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H1395,人肺腺癌細胞 消化(hua)要(yao)有個度
產品代號:H1395
中文名稱:人肺腺癌(ai)細胞
種屬:人
是否鑒定(ding)(ding):已鑒定(ding)(ding)
庫存狀態:現貨
慧穎生物提供(gong)2000種類細胞(bao)株細胞(bao)系,400多株已(yi)鑒(jian)定細胞(bao),涉及(ji)種屬:人,大鼠(shu),小(xiao)鼠(shu),兔(tu)子(zi),魚,牛,倉鼠(shu)等,我們提供(gong)好的(de)產品(pin),好的(de)服務,好的(de)技術,復蘇周(zhou)期(qi)短,*,細胞(bao)狀態(tai)良好,飽(bao)滿(man),有光澤,無支(zhi)原體。
H1395,人肺腺癌細胞 消化要有個度
細胞培養(yang),尤其是細胞系的培養(yang),就細胞消化而(er)言(yan),多做、善于總(zong)結(jie),就可以(yi)把細胞養(yang)的越來越好
絕大部(bu)分細(xi)胞消(xiao)化只要用(yong)胰酶潤洗一遍即可:
吸(xi)(xi)去胰(yi)酶后(hou),殘(can)留的那些(xie)無法計算體積(ji)的附著在(zai)細胞(bao)表面的微量胰(yi)酶在(zai)37度(du)一般不到2min足夠消化(hua)細胞(bao)(絕大部分1min不到)。對于這(zhe)些(xie)細胞(bao)原則上不要用胰(yi)酶孵育細胞(bao),連(lian)續這(zhe)樣傳代,對細胞(bao)傷害(hai)很大。簡(jian)單的程(cheng)序(xu)是PBS潤(run)洗吸(xi)(xi)去,胰(yi)酶潤(run)洗吸(xi)(xi)去,然后(hou)37度(du)消化(hua)。
什么算是消化(hua)好了呢?
不(bu)需要(yao)把細胞全(quan)部消化(hua)(hua)成間隔分(fen)布(bu)很(hen)離散的(de)單個圓形才算消化(hua)(hua)好(hao)了,一般(ban)你肉(rou)眼觀察貼壁細胞層,只要(yao)能移動(dong)了,多(duo)半(ban)呈沙壯移動(dong),其實已經可以了。
一(yi)般能移動了,說明細胞(bao)(bao)與培養(yang)基質(zhi)材料(liao)的附(fu)(fu)著已(yi)經消(xiao)失了,細胞(bao)(bao)之間的附(fu)(fu)著也已(yi)經消(xiao)失了,細胞(bao)(bao)已(yi)經獨立分(fen)布了(雖然沒有(you)呈現很廣的離散(san)分(fen)布)。這個時候(hou)應該停止(zhi)消(xiao)化(hua),不要等(deng)到看到鏡下所有(you)細胞(bao)(bao)都分(fen)離得非常好,間隙(xi)很大,才停止(zhi)。
細(xi)(xi)(xi)胞(bao)就是(shi)*成單(dan)個(ge)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)懸液(ye),之后在(zai)(zai)貼(tie)(tie)壁的(de)過程中(zhong)仍(reng)然會聚集,這個(ge)是(shi)貼(tie)(tie)壁培養的(de)細(xi)(xi)(xi)胞(bao),尤(you)其(qi)是(shi)腫瘤(liu)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)的(de)一個(ge)特(te)性,你可以嘗試,準(zhun)備100%的(de)單(dan)個(ge)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)懸液(ye),貼(tie)(tie)壁后觀察細(xi)(xi)(xi)胞(bao),仍(reng)然是(shi)幾(ji)個(ge)幾(ji)個(ge)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)聚集在(zai)(zai)一起。
一(yi)些懸(xuan)浮培(pei)養細(xi)胞(bao)也是如此(ci),容(rong)易聚集,不要(yao)(yao)過(guo)幾個小(xiao)時就(jiu)拿(na)出來吹(chui)打成單(dan)細(xi)胞(bao)懸(xuan)液。細(xi)胞(bao)只(zhi)要(yao)(yao)能從基質(zhi)上(shang)脫(tuo)離下來,即使是成片的(de)(比如Calu-3細(xi)胞(bao)),吹(chui)打不超過(guo)20次(一(yi)般10次即可),成小(xiao)規模聚集(10個細(xi)胞(bao)左(zuo)右)是正常的(de),不要(yao)(yao)再(zai)去(qu)延長消化時間,等待單(dan)細(xi)胞(bao)懸(xuan)液出現。
比較難消化的細胞:
潤洗(xi)方法5min還(huan)不能(neng)消(xiao)(xiao)(xiao)化,以(yi)結(jie)腸癌細胞(bao)為(wei)例,比如HCT15、LS411和KM12細胞(bao),胰酶消(xiao)(xiao)(xiao)化,一般10 cm 培養皿(min),一次多加入(ru)300ul-500ul就足夠了。即(ji)(ji)使這樣難(nan)(nan)消(xiao)(xiao)(xiao)化的細胞(bao),一般不超過(guo)5min,即(ji)(ji)可(ke)見細胞(bao)成(cheng)片移(yi)動,就應該停止(zhi)消(xiao)(xiao)(xiao)化。一些正常細胞(bao)也會有難(nan)(nan)消(xiao)(xiao)(xiao)化的時(shi)候,比如tsDC細胞(bao),用胰酶孵(fu)育,3min左右(you)即(ji)(ji)可(ke)看到成(cheng)片沙狀移(yi)動。
常規的細胞(bao)實(shi)驗,受消化(hua)影響不是很大:
如果不用胰(yi)酶(mei)去(qu)孵育(yu)而使用潤洗的(de)(de)(de)方(fang)法消(xiao)化(hua)的(de)(de)(de)話(難消(xiao)化(hua)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)例外(wai))。但少(shao)數實驗,比如病毒包裝,對細(xi)(xi)(xi)胞(bao)代數,對細(xi)(xi)(xi)胞(bao)狀態要求(qiu)*。這個(ge)(ge)時候,胰(yi)酶(mei)消(xiao)化(hua),就是潤洗,都會對細(xi)(xi)(xi)胞(bao)包裝病毒的(de)(de)(de)能力有影(ying)響,傳代次數一(yi)多,細(xi)(xi)(xi)胞(bao)包裝能力就會逐漸下降。這個(ge)(ge)時候都不用胰(yi)酶(mei)消(xiao)化(hua),用一(yi)些(xie)鹽(yan)溶液(ye)(ye)(不是EDTA液(ye)(ye))即可。這些(xie)鹽(yan)溶液(ye)(ye)通(tong)過影(ying)響細(xi)(xi)(xi)胞(bao)外(wai)基(ji)(ji)質(zhi)相(xiang)關酶(mei)的(de)(de)(de)活性,來(lai)使得細(xi)(xi)(xi)胞(bao)脫離基(ji)(ji)質(zhi)附著表面,但不切割任何蛋白。
EDTA的作用:
許(xu)多人不(bu)(bu)用(yong)(yong)胰(yi)(yi)酶(mei)(mei)(mei),只(zhi)用(yong)(yong)EDTA,或者用(yong)(yong)胰(yi)(yi)酶(mei)(mei)(mei)/EDTA聯(lian)合(he)(he)作(zuo)用(yong)(yong)。這里要(yao)明白,胰(yi)(yi)酶(mei)(mei)(mei)切割(ge)細(xi)(xi)胞外(wai)基質的(de)(de)(de)一(yi)些(xie)負責粘連和附著的(de)(de)(de)蛋白,而(er)EDTA通過(guo)螯合(he)(he)Ca離子,作(zuo)用(yong)(yong)于(yu)整聯(lian)蛋白的(de)(de)(de)活性(xing),所(suo)以EDTA的(de)(de)(de)作(zuo)用(yong)(yong)更加溫和。有的(de)(de)(de)人在胰(yi)(yi)酶(mei)(mei)(mei)里添(tian)加一(yi)些(xie)EDTA,或者對付特(te)別難消(xiao)(xiao)化(hua)的(de)(de)(de)細(xi)(xi)胞,添(tian)加多一(yi)些(xie)EDTA,就是這個道理。一(yi)般不(bu)(bu)要(yao)試圖延(yan)長消(xiao)(xiao)化(hua)時間(如果10min還消(xiao)(xiao)化(hua)不(bu)(bu)*的(de)(de)(de)話),而(er)應該想其(qi)它辦法。
PBS洗(xi)滌:
消化(hua)之前(qian)用(yong)PBS洗滌(di),是(shi)常見的(de)操(cao)作(zuo),因為血清中含(han)有抑制(zhi)胰(yi)酶(mei)的(de)蛋白。對(dui)于(yu)一些(xie)難消化(hua)細胞(bao),可以配制(zhi)不(bu)含(han)Ca,Mg離子(zi)的(de)PBS,因為這些(xie)離子(zi)也會抑制(zhi)胰(yi)酶(mei)的(de)活性。但對(dui)于(yu)絕大(da)部分細胞(bao)用(yong)胰(yi)酶(mei)或(huo)者EDTA溶液潤洗即可消化(hua),不(bu)需要(yao)配制(zhi)不(bu)含(han)Ca,Mg離子(zi)的(de)溶液。
細(xi)胞代號 細胞名(ming)稱 種(zhong)屬(shu) 鑒定結果
H1395,人(ren)肺(fei)腺癌細胞 消(xiao)化要有個度
編號 中文名稱(cheng) 是否鑒定
5637 人膀(bang)胱癌細(xi)胞 人 √
7703 人肝癌細(xi)胞 人(ren) √
143B 人骨肉瘤細(xi)胞 人 √
22RV1 人前(qian)列腺(xian)癌細胞 人 √
293FT 人胚腎細(xi)胞 人 √
293T 人胚腎(shen)細胞 人 √
435S 人乳腺癌(ai)細胞/人黑素瘤(liu)細胞 人 √
453 人乳(ru)腺癌(ai)細胞 人 √
6T-CEM 人T細胞(bao)白血病(bing)細胞(bao) 人 √
769-P 人腎細(xi)胞腺癌細(xi)胞 人 √
786-O 人腎(shen)透明細(xi)胞腺(xian)癌細(xi)胞 人 √
95-D 人(ren)高轉移(yi)肺癌細胞 人 √
97H 人高(gao)轉移性肝癌細胞 人(ren) √
A172 人膠質(zhi)母(mu)細胞瘤細胞 人(ren) √
A2058 人(ren)黑色素(su)瘤細胞 人 √
A2780 人卵巢癌細胞 人 √
A375 人黑色素瘤細胞(bao)株(zhu) 人 √
A431 人表皮癌細胞 人 √
A498 人腎癌細胞 人 √
A549 人非小(xiao)細胞肺癌細 人 √
A-673 人橫紋肌肉瘤(liu)細胞 人(ren) √
ACHN 人腎細(xi)(xi)胞(bao)(bao)腺(xian)癌(ai)細(xi)(xi)胞(bao)(bao) 人 √
AGS 人胃腺癌細(xi)胞 人 √
AN3CA 人子宮內膜腺(xian)癌(轉移)細胞 人(ren) √
ARH-77 人漿細胞白血病(bing) 人 √
ARO 沒有(you),找不到信息(xi) 人 √
ARPE-19 人視(shi)網膜上皮細胞(bao) 人(ren) √
B-CPAP 人(ren)甲(jia)狀(zhuang)腺癌細胞 人 √
BEAS-2b 人正常肺上皮(pi)細胞 人 √
BEWO 人絨毛(mao)膜(mo)腫瘤細胞 人 √
BGC-823 人胃腺癌細胞(bao)(低分化) 人 √
BT-474 人乳腺導管癌細(xi)胞 人 √
BT-549 人乳腺管癌細胞 人 √
BXPC-3 人原(yuan)位胰腺腺癌細胞 人 √
C-33 A 人子宮(gong)頸(jing)癌細(xi)胞 人 √
C643 人甲狀腺癌細胞(bao) 人 √
C8166 人(ren)T淋巴細胞白血病細胞 人 √
Ca Ski 人宮頸癌腸轉移細胞(bao)/人(ren)宮頸癌上皮細胞 人 √
Caco2 人結直腸腺(xian)癌細胞(bao) 人 √
CAKI-1 人腎透明(ming)細胞癌皮膚轉移細胞 人 √
cal-27 人舌鱗癌(ai)細胞 人 √
CALU-1 人肺(fei)癌細胞(bao) 人(ren) √
CALU-3 人(ren)肺腺癌細胞(胸水) 人(ren) √
CCD-1095SK 人(ren)乳腺浸潤性導管癌(ai)旁(pang)皮膚(fu)細胞 人 √
CCRF-CEM 人急性淋巴細胞(bao)白血病(bing)T淋巴細胞 人(ren) √
CEM/C1 人急性淋巴細(xi)胞白(bai)血病細(xi)胞 人 √
CFPAC-1 人胰腺癌細胞 人 √
CNE1 人鼻咽癌細胞 人 √
CNE2 人鼻咽癌細胞 人 √
COLO 205 人結腸癌細胞 人 √
COLO 320DM 人結(jie)直腸腺(xian)癌細胞(bao) 人 √
CW-2 人(ren)結腸腺癌細胞(bao) 人 √
DAOY Daoy細胞,具體(ti)不清(qing)楚 人 √
DAUDI 人Burkitt's淋巴瘤細胞 人 √
DETROIT 562 人(ren)咽頭癌胸水轉移細胞(bao) 人 √
DLD-1 人結直腸腺癌(ai)上皮(pi)細胞 人 √
DU 145 人前(qian)列腺癌細胞 人(ren) √
EA.HY926 人臍靜脈細胞(bao)融(rong)合細胞(bao) 人(ren) √
ECV304 人臍靜脈內皮細胞(bao) 人 √
ES-2 人卵巢透(tou)明(ming)細胞癌細胞 人 √
FADU 人咽鱗(lin)癌細胞 人 √
FTC-133 人(ren)濾泡性甲狀(zhuang)腺癌(ai)細胞 人 √
GBC-SD 人(ren)膽囊癌細胞(bao) 人 √
GCIY 人 √
H1299 人非小細胞肺癌細胞 人 √
H1395 人肺(fei)腺癌細胞 人 √
H1650 人非(fei)小細胞肺癌(ai)細胞 人 √
H1703 人肺鱗(lin)癌細胞(bao) 人(ren) √
H1755 人肺癌細胞 人 √
H1944 人非小細胞肺癌細胞 人 √
H1975 人肺(fei)腺(xian)癌細胞 人 √
H2170 人肺鱗癌細(xi)胞 人 √
H226 人肺(fei)鱗癌細胞 人 √
H292 人(ren)肺癌(ai)細胞(淋巴結轉移) 人(ren) √
H358 人(ren)非小(xiao)細胞肺(fei)癌細胞 人 √
H460 人(ren)大細胞(bao)肺(fei)癌細胞(bao) 人 √
H520 人(ren)肺鱗癌細胞 人 √
H596 人肺腺鱗(lin)癌(ai)細胞 人 √
H661 人大細胞肺癌細胞 人 √
H716 人結直腸腺癌細胞 人 √
H838 人非小細(xi)胞肺癌細(xi)胞 人 √
Hacat 人永(yong)生化角質形成(cheng)細胞 人 √
HBE 人(ren)支氣管上皮樣細胞 人 √
HBL-100 人整合SV40基因的乳腺上皮(pi)細胞(bao) 人 √
HCC1937 人乳腺癌細胞(bao) 人 √
HCC827 人非小(xiao)細(xi)胞(bao)肺癌細(xi)胞(bao) 人 √
HCCC-9810 人膽管細(xi)胞型肝癌細(xi)胞 人 √
HCCLM3 人高(gao)轉移肝癌細胞 人 √
HCT-116 人結腸癌細胞 人 √
HCT-8 人回盲腸癌細胞 人 √
HEC-1-A 人子(zi)宮(gong)內膜腺癌細胞 人(ren) √
HEC-1-B 人子宮內(nei)膜(mo)腺癌細胞(bao) 人 √
HEK-293 人(ren)胚腎(shen)細胞 人 √
HEL 人紅白細胞(bao)白血病(bing)細胞(bao) 人(ren) √
HELA229 人(ren)宮頸癌復蘇(su)細胞 人 √
Hela-J 人(ren) √
Hep G2 人肝癌(ai)細胞 人 √
HEP-2 人喉表皮樣癌(ai)細胞 人 √
HEP3B 人肝(gan)癌細胞(bao) 人 √
HEY 人卵巢癌細胞 人 √
HFF 人包皮成(cheng)纖維細胞 人 √
HFL1 人胚(pei)肺(fei)成纖維細胞 人 √
HFOB1.19 人SV40轉染成骨細(xi)胞 人(ren) √
HGC-27 人胃癌(ai)細胞(未分化) 人 √
HK-2 人腎皮(pi)質近曲小管(guan)上皮(pi)細胞 人 √
HL-60 人(ren)原髓細(xi)胞白血(xue)病細(xi)胞 人 √
HMEC-1 人微血管內皮(pi)細胞 人 √
HO-8910 人卵巢癌細胞(bao) 人 √
HPN1 人 √
HS683 細胞人腦視神經膠質瘤細胞 人 √
Hs888Lu 人(ren)肺成纖維細胞 人(ren) √
HT-1080 人纖維(wei)肉(rou)瘤細胞 人 √
HT-29 人(ren)結腸癌(ai)細胞(bao) 人 √
HT-3 人 √
HTR8 人滋(zi)養細胞(bao) 人 √
HUCCT1 膽(dan)管上皮癌(ai)細胞 人(ren) √
HuH-6 人肝母細(xi)胞瘤細(xi)胞 人 √
HUH-7 人(ren)肝癌細胞 人(ren) √
HUT78 人T淋巴細(xi)胞白(bai)血(xue)病細(xi)胞 人(ren) √
HUVEC-C 人(ren)臍靜脈內皮細(xi)胞(bao) 人 √
ISK 人 √
JAR 人 √
JEG-3 人 √
JEKO-1 人 √
Jurkat,Clone E6-1 人(ren) √
K-562 人(ren) √
KATO III 人 √
KLE 人 √
KTC-1 人(ren) √
KU812 人 √
KYSE-150 人 √
LI-7 人 √
LNcap clone FGC 人 √
L-O2 人 √
LOVO 人 √
LS 174T 人 √
MCF10A 人(ren) √
MCF-7 人(ren) √
MDA-MB-231 人 √
MDA-MB-231(DMEM) 人 √
MDA-MB-231(L-15) 人 √
MDA-MB-436 人(ren) √
MDA-MB-468 人 √
MG-63 人(ren) √
MGC-803 人 √
MIA PaCa-2 人 √
MM.1S 人 √
MNNG/HOS Cl #5 人 √
MRC-5 人 √
MV4-11 人 √
N87 人 √
NCI-H1299 人 √
NCI-H1563 人 √
NCI-H2452 人 √
NCI-H647 人 √
NK-92 人 √
NTHY-ORI-31 人 √
OCM1A 人 √
OS-RC-2 人 √
OVCAR-3 人(ren) √
PANC-1 人 √
PC-3 人 √
PC-3M 人 √
PC-9 人 √
PLC/PRF/5 人 √
Raji 人 √
RBE 人 √
RD 人(ren) √
RKO 人 √
RL95-2 人 √
RT4 人(ren) √
RWPE-1 人 √
SAOS-2 人 √
SH-SY5Y 人 √
SiHa 人 √
SJCRH30 人 √
SK-BR-3 人 √
SK-HEP-1 人(ren) √
SK-MES-1 人 √
SK-N-BE(2) 人 √
SK-NEP-1 人 √
SK-N-SH 人 √
SK-OV-3 人 √
SPC-A-1 人 √
SU-DHL-6 人 √
SV-HUC-1 人(ren) √
SW 1990 人(ren) √
SW1353 √
SW480 人 √
SW579 人 √
SW620 人 √
SW-620 人 √
SW839 人 √
SW982 人(ren) √
T/G HA-VSMC 人 √
T-24 人 √
T47D 人 √
T82 人 √
T84 人 √
TCA-8113 人 √
TE 353.Sk 人 √
TE-1 人 √
THP-1 人 √
TMK1 人 √
TPC-1 人(ren) √
TT 人 √
TTA1 人 √
U-118MG 人 √
U-2 OS 人 √
U251 人 √
U87 人 √
U-87MG 人 √
U-937 人 √
UM-UC-3 人 √
VCAP 人 √
WERI-RB-1 人 √
WI-38 人 √
WISH 人 √
WPMY-1 √
ZR-75-1 人(ren) √
ZR-75-30 人 √