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H1395,人肺腺癌細胞 消化要有個度

發布(bu)時(shi)間:2018-06-22瀏覽(lan):1409次

H1395人肺腺癌細胞  消化(hua)要(yao)有個度

產品代號:H1395

中文名稱:人肺腺癌(ai)細胞

種屬:人

是否鑒定(ding)(ding):已鑒定(ding)(ding)

庫存狀態:現貨

 

慧穎生物提供(gong)2000種類細胞(bao)株細胞(bao)系,400多株已(yi)鑒(jian)定細胞(bao),涉及(ji)種屬:人,大鼠(shu),小(xiao)鼠(shu),兔(tu)子(zi),魚,牛,倉鼠(shu)等,我們提供(gong)好的(de)產品(pin),好的(de)服務,好的(de)技術,復蘇周(zhou)期(qi)短,*,細胞(bao)狀態(tai)良好,飽(bao)滿(man),有光澤,無支(zhi)原體。

 

H1395人肺腺癌細胞  消化要有個度

細胞培養(yang),尤其是細胞系的培養(yang),就細胞消化而(er)言(yan),多做、善于總(zong)結(jie),就可以(yi)把細胞養(yang)的越來越好

絕大部(bu)分細(xi)胞消(xiao)化只要用(yong)胰酶潤洗一遍即可:

吸(xi)(xi)去胰(yi)酶后(hou),殘(can)留的那些(xie)無法計算體積(ji)的附著在(zai)細胞(bao)表面的微量胰(yi)酶在(zai)37度(du)一般不到2min足夠消化(hua)細胞(bao)(絕大部分1min不到)。對于這(zhe)些(xie)細胞(bao)原則上不要用胰(yi)酶孵育細胞(bao),連(lian)續這(zhe)樣傳代,對細胞(bao)傷害(hai)很大。簡(jian)單的程(cheng)序(xu)是PBS潤(run)洗吸(xi)(xi)去,胰(yi)酶潤(run)洗吸(xi)(xi)去,然后(hou)37度(du)消化(hua)。

什么算是消化(hua)好了呢?

不(bu)需要(yao)把細胞全(quan)部消化(hua)(hua)成間隔分(fen)布(bu)很(hen)離散的(de)單個圓形才算消化(hua)(hua)好(hao)了,一般(ban)你肉(rou)眼觀察貼壁細胞層,只要(yao)能移動(dong)了,多(duo)半(ban)呈沙壯移動(dong),其實已經可以了。

一(yi)般能移動了,說明細胞(bao)(bao)與培養(yang)基質(zhi)材料(liao)的附(fu)(fu)著已(yi)經消(xiao)失了,細胞(bao)(bao)之間的附(fu)(fu)著也已(yi)經消(xiao)失了,細胞(bao)(bao)已(yi)經獨立分(fen)布了(雖然沒有(you)呈現很廣的離散(san)分(fen)布)。這個時候(hou)應該停止(zhi)消(xiao)化(hua),不要等(deng)到看到鏡下所有(you)細胞(bao)(bao)都分(fen)離得非常好,間隙(xi)很大,才停止(zhi)。

細(xi)(xi)(xi)胞(bao)就是(shi)*成單(dan)個(ge)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)懸液(ye),之后在(zai)(zai)貼(tie)(tie)壁的(de)過程中(zhong)仍(reng)然會聚集,這個(ge)是(shi)貼(tie)(tie)壁培養的(de)細(xi)(xi)(xi)胞(bao),尤(you)其(qi)是(shi)腫瘤(liu)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)的(de)一個(ge)特(te)性,你可以嘗試,準(zhun)備100%的(de)單(dan)個(ge)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)懸液(ye),貼(tie)(tie)壁后觀察細(xi)(xi)(xi)胞(bao),仍(reng)然是(shi)幾(ji)個(ge)幾(ji)個(ge)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)聚集在(zai)(zai)一起。

一(yi)些懸(xuan)浮培(pei)養細(xi)胞(bao)也是如此(ci),容(rong)易聚集,不要(yao)(yao)過(guo)幾個小(xiao)時就(jiu)拿(na)出來吹(chui)打成單(dan)細(xi)胞(bao)懸(xuan)液。細(xi)胞(bao)只(zhi)要(yao)(yao)能從基質(zhi)上(shang)脫(tuo)離下來,即使是成片的(de)(比如Calu-3細(xi)胞(bao)),吹(chui)打不超過(guo)20次(一(yi)般10次即可),成小(xiao)規模聚集(10個細(xi)胞(bao)左(zuo)右)是正常的(de),不要(yao)(yao)再(zai)去(qu)延長消化時間,等待單(dan)細(xi)胞(bao)懸(xuan)液出現。

比較難消化的細胞:

潤洗(xi)方法5min還(huan)不能(neng)消(xiao)(xiao)(xiao)化,以(yi)結(jie)腸癌細胞(bao)為(wei)例,比如HCT15、LS411和KM12細胞(bao),胰酶消(xiao)(xiao)(xiao)化,一般10 cm 培養皿(min),一次多加入(ru)300ul-500ul就足夠了。即(ji)(ji)使這樣難(nan)(nan)消(xiao)(xiao)(xiao)化的細胞(bao),一般不超過(guo)5min,即(ji)(ji)可(ke)見細胞(bao)成(cheng)片移(yi)動,就應該停止(zhi)消(xiao)(xiao)(xiao)化。一些正常細胞(bao)也會有難(nan)(nan)消(xiao)(xiao)(xiao)化的時(shi)候,比如tsDC細胞(bao),用胰酶孵(fu)育,3min左右(you)即(ji)(ji)可(ke)看到成(cheng)片沙狀移(yi)動。

 

常規的細胞(bao)實(shi)驗,受消化(hua)影響不是很大:

如果不用胰(yi)酶(mei)去(qu)孵育(yu)而使用潤洗的(de)(de)(de)方(fang)法消(xiao)化(hua)的(de)(de)(de)話(難消(xiao)化(hua)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)例外(wai))。但少(shao)數實驗,比如病毒包裝,對細(xi)(xi)(xi)胞(bao)代數,對細(xi)(xi)(xi)胞(bao)狀態要求(qiu)*。這個(ge)(ge)時候,胰(yi)酶(mei)消(xiao)化(hua),就是潤洗,都會對細(xi)(xi)(xi)胞(bao)包裝病毒的(de)(de)(de)能力有影(ying)響,傳代次數一(yi)多,細(xi)(xi)(xi)胞(bao)包裝能力就會逐漸下降。這個(ge)(ge)時候都不用胰(yi)酶(mei)消(xiao)化(hua),用一(yi)些(xie)鹽(yan)溶液(ye)(ye)(不是EDTA液(ye)(ye))即可。這些(xie)鹽(yan)溶液(ye)(ye)通(tong)過影(ying)響細(xi)(xi)(xi)胞(bao)外(wai)基(ji)(ji)質(zhi)相(xiang)關酶(mei)的(de)(de)(de)活性,來(lai)使得細(xi)(xi)(xi)胞(bao)脫離基(ji)(ji)質(zhi)附著表面,但不切割任何蛋白。

 

EDTA的作用:

許(xu)多人不(bu)(bu)用(yong)(yong)胰(yi)(yi)酶(mei)(mei)(mei),只(zhi)用(yong)(yong)EDTA,或者用(yong)(yong)胰(yi)(yi)酶(mei)(mei)(mei)/EDTA聯(lian)合(he)(he)作(zuo)用(yong)(yong)。這里要(yao)明白,胰(yi)(yi)酶(mei)(mei)(mei)切割(ge)細(xi)(xi)胞外(wai)基質的(de)(de)(de)一(yi)些(xie)負責粘連和附著的(de)(de)(de)蛋白,而(er)EDTA通過(guo)螯合(he)(he)Ca離子,作(zuo)用(yong)(yong)于(yu)整聯(lian)蛋白的(de)(de)(de)活性(xing),所(suo)以EDTA的(de)(de)(de)作(zuo)用(yong)(yong)更加溫和。有的(de)(de)(de)人在胰(yi)(yi)酶(mei)(mei)(mei)里添(tian)加一(yi)些(xie)EDTA,或者對付特(te)別難消(xiao)(xiao)化(hua)的(de)(de)(de)細(xi)(xi)胞,添(tian)加多一(yi)些(xie)EDTA,就是這個道理。一(yi)般不(bu)(bu)要(yao)試圖延(yan)長消(xiao)(xiao)化(hua)時間(如果10min還消(xiao)(xiao)化(hua)不(bu)(bu)*的(de)(de)(de)話),而(er)應該想其(qi)它辦法。

 

PBS洗(xi)滌:

消化(hua)之前(qian)用(yong)PBS洗滌(di),是(shi)常見的(de)操(cao)作(zuo),因為血清中含(han)有抑制(zhi)胰(yi)酶(mei)的(de)蛋白。對(dui)于(yu)一些(xie)難消化(hua)細胞(bao),可以配制(zhi)不(bu)含(han)Ca,Mg離子(zi)的(de)PBS,因為這些(xie)離子(zi)也會抑制(zhi)胰(yi)酶(mei)的(de)活性。但對(dui)于(yu)絕大(da)部分細胞(bao)用(yong)胰(yi)酶(mei)或(huo)者EDTA溶液潤洗即可消化(hua),不(bu)需要(yao)配制(zhi)不(bu)含(han)Ca,Mg離子(zi)的(de)溶液。

細(xi)胞代號         細胞名(ming)稱         種(zhong)屬(shu)         鑒定結果

H1395人(ren)肺(fei)腺癌細胞  消(xiao)化要有個度

編號 中文名稱(cheng)  是否鑒定

5637         人膀(bang)胱癌細(xi)胞             

7703         人肝癌細(xi)胞     人(ren)    

143B         人骨肉瘤細(xi)胞             

22RV1      人前(qian)列腺(xian)癌細胞         

293FT       人胚腎細(xi)胞         

293T         人胚腎(shen)細胞         

435S          人乳腺癌(ai)細胞/人黑素瘤(liu)細胞            

453  人乳(ru)腺癌(ai)細胞             

6T-CEM    T細胞(bao)白血病(bing)細胞(bao)         

769-P        人腎細(xi)胞腺癌細(xi)胞             

786-O       人腎(shen)透明細(xi)胞腺(xian)癌細(xi)胞             

95-D          人(ren)高轉移(yi)肺癌細胞             

97H  人高(gao)轉移性肝癌細胞     人(ren)    

A172         人膠質(zhi)母(mu)細胞瘤細胞     人(ren)    

A2058       人(ren)黑色素(su)瘤細胞         

A2780       人卵巢癌細胞             

A375         人黑色素瘤細胞(bao)株(zhu)             

A431         人表皮癌細胞             

A498         人腎癌細胞         

A549         人非小(xiao)細胞肺癌細             

A-673        人橫紋肌肉瘤(liu)細胞         人(ren)    

ACHN       人腎細(xi)(xi)胞(bao)(bao)腺(xian)癌(ai)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)             

AGS  人胃腺癌細(xi)胞             

AN3CA     人子宮內膜腺(xian)癌(轉移)細胞  人(ren)    

ARH-77    人漿細胞白血病(bing)         

ARO 沒有(you),找不到信息(xi)             

ARPE-19   人視(shi)網膜上皮細胞(bao)         人(ren)    

B-CPAP     人(ren)甲(jia)狀(zhuang)腺癌細胞         

BEAS-2b   人正常肺上皮(pi)細胞             

BEWO       人絨毛(mao)膜(mo)腫瘤細胞             

BGC-823  人胃腺癌細胞(bao)(低分化)              

BT-474     人乳腺導管癌細(xi)胞             

BT-549     人乳腺管癌細胞         

BXPC-3     人原(yuan)位胰腺腺癌細胞         

C-33 A      人子宮(gong)頸(jing)癌細(xi)胞         

C643         人甲狀腺癌細胞(bao)         

C8166       人(ren)T淋巴細胞白血病細胞        

Ca Ski        人宮頸癌腸轉移細胞(bao)/人(ren)宮頸癌上皮細胞       

Caco2       人結直腸腺(xian)癌細胞(bao)            

CAKI-1      人腎透明(ming)細胞癌皮膚轉移細胞         

cal-27       人舌鱗癌(ai)細胞             

CALU-1     人肺(fei)癌細胞(bao)     人(ren)    

CALU-3     人(ren)肺腺癌細胞(胸水)       人(ren)    

CCD-1095SK     人(ren)乳腺浸潤性導管癌(ai)旁(pang)皮膚(fu)細胞             

CCRF-CEM        人急性淋巴細胞(bao)白血病(bing)T淋巴細胞     人(ren)    

CEM/C1   人急性淋巴細(xi)胞白(bai)血病細(xi)胞             

CFPAC-1   人胰腺癌細胞             

CNE1        人鼻咽癌細胞            

CNE2        人鼻咽癌細胞            

COLO 205         人結腸癌細胞             

COLO 320DM  人結(jie)直腸腺(xian)癌細胞(bao)             

CW-2        人(ren)結腸腺癌細胞(bao)         

DAOY        Daoy細胞,具體(ti)不清(qing)楚            

DAUDI      Burkitt's淋巴瘤細胞     

DETROIT 562   人(ren)咽頭癌胸水轉移細胞(bao)             

DLD-1       人結直腸腺癌(ai)上皮(pi)細胞             

DU 145     人前(qian)列腺癌細胞     人(ren)    

EA.HY926         人臍靜脈細胞(bao)融(rong)合細胞(bao)         人(ren)    

ECV304    人臍靜脈內皮細胞(bao)             

ES-2 人卵巢透(tou)明(ming)細胞癌細胞            

FADU        人咽鱗(lin)癌細胞             

FTC-133   人(ren)濾泡性甲狀(zhuang)腺癌(ai)細胞             

GBC-SD    人(ren)膽囊癌細胞(bao)             

GCIY                       

H1299      人非小細胞肺癌細胞         

H1395      人肺(fei)腺癌細胞             

H1650      人非(fei)小細胞肺癌(ai)細胞         

H1703      人肺鱗(lin)癌細胞(bao)         人(ren)    

H1755      人肺癌細胞       

H1944      人非小細胞肺癌細胞         

H1975      人肺(fei)腺(xian)癌細胞             

H2170      人肺鱗癌細(xi)胞             

H226         人肺(fei)鱗癌細胞             

H292         人(ren)肺癌(ai)細胞(淋巴結轉移)       人(ren)    

H358         人(ren)非小(xiao)細胞肺(fei)癌細胞       

H460         人(ren)大細胞(bao)肺(fei)癌細胞(bao)            

H520         人(ren)肺鱗癌細胞            

H596         人肺腺鱗(lin)癌(ai)細胞         

H661         人大細胞肺癌細胞             

H716         人結直腸腺癌細胞             

H838         人非小細(xi)胞肺癌細(xi)胞         

Hacat       人永(yong)生化角質形成(cheng)細胞             

HBE 人(ren)支氣管上皮樣細胞         

HBL-100   人整合SV40基因的乳腺上皮(pi)細胞(bao)           

HCC1937 人乳腺癌細胞(bao)             

HCC827   人非小(xiao)細(xi)胞(bao)肺癌細(xi)胞(bao)         

HCCC-9810      人膽管細(xi)胞型肝癌細(xi)胞             

HCCLM3  人高(gao)轉移肝癌細胞             

HCT-116  人結腸癌細胞             

HCT-8       人回盲腸癌細胞         

HEC-1-A   人子(zi)宮(gong)內膜腺癌細胞     人(ren)    

HEC-1-B   人子宮內(nei)膜(mo)腺癌細胞(bao)         

HEK-293   人(ren)胚腎(shen)細胞         

HEL  人紅白細胞(bao)白血病(bing)細胞(bao)       人(ren)    

HELA229  人(ren)宮頸癌復蘇(su)細胞             

Hela-J                人(ren)    

Hep G2     人肝癌(ai)細胞         

HEP-2       人喉表皮樣癌(ai)細胞            

HEP3B      人肝(gan)癌細胞(bao)         

HEY          人卵巢癌細胞             

HFF  人包皮成(cheng)纖維細胞            

HFL1         人胚(pei)肺(fei)成纖維細胞             

HFOB1.19         SV40轉染成骨細(xi)胞           人(ren)    

HGC-27    人胃癌(ai)細胞(未分化)         

HK-2          人腎皮(pi)質近曲小管(guan)上皮(pi)細胞             

HL-60        人(ren)原髓細(xi)胞白血(xue)病細(xi)胞            

HMEC-1   人微血管內皮(pi)細胞            

HO-8910  人卵巢癌細胞(bao)             

HPN1                    

HS683       細胞人腦視神經膠質瘤細胞            

Hs888Lu  人(ren)肺成纖維細胞     人(ren)    

HT-1080   人纖維(wei)肉(rou)瘤細胞         

HT-29       人(ren)結腸癌(ai)細胞(bao)            

HT-3                       

HTR8        人滋(zi)養細胞(bao)         

HUCCT1   膽(dan)管上皮癌(ai)細胞          人(ren)    

HuH-6       人肝母細(xi)胞瘤細(xi)胞         

HUH-7      人(ren)肝癌細胞     人(ren)    

HUT78      T淋巴細(xi)胞白(bai)血(xue)病細(xi)胞     人(ren)    

HUVEC-C 人(ren)臍靜脈內皮細(xi)胞(bao)             

ISK                 

JAR                

JEG-3                     

JEKO-1                   

JurkatClone E6-1          人(ren)    

K-562                 人(ren)    

KATO III                 

KLE                

KTC-1                 人(ren)    

KU812                    

KYSE-150               

LI-7                

LNcap clone FGC                   

L-O2              

LOVO                     

LS 174T                  

MCF10A            人(ren)    

MCF-7                人(ren)    

MDA-MB-231               

MDA-MB-231(DMEM)                  

MDA-MB-231(L-15)              

MDA-MB-436           人(ren)    

MDA-MB-468               

MG-63               人(ren)    

MGC-803              

MIA PaCa-2                   

MM.1S                  

MNNG/HOS Cl #5                  

MRC-5                   

MV4-11                 

N87               

NCI-H1299                     

NCI-H1563                     

NCI-H2452                     

NCI-H647                       

NK-92                     

NTHY-ORI-31                

OCM1A                 

OS-RC-2                 

OVCAR-3           人(ren)    

PANC-1                  

PC-3              

PC-3M                   

PC-9              

PLC/PRF/5                      

Raji                

RBE               

RD             人(ren)    

RKO               

RL95-2                   

RT4           人(ren)    

RWPE-1                 

SAOS-2                   

SH-SY5Y                 

SiHa              

SJCRH30               

SK-BR-3                 

SK-HEP-1           人(ren)    

SK-MES-1              

SK-N-BE(2)                     

SK-NEP-1               

SK-N-SH                 

SK-OV-3                

SPC-A-1                 

SU-DHL-6              

SV-HUC-1                   人(ren)    

SW 1990            人(ren)    

SW1353                     

SW480                   

SW579                   

SW620                   

SW-620                  

SW839                   

SW982               人(ren)    

T/G HA-VSMC               

T-24              

T47D                      

T82                

T84                

TCA-8113                       

TE 353.Sk                      

TE-1              

THP-1                     

TMK1                     

TPC-1                 人(ren)    

TT                  

TTA1                       

U-118MG                       

U-2 OS                   

U251                      

U87                       

U-87MG                

U-937                     

UM-UC-3              

VCAP                      

WERI-RB-1                     

WI-38                     

WISH                      

WPMY-1                    

ZR-75-1             人(ren)    

ZR-75-30               

 

 

 

 

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