

EA.HY926         人臍靜脈(mo)細胞融合細胞         人     √

ECV304    人臍靜(jing)脈內皮細胞         人     √

ES-2 人卵(luan)巢透明細(xi)(xi)胞癌細(xi)(xi)胞        人     √

FADU        人咽鱗癌(ai)細胞         人     √

FTC-133   人濾泡性甲(jia)狀腺癌細胞         人     √

GBC-SD    人(ren)膽(dan)囊癌細胞         人     √

GCIY                   人     √

H1299      人非(fei)小(xiao)細(xi)胞肺癌(ai)細(xi)胞     人     √

H1395      人(ren)肺(fei)腺(xian)癌細(xi)胞(bao)         人     √

H1650      人非(fei)小細胞肺癌細胞     人     √

H1703      人肺鱗癌細(xi)胞         人     √

H1755      人(ren)肺癌細胞   人     √

H1944      人非小(xiao)細胞肺(fei)癌細胞     人(ren)     √

H1975      人肺腺癌細胞         人     √

H2170      人肺(fei)鱗癌細胞         人     √

H226         人肺鱗癌細胞         人(ren)     √

H292         人肺(fei)癌細(xi)胞(淋巴結轉(zhuan)移)       人     √

H358         人非小細胞肺癌細胞   人     √

H460         人大細胞(bao)肺癌細胞(bao)        人     √

H520         人肺鱗癌細胞        人     √

H596         人肺腺鱗癌(ai)細胞     人     √

H661         人大(da)細(xi)胞(bao)肺癌(ai)細(xi)胞(bao)         人     √

H716         人(ren)結直腸腺癌細胞         人     √

H838         人非小細胞(bao)肺癌細胞(bao)     人     √

Hacat       人永生化角質(zhi)形成(cheng)細胞(bao)         人     √

HBE 人支(zhi)氣管上皮(pi)樣細胞     人     √

HBL-100   人整合SV40基因的乳腺上皮細胞(bao)       人     √

HCC1937 人乳腺癌(ai)細(xi)胞         人     √

HCC827   人非(fei)小細胞(bao)肺(fei)癌細胞(bao)     人     √

HCCC-9810      人膽(dan)管細胞型肝癌細胞         人     √

HCCLM3  人高轉(zhuan)移肝癌細胞         人     √

HCT-116  人結腸癌細胞         人     √

HCT-8       人(ren)回盲腸癌細胞     人     √

HEC-1-A   人子宮(gong)內膜(mo)腺(xian)癌細胞     人     √

HEC-1-B   人子宮內膜腺(xian)癌細胞     人     √

HEK-293   人(ren)胚腎細胞     人     √

HEL  人紅(hong)白細胞(bao)白血病細胞(bao)       人     √

HELA229  人宮頸癌(ai)復(fu)蘇細胞         人     √

Hela-J                人     √

Hep G2     人肝癌細(xi)胞     人     √

HEP-2       人(ren)喉表皮(pi)樣癌細胞        人     √

HEP3B      人肝癌細胞     人     √

HEY          人卵(luan)巢癌細胞(bao)         人     √

HFF  人(ren)包皮成纖(xian)維細胞(bao)        人     √

HFL1         人胚肺成纖維細胞         人     √

HFOB1.19         人SV40轉染成骨細胞           人     √

HGC-27    人胃癌細胞(bao)(未分化)     人     √

HK-2          人腎皮(pi)質近曲(qu)小管上皮(pi)細(xi)胞         人(ren)     √

HL-60        人原(yuan)髓細(xi)胞白血病細(xi)胞        人     √

HMEC-1   人微血管內皮(pi)細胞        人     √

HO-8910  人卵巢癌細(xi)胞         人     √

HPN1                人     √

HS683       細胞人腦視(shi)神經膠(jiao)質(zhi)瘤細胞        人     √

Hs888Lu  人肺成纖維細胞     人     √

HT-1080   人纖維肉瘤細胞     人     √

HT-29       人結腸癌(ai)細胞        人     √

HT-3                   人(ren)     √

HTR8        人滋養細胞     人     √

HUCCT1   膽(dan)管(guan)上皮癌細胞          人(ren)     √

HuH-6       人肝(gan)母細胞瘤細胞     人     √

HUH-7      人肝癌細胞(bao)     人     √

HUT78      人T淋巴(ba)細(xi)(xi)胞(bao)白(bai)血病細(xi)(xi)胞(bao)     人     √

HUVEC-C 人(ren)臍靜脈(mo)內皮細胞         人     √

ISK             人     √

JAR            人(ren)     √

JEG-3                 人     √

JEKO-1               人     √

Jurkat，Clone E6-1          人     √

K-562                 人     √

KATO III             人     √

KLE            人     √

KTC-1                 人(ren)     √

KU812                人     √

KYSE-150           人     √

LI-7            人     √

LNcap clone FGC               人     √

L-O2          人     √

LOVO                 人(ren)     √

LS 174T              人     √

MCF10A            人     √

MCF-7                人(ren)     √

MDA-MB-231           人     √

MDA-MB-231(DMEM)              人     √

MDA-MB-231(L-15)          人(ren)     √

MDA-MB-436           人     √

MDA-MB-468           人     √

MG-63               人     √

MGC-803          人     √

MIA PaCa-2               人(ren)     √

MM.1S              人     √

MNNG/HOS Cl #5              人     √

MRC-5               人     √

MV4-11             人     √

N87           人     √

NCI-H1299                 人     √

NCI-H1563                 人     √

NCI-H2452                 人     √

NCI-H647                   人     √

NK-92                 人     √

NTHY-ORI-31            人     √

OCM1A             人     √

OS-RC-2             人(ren)     √

OVCAR-3           人     √

PANC-1              人     √

PC-3          人(ren)     √

PC-3M               人     √

PC-9          人(ren)     √

PLC/PRF/5                  人     √

Raji            人     √

RBE           人(ren)     √

RD             人     √

RKO           人     √

RL95-2               人     √

RT4           人     √

RWPE-1             人     √

SAOS-2               人     √

SH-SY5Y             人     √

SiHa          人(ren)     √

SJCRH30           人(ren)     √

SK-BR-3             人     √

SK-HEP-1           人     √

SK-MES-1          人(ren)     √

SK-N-BE(2)                 人     √

SK-NEP-1           人     √

SK-N-SH             人(ren)     √

SK-OV-3            人(ren)     √

SPC-A-1             人     √

SU-DHL-6          人     √

SV-HUC-1                   人     √

SW 1990            人(ren)     √

SW1353                      √

SW480               人(ren)     √

SW579               人     √

SW620               人     √

SW-620              人(ren)     √

SW839               人     √

SW982               人(ren)     √

T/G HA-VSMC           人     √

T-24          人(ren)     √

T47D                  人     √

T82            人(ren)     √

T84            人     √

TCA-8113                   人     √

TE 353.Sk                  人     √

TE-1          人     √

THP-1                 人     √

TMK1                 人     √

TPC-1                 人     √

TT              人(ren)     √

TTA1                   人     √

U-118MG                   人     √

U-2 OS               人     √

U251                  人     √

U87                   人     √

U-87MG            人     √

U-937                 人(ren)     √

UM-UC-3          人     √

VCAP                  人     √

WERI-RB-1                 人     √

WI-38                 人     √

WISH                  人     √

WPMY-1                     √

ZR-75-1             人     √

ZR-75-30           人(ren)     √