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H1755,人肺癌細胞 消化要有個度

發布時間(jian):2018-06-22瀏(liu)覽:1312次

H1755人肺癌(ai)細胞   消(xiao)化要有個(ge)度(du)

產品代號:H1755

中文名稱:人肺癌細胞

種屬:人

是否鑒定(ding):已(yi)鑒定(ding)

庫存狀(zhuang)態:現(xian)貨

 

慧穎生物提(ti)供2000種(zhong)類細(xi)(xi)胞株(zhu)細(xi)(xi)胞系,400多株(zhu)已鑒定細(xi)(xi)胞,涉及種(zhong)屬:人,大鼠(shu),小鼠(shu),兔子(zi),魚,牛,倉鼠(shu)等,我們提(ti)供好的(de)產(chan)品,好的(de)服務,好的(de)技術(shu),復蘇(su)周期短,*,細(xi)(xi)胞狀(zhuang)態良好,飽滿,有光澤(ze),無支原體。

 

H1755人肺癌細胞   消(xiao)化要(yao)有個度

細(xi)(xi)胞(bao)培養(yang)(yang),尤(you)其是(shi)細(xi)(xi)胞(bao)系的(de)培養(yang)(yang),就細(xi)(xi)胞(bao)消(xiao)化而言(yan),多(duo)做、善于總結,就可以把(ba)細(xi)(xi)胞(bao)養(yang)(yang)的(de)越來越好(hao)

絕(jue)大部分細(xi)胞消化只要用胰酶潤洗一(yi)遍即可:

吸(xi)去胰酶(mei)后,殘留的(de)(de)那些(xie)無(wu)法計算體積的(de)(de)附著在(zai)細(xi)(xi)胞表面的(de)(de)微量胰酶(mei)在(zai)37度一(yi)般不到2min足夠消化細(xi)(xi)胞(絕大部(bu)分1min不到)。對于這些(xie)細(xi)(xi)胞原則上不要用(yong)胰酶(mei)孵(fu)育(yu)細(xi)(xi)胞,連續這樣傳代,對細(xi)(xi)胞傷害很(hen)大。簡(jian)單(dan)的(de)(de)程序是PBS潤洗吸(xi)去,胰酶(mei)潤洗吸(xi)去,然后37度消化。

什么算(suan)是消化好了呢?

不需要把(ba)細胞全部消(xiao)化(hua)成(cheng)間隔分布很(hen)離散的單(dan)個圓形(xing)才算消(xiao)化(hua)好了(le),一般你肉眼觀(guan)察貼壁細胞層,只(zhi)要能移動了(le),多半呈沙壯移動,其實(shi)已經可以了(le)。

一般能移動(dong)了(le),說明細(xi)胞與培養(yang)基質材料的附著(zhu)已(yi)經(jing)(jing)消失了(le),細(xi)胞之間的附著(zhu)也已(yi)經(jing)(jing)消失了(le),細(xi)胞已(yi)經(jing)(jing)獨立分(fen)(fen)布了(le)(雖然(ran)沒有呈現很(hen)廣(guang)的離散分(fen)(fen)布)。這個時候應該停(ting)止消化,不要等到看(kan)到鏡(jing)下所有細(xi)胞都分(fen)(fen)離得(de)非(fei)常好(hao),間隙很(hen)大,才停(ting)止。

細(xi)胞(bao)就是(shi)(shi)*成單個(ge)(ge)細(xi)胞(bao)懸(xuan)液,之(zhi)后在貼壁(bi)的(de)(de)過程中仍然會聚集,這個(ge)(ge)是(shi)(shi)貼壁(bi)培(pei)養的(de)(de)細(xi)胞(bao),尤其是(shi)(shi)腫瘤細(xi)胞(bao)的(de)(de)一個(ge)(ge)特性,你(ni)可以嘗試,準備100%的(de)(de)單個(ge)(ge)細(xi)胞(bao)懸(xuan)液,貼壁(bi)后觀察細(xi)胞(bao),仍然是(shi)(shi)幾個(ge)(ge)幾個(ge)(ge)細(xi)胞(bao)聚集在一起。

一(yi)些(xie)懸浮培(pei)養細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)也是(shi)如此,容易(yi)聚(ju)集(ji),不要過幾(ji)個小時(shi)(shi)就(jiu)拿出(chu)來吹打成(cheng)單(dan)(dan)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)懸液。細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)只要能從基質(zhi)上脫離下(xia)來,即(ji)使是(shi)成(cheng)片的(比如Calu-3細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)),吹打不超過20次(ci)(一(yi)般10次(ci)即(ji)可(ke)),成(cheng)小規模聚(ju)集(ji)(10個細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)左(zuo)右)是(shi)正常的,不要再去延長消化時(shi)(shi)間,等待單(dan)(dan)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)懸液出(chu)現。

比較難消化的細胞:

潤洗(xi)方法5min還不(bu)能消(xiao)(xiao)化(hua),以結腸(chang)癌(ai)細(xi)(xi)胞為例,比(bi)如(ru)HCT15、LS411和KM12細(xi)(xi)胞,胰酶(mei)消(xiao)(xiao)化(hua),一般(ban)10 cm 培養皿,一次多加(jia)入300ul-500ul就足夠(gou)了。即使這樣難(nan)消(xiao)(xiao)化(hua)的細(xi)(xi)胞,一般(ban)不(bu)超(chao)過5min,即可(ke)見細(xi)(xi)胞成片(pian)移動,就應(ying)該(gai)停止消(xiao)(xiao)化(hua)。一些正常細(xi)(xi)胞也會有難(nan)消(xiao)(xiao)化(hua)的時(shi)候(hou),比(bi)如(ru)tsDC細(xi)(xi)胞,用(yong)胰酶(mei)孵(fu)育,3min左右(you)即可(ke)看到(dao)成片(pian)沙狀移動。

 

常規的細胞(bao)實驗,受消化影響不是(shi)很大(da):

如果不(bu)用(yong)(yong)胰(yi)(yi)酶去孵育而使用(yong)(yong)潤洗的方(fang)法消(xiao)化的話(hua)(難消(xiao)化細(xi)(xi)胞(bao)例(li)外(wai))。但少數(shu)實驗,比如病毒包裝,對(dui)細(xi)(xi)胞(bao)代數(shu),對(dui)細(xi)(xi)胞(bao)狀態要求*。這個(ge)時(shi)候,胰(yi)(yi)酶消(xiao)化,就(jiu)是潤洗,都會(hui)對(dui)細(xi)(xi)胞(bao)包裝病毒的能力(li)有影響(xiang),傳代次數(shu)一多,細(xi)(xi)胞(bao)包裝能力(li)就(jiu)會(hui)逐漸下降(jiang)。這個(ge)時(shi)候都不(bu)用(yong)(yong)胰(yi)(yi)酶消(xiao)化,用(yong)(yong)一些(xie)鹽(yan)溶(rong)液(ye)(不(bu)是EDTA液(ye))即可。這些(xie)鹽(yan)溶(rong)液(ye)通過(guo)影響(xiang)細(xi)(xi)胞(bao)外(wai)基質相關酶的活性,來使得細(xi)(xi)胞(bao)脫離基質附著表面,但不(bu)切割任何蛋白(bai)。

 

EDTA的作用(yong):

許多人不用(yong)(yong)胰酶,只用(yong)(yong)EDTA,或(huo)者(zhe)用(yong)(yong)胰酶/EDTA聯合作(zuo)用(yong)(yong)。這里(li)要明白,胰酶切割細胞(bao)外基質(zhi)的一(yi)些(xie)負責粘連和(he)附(fu)著的蛋白,而EDTA通過螯合Ca離子,作(zuo)用(yong)(yong)于(yu)整聯蛋白的活性,所以EDTA的作(zuo)用(yong)(yong)更加溫和(he)。有的人在胰酶里(li)添加一(yi)些(xie)EDTA,或(huo)者(zhe)對(dui)付特別難消(xiao)化(hua)的細胞(bao),添加多一(yi)些(xie)EDTA,就是這個道理。一(yi)般不要試(shi)圖(tu)延(yan)長消(xiao)化(hua)時間(如果10min還消(xiao)化(hua)不*的話),而應該想其它辦法。

 

PBS洗滌(di):

消化(hua)之前用PBS洗滌,是常見(jian)的(de)操作(zuo),因(yin)為血清中含有(you)抑(yi)制(zhi)胰酶的(de)蛋白(bai)。對(dui)于(yu)(yu)一些難消化(hua)細胞,可以配(pei)(pei)制(zhi)不含Ca,Mg離子的(de)PBS,因(yin)為這(zhe)些離子也會抑(yi)制(zhi)胰酶的(de)活性(xing)。但對(dui)于(yu)(yu)絕大(da)部(bu)分細胞用胰酶或(huo)者EDTA溶液潤(run)洗即可消化(hua),不需要配(pei)(pei)制(zhi)不含Ca,Mg離子的(de)溶液。

細胞代(dai)號         細胞名稱         種(zhong)屬         鑒(jian)定(ding)結果

H1755人(ren)肺癌細胞   消化(hua)要有個度

編號 中文(wen)名(ming)稱  是否鑒定

5637         人膀胱癌細胞(bao)             

7703         人肝癌細胞         

143B         人骨肉瘤(liu)細胞         人(ren)    

22RV1      人前列腺癌(ai)細(xi)胞         

293FT       人胚(pei)腎(shen)細胞         

293T         人胚腎細胞     人(ren)    

435S          人(ren)乳腺癌細胞/人黑(hei)素瘤細胞            

453  人乳(ru)腺癌細胞(bao)             

6T-CEM    T細(xi)胞白血病細(xi)胞         

769-P        人腎細胞腺癌細胞         人(ren)    

786-O       人腎(shen)透明細胞腺癌細胞             

95-D          人高(gao)轉移肺癌(ai)細(xi)胞(bao)             

97H  人(ren)高(gao)轉移性肝癌細胞         

A172         人(ren)膠(jiao)質(zhi)母(mu)細(xi)胞瘤細(xi)胞     人(ren)    

A2058       人(ren)黑色素瘤(liu)細胞         

A2780       人卵巢癌(ai)細胞             

A375         人黑(hei)色(se)素瘤細胞株             

A431         人表皮(pi)癌細胞             

A498         人腎(shen)癌(ai)細(xi)胞         

A549         人非小細(xi)胞肺癌(ai)細(xi)         人(ren)    

A-673        人(ren)橫紋肌肉(rou)瘤(liu)細胞             

ACHN       人腎細胞(bao)腺癌細胞(bao)             

AGS  人(ren)胃(wei)腺(xian)癌細胞             

AN3CA     人子宮(gong)內膜腺癌(轉移)細胞(bao)      

ARH-77    人漿細(xi)胞白血病     人(ren)    

ARO 沒有(you),找(zhao)不到信息         人(ren)    

ARPE-19   人視網膜上(shang)皮細胞             

B-CPAP     人甲(jia)狀(zhuang)腺(xian)癌細胞(bao)         

BEAS-2b   人正常(chang)肺(fei)上皮細胞(bao)             

BEWO       人絨毛膜(mo)腫(zhong)瘤細胞             

BGC-823  人胃(wei)腺癌細胞(低(di)分化)              

BT-474     人乳(ru)腺導管癌細胞             

BT-549     人乳(ru)腺管癌細胞     人(ren)    

BXPC-3     人原位胰腺腺癌細胞         

C-33 A      人子(zi)宮頸癌細胞         

C643         人甲(jia)狀(zhuang)腺癌(ai)細胞(bao)     人(ren)    

C8166       T淋巴細(xi)胞白血病細(xi)胞        

Ca Ski        人宮頸癌腸轉(zhuan)移細胞/人(ren)宮頸癌上皮細胞       

Caco2       人結直腸腺(xian)癌(ai)細(xi)胞            

CAKI-1      人腎(shen)透明(ming)細胞(bao)(bao)癌皮膚(fu)轉移(yi)細胞(bao)(bao)     人(ren)    

cal-27       人(ren)舌鱗癌細胞             

CALU-1     人肺癌細胞         

CALU-3     人肺腺癌細胞(胸(xiong)水)           

CCD-1095SK     人乳腺浸潤性導管(guan)癌旁皮膚(fu)細胞             

CCRF-CEM        人急性淋巴(ba)細胞白血病T淋(lin)巴細胞         

CEM/C1   人(ren)急性淋(lin)巴細(xi)胞白血病細(xi)胞             

CFPAC-1   人胰(yi)腺癌細(xi)胞(bao)         人(ren)    

CNE1        人鼻(bi)咽(yan)癌細(xi)胞        人(ren)    

CNE2        人鼻(bi)咽癌細胞            

COLO 205         人結腸癌細胞             

COLO 320DM  人結直腸腺癌(ai)細胞(bao)             

CW-2        人結腸腺癌細胞         

DAOY        Daoy細(xi)胞,具體(ti)不清(qing)楚            

DAUDI      人(ren)Burkitt's淋巴瘤細胞     

DETROIT 562   人咽頭癌(ai)胸(xiong)水轉(zhuan)移細胞             

DLD-1       人結(jie)直腸腺(xian)癌上皮細胞             

DU 145     人(ren)前列腺癌細胞         

EA.HY926         人臍靜脈細(xi)胞融合(he)細(xi)胞             

ECV304    人臍靜脈(mo)內皮(pi)細胞             

ES-2 人(ren)卵巢透明細胞癌細胞        人(ren)    

FADU        人咽鱗癌細(xi)胞             

FTC-133   人濾泡性甲(jia)狀腺(xian)癌(ai)細胞         人(ren)    

GBC-SD    人(ren)膽囊癌細胞         人(ren)    

GCIY                   人(ren)    

H1299      人非(fei)小細(xi)胞肺(fei)癌細(xi)胞         

H1395      人肺腺(xian)癌細胞             

H1650      人非(fei)小(xiao)細胞(bao)肺(fei)癌(ai)細胞(bao)         

H1703      人肺鱗癌細胞(bao)             

H1755      人肺癌細胞(bao)       

H1944      人(ren)非小細(xi)胞肺癌細(xi)胞     人(ren)    

H1975      人肺腺癌細胞             

H2170      人肺鱗(lin)癌細胞             

H226         人肺(fei)鱗癌細胞             

H292         人肺癌細胞(淋巴結轉移)           

H358         人非小細胞(bao)肺癌(ai)細胞(bao)       

H460         人大細胞(bao)肺癌細胞(bao)        人(ren)    

H520         人肺(fei)鱗癌細胞            

H596         人肺腺鱗癌細胞         

H661         人大(da)細(xi)胞肺(fei)癌細(xi)胞             

H716         人結直腸(chang)腺癌細胞(bao)             

H838         人非小細胞肺癌細胞         

Hacat       人永生(sheng)化角質(zhi)形(xing)成細胞         人(ren)    

HBE 人(ren)支氣管上(shang)皮(pi)樣細胞         

HBL-100   人(ren)整(zheng)合SV40基因的乳腺上皮細胞(bao)           

HCC1937 人乳腺癌細(xi)胞         人(ren)    

HCC827   人非(fei)小(xiao)細(xi)胞(bao)肺(fei)癌細(xi)胞(bao)     人(ren)    

HCCC-9810      人膽管細(xi)胞(bao)型肝癌細(xi)胞(bao)             

HCCLM3  人高(gao)轉移肝癌細胞(bao)             

HCT-116  人結腸癌細胞             

HCT-8       人(ren)回盲腸癌細(xi)胞         

HEC-1-A   人子(zi)宮內(nei)膜(mo)腺癌(ai)細胞(bao)         

HEC-1-B   人子宮(gong)內(nei)膜腺癌(ai)細(xi)胞         

HEK-293   人胚腎細胞         

HEL  人紅白細胞(bao)白血(xue)病(bing)細胞(bao)           

HELA229  人宮頸癌復蘇細胞             

Hela-J                人(ren)    

Hep G2     人肝癌細胞         

HEP-2       人喉表皮樣癌細胞        人(ren)    

HEP3B      人肝癌(ai)細胞     人(ren)    

HEY          人卵巢癌細胞             

HFF  人包皮成(cheng)纖維細(xi)胞            

HFL1         人胚(pei)肺成纖維(wei)細胞         人(ren)    

HFOB1.19         SV40轉染(ran)成骨細(xi)胞               

HGC-27    人胃癌細胞(未分化)         

HK-2          人腎皮質近曲小管(guan)上皮細胞             

HL-60        人原(yuan)髓細(xi)胞(bao)白(bai)血病細(xi)胞(bao)            

HMEC-1   人微血管(guan)內皮細胞(bao)        人(ren)    

HO-8910  人卵巢癌(ai)細胞             

HPN1                    

HS683       細胞(bao)人腦視神經膠(jiao)質瘤細胞(bao)            

Hs888Lu  人肺成(cheng)纖(xian)維細(xi)胞         

HT-1080   人纖維肉瘤細(xi)胞     人(ren)    

HT-29       人結腸癌細(xi)胞            

HT-3                       

HTR8        人(ren)滋(zi)養細胞         

HUCCT1   膽管上皮癌細(xi)胞              

HuH-6       人(ren)肝(gan)母細(xi)胞(bao)(bao)瘤細(xi)胞(bao)(bao)     人(ren)    

HUH-7      人肝癌細胞         

HUT78      人(ren)T淋巴細胞白血病細胞         

HUVEC-C 人臍靜脈內(nei)皮(pi)細(xi)胞             

ISK                 

JAR                

JEG-3                     

JEKO-1                   

JurkatClone E6-1              

K-562                     

KATO III                 

KLE                

KTC-1                     

KU812                人(ren)    

KYSE-150               

LI-7                

LNcap clone FGC                   

L-O2              

LOVO                     

LS 174T              人(ren)    

MCF10A                

MCF-7                    

MDA-MB-231               

MDA-MB-231(DMEM)                  

MDA-MB-231(L-15)              

MDA-MB-436               

MDA-MB-468               

MG-63               人(ren)    

MGC-803              

MIA PaCa-2                   

MM.1S                  

MNNG/HOS Cl #5                  

MRC-5                   

MV4-11                 

N87               

NCI-H1299                     

NCI-H1563                     

NCI-H2452                     

NCI-H647                       

NK-92                     

NTHY-ORI-31                

OCM1A                 

OS-RC-2                 

OVCAR-3               

PANC-1                  

PC-3          人(ren)    

PC-3M               人(ren)    

PC-9          人(ren)    

PLC/PRF/5                      

Raji                

RBE               

RD                 

RKO               

RL95-2                   

RT4               

RWPE-1                 

SAOS-2                   

SH-SY5Y                 

SiHa              

SJCRH30           人(ren)    

SK-BR-3                 

SK-HEP-1               

SK-MES-1          人(ren)    

SK-N-BE(2)                     

SK-NEP-1               

SK-N-SH                 

SK-OV-3                

SPC-A-1             人(ren)    

SU-DHL-6              

SV-HUC-1                       

SW 1990                

SW1353                     

SW480                   

SW579               人(ren)    

SW620               人(ren)    

SW-620                  

SW839                   

SW982                   

T/G HA-VSMC               

T-24              

T47D                      

T82                

T84                

TCA-8113                       

TE 353.Sk                      

TE-1              

THP-1                     

TMK1                     

TPC-1                     

TT                  

TTA1                       

U-118MG                       

U-2 OS                   

U251                      

U87                       

U-87MG                

U-937                 人(ren)    

UM-UC-3              

VCAP                      

WERI-RB-1                     

WI-38                     

WISH                      

WPMY-1                    

ZR-75-1             人(ren)    

ZR-75-30               

 

 

 

 

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