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H1755,人肺癌(ai)細胞 消(xiao)化要有個(ge)度(du)
產品代號:H1755
中文名稱:人肺癌細胞
種屬:人
是否鑒定(ding):已(yi)鑒定(ding)
庫存狀(zhuang)態:現(xian)貨
慧穎生物提(ti)供2000種(zhong)類細(xi)(xi)胞株(zhu)細(xi)(xi)胞系,400多株(zhu)已鑒定細(xi)(xi)胞,涉及種(zhong)屬:人,大鼠(shu),小鼠(shu),兔子(zi),魚,牛,倉鼠(shu)等,我們提(ti)供好的(de)產(chan)品,好的(de)服務,好的(de)技術(shu),復蘇(su)周期短,*,細(xi)(xi)胞狀(zhuang)態良好,飽滿,有光澤(ze),無支原體。
H1755,人肺癌細胞 消(xiao)化要(yao)有個度
細(xi)(xi)胞(bao)培養(yang)(yang),尤(you)其是(shi)細(xi)(xi)胞(bao)系的(de)培養(yang)(yang),就細(xi)(xi)胞(bao)消(xiao)化而言(yan),多(duo)做、善于總結,就可以把(ba)細(xi)(xi)胞(bao)養(yang)(yang)的(de)越來越好(hao)
絕(jue)大部分細(xi)胞消化只要用胰酶潤洗一(yi)遍即可:
吸(xi)去胰酶(mei)后,殘留的(de)(de)那些(xie)無(wu)法計算體積的(de)(de)附著在(zai)細(xi)(xi)胞表面的(de)(de)微量胰酶(mei)在(zai)37度一(yi)般不到2min足夠消化細(xi)(xi)胞(絕大部(bu)分1min不到)。對于這些(xie)細(xi)(xi)胞原則上不要用(yong)胰酶(mei)孵(fu)育(yu)細(xi)(xi)胞,連續這樣傳代,對細(xi)(xi)胞傷害很(hen)大。簡(jian)單(dan)的(de)(de)程序是PBS潤洗吸(xi)去,胰酶(mei)潤洗吸(xi)去,然后37度消化。
什么算(suan)是消化好了呢?
不需要把(ba)細胞全部消(xiao)化(hua)成(cheng)間隔分布很(hen)離散的單(dan)個圓形(xing)才算消(xiao)化(hua)好了(le),一般你肉眼觀(guan)察貼壁細胞層,只(zhi)要能移動了(le),多半呈沙壯移動,其實(shi)已經可以了(le)。
一般能移動(dong)了(le),說明細(xi)胞與培養(yang)基質材料的附著(zhu)已(yi)經(jing)(jing)消失了(le),細(xi)胞之間的附著(zhu)也已(yi)經(jing)(jing)消失了(le),細(xi)胞已(yi)經(jing)(jing)獨立分(fen)(fen)布了(le)(雖然(ran)沒有呈現很(hen)廣(guang)的離散分(fen)(fen)布)。這個時候應該停(ting)止消化,不要等到看(kan)到鏡(jing)下所有細(xi)胞都分(fen)(fen)離得(de)非(fei)常好(hao),間隙很(hen)大,才停(ting)止。
細(xi)胞(bao)就是(shi)(shi)*成單個(ge)(ge)細(xi)胞(bao)懸(xuan)液,之(zhi)后在貼壁(bi)的(de)(de)過程中仍然會聚集,這個(ge)(ge)是(shi)(shi)貼壁(bi)培(pei)養的(de)(de)細(xi)胞(bao),尤其是(shi)(shi)腫瘤細(xi)胞(bao)的(de)(de)一個(ge)(ge)特性,你(ni)可以嘗試,準備100%的(de)(de)單個(ge)(ge)細(xi)胞(bao)懸(xuan)液,貼壁(bi)后觀察細(xi)胞(bao),仍然是(shi)(shi)幾個(ge)(ge)幾個(ge)(ge)細(xi)胞(bao)聚集在一起。
一(yi)些(xie)懸浮培(pei)養細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)也是(shi)如此,容易(yi)聚(ju)集(ji),不要過幾(ji)個小時(shi)(shi)就(jiu)拿出(chu)來吹打成(cheng)單(dan)(dan)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)懸液。細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)只要能從基質(zhi)上脫離下(xia)來,即(ji)使是(shi)成(cheng)片的(比如Calu-3細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)),吹打不超過20次(ci)(一(yi)般10次(ci)即(ji)可(ke)),成(cheng)小規模聚(ju)集(ji)(10個細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)左(zuo)右)是(shi)正常的,不要再去延長消化時(shi)(shi)間,等待單(dan)(dan)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)懸液出(chu)現。
比較難消化的細胞:
潤洗(xi)方法5min還不(bu)能消(xiao)(xiao)化(hua),以結腸(chang)癌(ai)細(xi)(xi)胞為例,比(bi)如(ru)HCT15、LS411和KM12細(xi)(xi)胞,胰酶(mei)消(xiao)(xiao)化(hua),一般(ban)10 cm 培養皿,一次多加(jia)入300ul-500ul就足夠(gou)了。即使這樣難(nan)消(xiao)(xiao)化(hua)的細(xi)(xi)胞,一般(ban)不(bu)超(chao)過5min,即可(ke)見細(xi)(xi)胞成片(pian)移動,就應(ying)該(gai)停止消(xiao)(xiao)化(hua)。一些正常細(xi)(xi)胞也會有難(nan)消(xiao)(xiao)化(hua)的時(shi)候(hou),比(bi)如(ru)tsDC細(xi)(xi)胞,用(yong)胰酶(mei)孵(fu)育,3min左右(you)即可(ke)看到(dao)成片(pian)沙狀移動。
常規的細胞(bao)實驗,受消化影響不是(shi)很大(da):
如果不(bu)用(yong)(yong)胰(yi)(yi)酶去孵育而使用(yong)(yong)潤洗的方(fang)法消(xiao)化的話(hua)(難消(xiao)化細(xi)(xi)胞(bao)例(li)外(wai))。但少數(shu)實驗,比如病毒包裝,對(dui)細(xi)(xi)胞(bao)代數(shu),對(dui)細(xi)(xi)胞(bao)狀態要求*。這個(ge)時(shi)候,胰(yi)(yi)酶消(xiao)化,就(jiu)是潤洗,都會(hui)對(dui)細(xi)(xi)胞(bao)包裝病毒的能力(li)有影響(xiang),傳代次數(shu)一多,細(xi)(xi)胞(bao)包裝能力(li)就(jiu)會(hui)逐漸下降(jiang)。這個(ge)時(shi)候都不(bu)用(yong)(yong)胰(yi)(yi)酶消(xiao)化,用(yong)(yong)一些(xie)鹽(yan)溶(rong)液(ye)(不(bu)是EDTA液(ye))即可。這些(xie)鹽(yan)溶(rong)液(ye)通過(guo)影響(xiang)細(xi)(xi)胞(bao)外(wai)基質相關酶的活性,來使得細(xi)(xi)胞(bao)脫離基質附著表面,但不(bu)切割任何蛋白(bai)。
EDTA的作用(yong):
許多人不用(yong)(yong)胰酶,只用(yong)(yong)EDTA,或(huo)者(zhe)用(yong)(yong)胰酶/EDTA聯合作(zuo)用(yong)(yong)。這里(li)要明白,胰酶切割細胞(bao)外基質(zhi)的一(yi)些(xie)負責粘連和(he)附(fu)著的蛋白,而EDTA通過螯合Ca離子,作(zuo)用(yong)(yong)于(yu)整聯蛋白的活性,所以EDTA的作(zuo)用(yong)(yong)更加溫和(he)。有的人在胰酶里(li)添加一(yi)些(xie)EDTA,或(huo)者(zhe)對(dui)付特別難消(xiao)化(hua)的細胞(bao),添加多一(yi)些(xie)EDTA,就是這個道理。一(yi)般不要試(shi)圖(tu)延(yan)長消(xiao)化(hua)時間(如果10min還消(xiao)化(hua)不*的話),而應該想其它辦法。
PBS洗滌(di):
消化(hua)之前用PBS洗滌,是常見(jian)的(de)操作(zuo),因(yin)為血清中含有(you)抑(yi)制(zhi)胰酶的(de)蛋白(bai)。對(dui)于(yu)(yu)一些難消化(hua)細胞,可以配(pei)(pei)制(zhi)不含Ca,Mg離子的(de)PBS,因(yin)為這(zhe)些離子也會抑(yi)制(zhi)胰酶的(de)活性(xing)。但對(dui)于(yu)(yu)絕大(da)部(bu)分細胞用胰酶或(huo)者EDTA溶液潤(run)洗即可消化(hua),不需要配(pei)(pei)制(zhi)不含Ca,Mg離子的(de)溶液。
細胞代(dai)號 細胞名稱 種(zhong)屬 鑒(jian)定(ding)結果
H1755,人(ren)肺癌細胞 消化(hua)要有個度
編號 中文(wen)名(ming)稱 是否鑒定
5637 人膀胱癌細胞(bao) 人 √
7703 人肝癌細胞 人 √
143B 人骨肉瘤(liu)細胞 人(ren) √
22RV1 人前列腺癌(ai)細(xi)胞 人 √
293FT 人胚(pei)腎(shen)細胞 人 √
293T 人胚腎細胞 人(ren) √
435S 人(ren)乳腺癌細胞/人黑(hei)素瘤細胞 人 √
453 人乳(ru)腺癌細胞(bao) 人 √
6T-CEM 人T細(xi)胞白血病細(xi)胞 人 √
769-P 人腎細胞腺癌細胞 人(ren) √
786-O 人腎(shen)透明細胞腺癌細胞 人 √
95-D 人高(gao)轉移肺癌(ai)細(xi)胞(bao) 人 √
97H 人(ren)高(gao)轉移性肝癌細胞 人 √
A172 人(ren)膠(jiao)質(zhi)母(mu)細(xi)胞瘤細(xi)胞 人(ren) √
A2058 人(ren)黑色素瘤(liu)細胞 人 √
A2780 人卵巢癌(ai)細胞 人 √
A375 人黑(hei)色(se)素瘤細胞株 人 √
A431 人表皮(pi)癌細胞 人 √
A498 人腎(shen)癌(ai)細(xi)胞 人 √
A549 人非小細(xi)胞肺癌(ai)細(xi) 人(ren) √
A-673 人(ren)橫紋肌肉(rou)瘤(liu)細胞 人 √
ACHN 人腎細胞(bao)腺癌細胞(bao) 人 √
AGS 人(ren)胃(wei)腺(xian)癌細胞 人 √
AN3CA 人子宮(gong)內膜腺癌(轉移)細胞(bao) 人 √
ARH-77 人漿細(xi)胞白血病 人(ren) √
ARO 沒有(you),找(zhao)不到信息 人(ren) √
ARPE-19 人視網膜上(shang)皮細胞 人 √
B-CPAP 人甲(jia)狀(zhuang)腺(xian)癌細胞(bao) 人 √
BEAS-2b 人正常(chang)肺(fei)上皮細胞(bao) 人 √
BEWO 人絨毛膜(mo)腫(zhong)瘤細胞 人 √
BGC-823 人胃(wei)腺癌細胞(低(di)分化) 人 √
BT-474 人乳(ru)腺導管癌細胞 人 √
BT-549 人乳(ru)腺管癌細胞 人(ren) √
BXPC-3 人原位胰腺腺癌細胞 人 √
C-33 A 人子(zi)宮頸癌細胞 人 √
C643 人甲(jia)狀(zhuang)腺癌(ai)細胞(bao) 人(ren) √
C8166 人T淋巴細(xi)胞白血病細(xi)胞 人 √
Ca Ski 人宮頸癌腸轉(zhuan)移細胞/人(ren)宮頸癌上皮細胞 人 √
Caco2 人結直腸腺(xian)癌(ai)細(xi)胞 人 √
CAKI-1 人腎(shen)透明(ming)細胞(bao)(bao)癌皮膚(fu)轉移(yi)細胞(bao)(bao) 人(ren) √
cal-27 人(ren)舌鱗癌細胞 人 √
CALU-1 人肺癌細胞 人 √
CALU-3 人肺腺癌細胞(胸(xiong)水) 人 √
CCD-1095SK 人乳腺浸潤性導管(guan)癌旁皮膚(fu)細胞 人 √
CCRF-CEM 人急性淋巴(ba)細胞白血病T淋(lin)巴細胞 人 √
CEM/C1 人(ren)急性淋(lin)巴細(xi)胞白血病細(xi)胞 人 √
CFPAC-1 人胰(yi)腺癌細(xi)胞(bao) 人(ren) √
CNE1 人鼻(bi)咽(yan)癌細(xi)胞 人(ren) √
CNE2 人鼻(bi)咽癌細胞 人 √
COLO 205 人結腸癌細胞 人 √
COLO 320DM 人結直腸腺癌(ai)細胞(bao) 人 √
CW-2 人結腸腺癌細胞 人 √
DAOY Daoy細(xi)胞,具體(ti)不清(qing)楚 人 √
DAUDI 人(ren)Burkitt's淋巴瘤細胞 人 √
DETROIT 562 人咽頭癌(ai)胸(xiong)水轉(zhuan)移細胞 人 √
DLD-1 人結(jie)直腸腺(xian)癌上皮細胞 人 √
DU 145 人(ren)前列腺癌細胞 人 √
EA.HY926 人臍靜脈細(xi)胞融合(he)細(xi)胞 人 √
ECV304 人臍靜脈(mo)內皮(pi)細胞 人 √
ES-2 人(ren)卵巢透明細胞癌細胞 人(ren) √
FADU 人咽鱗癌細(xi)胞 人 √
FTC-133 人濾泡性甲(jia)狀腺(xian)癌(ai)細胞 人(ren) √
GBC-SD 人(ren)膽囊癌細胞 人(ren) √
GCIY 人(ren) √
H1299 人非(fei)小細(xi)胞肺(fei)癌細(xi)胞 人 √
H1395 人肺腺(xian)癌細胞 人 √
H1650 人非(fei)小(xiao)細胞(bao)肺(fei)癌(ai)細胞(bao) 人 √
H1703 人肺鱗癌細胞(bao) 人 √
H1755 人肺癌細胞(bao) 人 √
H1944 人(ren)非小細(xi)胞肺癌細(xi)胞 人(ren) √
H1975 人肺腺癌細胞 人 √
H2170 人肺鱗(lin)癌細胞 人 √
H226 人肺(fei)鱗癌細胞 人 √
H292 人肺癌細胞(淋巴結轉移) 人 √
H358 人非小細胞(bao)肺癌(ai)細胞(bao) 人 √
H460 人大細胞(bao)肺癌細胞(bao) 人(ren) √
H520 人肺(fei)鱗癌細胞 人 √
H596 人肺腺鱗癌細胞 人 √
H661 人大(da)細(xi)胞肺(fei)癌細(xi)胞 人 √
H716 人結直腸(chang)腺癌細胞(bao) 人 √
H838 人非小細胞肺癌細胞 人 √
Hacat 人永生(sheng)化角質(zhi)形(xing)成細胞 人(ren) √
HBE 人(ren)支氣管上(shang)皮(pi)樣細胞 人 √
HBL-100 人(ren)整(zheng)合SV40基因的乳腺上皮細胞(bao) 人 √
HCC1937 人乳腺癌細(xi)胞 人(ren) √
HCC827 人非(fei)小(xiao)細(xi)胞(bao)肺(fei)癌細(xi)胞(bao) 人(ren) √
HCCC-9810 人膽管細(xi)胞(bao)型肝癌細(xi)胞(bao) 人 √
HCCLM3 人高(gao)轉移肝癌細胞(bao) 人 √
HCT-116 人結腸癌細胞 人 √
HCT-8 人(ren)回盲腸癌細(xi)胞 人 √
HEC-1-A 人子(zi)宮內(nei)膜(mo)腺癌(ai)細胞(bao) 人 √
HEC-1-B 人子宮(gong)內(nei)膜腺癌(ai)細(xi)胞 人 √
HEK-293 人胚腎細胞 人 √
HEL 人紅白細胞(bao)白血(xue)病(bing)細胞(bao) 人 √
HELA229 人宮頸癌復蘇細胞 人 √
Hela-J 人(ren) √
Hep G2 人肝癌細胞 人 √
HEP-2 人喉表皮樣癌細胞 人(ren) √
HEP3B 人肝癌(ai)細胞 人(ren) √
HEY 人卵巢癌細胞 人 √
HFF 人包皮成(cheng)纖維細(xi)胞 人 √
HFL1 人胚(pei)肺成纖維(wei)細胞 人(ren) √
HFOB1.19 人SV40轉染(ran)成骨細(xi)胞 人 √
HGC-27 人胃癌細胞(未分化) 人 √
HK-2 人腎皮質近曲小管(guan)上皮細胞 人 √
HL-60 人原(yuan)髓細(xi)胞(bao)白(bai)血病細(xi)胞(bao) 人 √
HMEC-1 人微血管(guan)內皮細胞(bao) 人(ren) √
HO-8910 人卵巢癌(ai)細胞 人 √
HPN1 人 √
HS683 細胞(bao)人腦視神經膠(jiao)質瘤細胞(bao) 人 √
Hs888Lu 人肺成(cheng)纖(xian)維細(xi)胞 人 √
HT-1080 人纖維肉瘤細(xi)胞 人(ren) √
HT-29 人結腸癌細(xi)胞 人 √
HT-3 人 √
HTR8 人(ren)滋(zi)養細胞 人 √
HUCCT1 膽管上皮癌細(xi)胞 人 √
HuH-6 人(ren)肝(gan)母細(xi)胞(bao)(bao)瘤細(xi)胞(bao)(bao) 人(ren) √
HUH-7 人肝癌細胞 人 √
HUT78 人(ren)T淋巴細胞白血病細胞 人 √
HUVEC-C 人臍靜脈內(nei)皮(pi)細(xi)胞 人 √
ISK 人 √
JAR 人 √
JEG-3 人 √
JEKO-1 人 √
Jurkat,Clone E6-1 人 √
K-562 人 √
KATO III 人 √
KLE 人 √
KTC-1 人 √
KU812 人(ren) √
KYSE-150 人 √
LI-7 人 √
LNcap clone FGC 人 √
L-O2 人 √
LOVO 人 √
LS 174T 人(ren) √
MCF10A 人 √
MCF-7 人 √
MDA-MB-231 人 √
MDA-MB-231(DMEM) 人 √
MDA-MB-231(L-15) 人 √
MDA-MB-436 人 √
MDA-MB-468 人 √
MG-63 人(ren) √
MGC-803 人 √
MIA PaCa-2 人 √
MM.1S 人 √
MNNG/HOS Cl #5 人 √
MRC-5 人 √
MV4-11 人 √
N87 人 √
NCI-H1299 人 √
NCI-H1563 人 √
NCI-H2452 人 √
NCI-H647 人 √
NK-92 人 √
NTHY-ORI-31 人 √
OCM1A 人 √
OS-RC-2 人 √
OVCAR-3 人 √
PANC-1 人 √
PC-3 人(ren) √
PC-3M 人(ren) √
PC-9 人(ren) √
PLC/PRF/5 人 √
Raji 人 √
RBE 人 √
RD 人 √
RKO 人 √
RL95-2 人 √
RT4 人 √
RWPE-1 人 √
SAOS-2 人 √
SH-SY5Y 人 √
SiHa 人 √
SJCRH30 人(ren) √
SK-BR-3 人 √
SK-HEP-1 人 √
SK-MES-1 人(ren) √
SK-N-BE(2) 人 √
SK-NEP-1 人 √
SK-N-SH 人 √
SK-OV-3 人 √
SPC-A-1 人(ren) √
SU-DHL-6 人 √
SV-HUC-1 人 √
SW 1990 人 √
SW1353 √
SW480 人 √
SW579 人(ren) √
SW620 人(ren) √
SW-620 人 √
SW839 人 √
SW982 人 √
T/G HA-VSMC 人 √
T-24 人 √
T47D 人 √
T82 人 √
T84 人 √
TCA-8113 人 √
TE 353.Sk 人 √
TE-1 人 √
THP-1 人 √
TMK1 人 √
TPC-1 人 √
TT 人 √
TTA1 人 √
U-118MG 人 √
U-2 OS 人 √
U251 人 √
U87 人 √
U-87MG 人 √
U-937 人(ren) √
UM-UC-3 人 √
VCAP 人 √
WERI-RB-1 人 √
WI-38 人 √
WISH 人 √
WPMY-1 √
ZR-75-1 人(ren) √
ZR-75-30 人 √