聯系電話:
您現在的位置:首頁 > 技術文章 > H1944,人(ren)非小(xiao)細(xi)胞(bao)肺癌(ai)細(xi)胞(bao) 消(xiao)化(hua)要有個(ge)度(du)
H1944,人非(fei)小細胞肺癌細胞 消(xiao)化要有個度
產品代號:H1944
中文名稱:人非小細(xi)胞肺癌細(xi)胞
種屬:人(ren)
是否鑒(jian)定:已鑒(jian)定
庫存狀(zhuang)態:現貨
慧穎生(sheng)物提供(gong)2000種(zhong)類(lei)細(xi)胞(bao)株(zhu)細(xi)胞(bao)系,400多(duo)株(zhu)已鑒定細(xi)胞(bao),涉及種(zhong)屬:人(ren),大鼠,小鼠,兔子,魚,牛(niu),倉鼠等,我們提供(gong)好(hao)的(de)產品,好(hao)的(de)服務,好(hao)的(de)技術(shu),復蘇周期短,*,細(xi)胞(bao)狀態良好(hao),飽滿,有(you)光澤,無(wu)支原體。
H1944,人(ren)非小細胞肺(fei)癌細胞 消化(hua)要有個(ge)度
細(xi)胞培養,尤其(qi)是細(xi)胞系的(de)培養,就細(xi)胞消化而言,多做、善于總結,就可以把(ba)細(xi)胞養的(de)越來越好(hao)
絕大部分細胞消化(hua)只要用(yong)胰酶(mei)潤洗一遍即可:
吸去胰(yi)酶(mei)后(hou),殘留(liu)的那(nei)些(xie)無法計算(suan)體積的附著在細(xi)胞(bao)(bao)表面的微量胰(yi)酶(mei)在37度(du)一般不到2min足夠(gou)消化細(xi)胞(bao)(bao)(絕大部分(fen)1min不到)。對于這(zhe)些(xie)細(xi)胞(bao)(bao)原則上不要用胰(yi)酶(mei)孵育細(xi)胞(bao)(bao),連續這(zhe)樣傳代,對細(xi)胞(bao)(bao)傷害很大。簡單(dan)的程序(xu)是(shi)PBS潤洗(xi)(xi)吸去,胰(yi)酶(mei)潤洗(xi)(xi)吸去,然后(hou)37度(du)消化。
什么算是消化(hua)好(hao)了呢?
不(bu)需要(yao)(yao)把細胞全部消(xiao)化成間隔分布很離散的單(dan)個圓形(xing)才算消(xiao)化好了(le),一(yi)般你肉眼觀察貼壁(bi)細胞層(ceng),只要(yao)(yao)能移動(dong)了(le),多(duo)半呈沙壯移動(dong),其實已經可以了(le)。
一般能移動了(le)(le),說明(ming)細胞(bao)(bao)與(yu)培養(yang)基質(zhi)材料(liao)的附著已經(jing)消(xiao)失了(le)(le),細胞(bao)(bao)之間的附著也已經(jing)消(xiao)失了(le)(le),細胞(bao)(bao)已經(jing)獨立分布(bu)了(le)(le)(雖然沒有呈現很廣的離散分布(bu))。這(zhe)個(ge)時候應該(gai)停止(zhi)消(xiao)化(hua),不要等到看到鏡下所有細胞(bao)(bao)都分離得非常好(hao),間隙很大,才停止(zhi)。
細(xi)胞(bao)(bao)就是*成單個細(xi)胞(bao)(bao)懸液,之后在貼(tie)(tie)壁(bi)的(de)(de)過(guo)程中仍然會(hui)聚集,這個是貼(tie)(tie)壁(bi)培養的(de)(de)細(xi)胞(bao)(bao),尤其是腫瘤(liu)細(xi)胞(bao)(bao)的(de)(de)一個特性,你可以嘗試,準(zhun)備(bei)100%的(de)(de)單個細(xi)胞(bao)(bao)懸液,貼(tie)(tie)壁(bi)后觀(guan)察細(xi)胞(bao)(bao),仍然是幾(ji)個幾(ji)個細(xi)胞(bao)(bao)聚集在一起。
一些(xie)懸(xuan)浮(fu)培(pei)養細(xi)胞(bao)(bao)(bao)也是(shi)如此(ci),容易(yi)聚(ju)集(ji),不要(yao)過(guo)幾個(ge)小(xiao)(xiao)時就(jiu)拿出(chu)來吹打(da)成單(dan)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)懸(xuan)液。細(xi)胞(bao)(bao)(bao)只要(yao)能(neng)從(cong)基質上(shang)脫離下(xia)來,即(ji)使是(shi)成片的(比如Calu-3細(xi)胞(bao)(bao)(bao)),吹打(da)不超過(guo)20次(一般10次即(ji)可),成小(xiao)(xiao)規(gui)模聚(ju)集(ji)(10個(ge)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)左右)是(shi)正常的,不要(yao)再去延長(chang)消化時間,等(deng)待單(dan)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)懸(xuan)液出(chu)現。
比較難消(xiao)化的細胞(bao):
潤洗方法5min還不(bu)(bu)能消(xiao)化,以結腸癌細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)為例,比如(ru)(ru)HCT15、LS411和KM12細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao),胰酶消(xiao)化,一般10 cm 培養皿(min),一次多加入300ul-500ul就足夠了。即(ji)使這樣難(nan)(nan)消(xiao)化的細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao),一般不(bu)(bu)超過5min,即(ji)可見細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)成片(pian)移(yi)動,就應該停止消(xiao)化。一些正常細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)也會(hui)有(you)難(nan)(nan)消(xiao)化的時候,比如(ru)(ru)tsDC細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao),用(yong)胰酶孵育,3min左右即(ji)可看到成片(pian)沙狀(zhuang)移(yi)動。
常(chang)規的細胞實驗,受消化(hua)影(ying)響不是很大(da):
如果不(bu)(bu)用(yong)胰酶(mei)(mei)去孵育而(er)使用(yong)潤(run)洗的(de)方法(fa)消(xiao)化(hua)(hua)的(de)話(難消(xiao)化(hua)(hua)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)例外)。但(dan)少(shao)數實驗,比如病毒(du)包裝,對細(xi)胞(bao)(bao)(bao)代數,對細(xi)胞(bao)(bao)(bao)狀態要求*。這(zhe)(zhe)個時(shi)(shi)候(hou),胰酶(mei)(mei)消(xiao)化(hua)(hua),就是(shi)潤(run)洗,都會(hui)對細(xi)胞(bao)(bao)(bao)包裝病毒(du)的(de)能力有影(ying)響,傳代次數一(yi)多,細(xi)胞(bao)(bao)(bao)包裝能力就會(hui)逐漸下降(jiang)。這(zhe)(zhe)個時(shi)(shi)候(hou)都不(bu)(bu)用(yong)胰酶(mei)(mei)消(xiao)化(hua)(hua),用(yong)一(yi)些(xie)(xie)鹽(yan)溶(rong)液(不(bu)(bu)是(shi)EDTA液)即可。這(zhe)(zhe)些(xie)(xie)鹽(yan)溶(rong)液通過影(ying)響細(xi)胞(bao)(bao)(bao)外基質相關酶(mei)(mei)的(de)活性,來使得細(xi)胞(bao)(bao)(bao)脫離(li)基質附著表面,但(dan)不(bu)(bu)切割任(ren)何蛋白。
EDTA的(de)作用:
許多人不用(yong)(yong)(yong)胰(yi)(yi)酶,只用(yong)(yong)(yong)EDTA,或者用(yong)(yong)(yong)胰(yi)(yi)酶/EDTA聯合作(zuo)用(yong)(yong)(yong)。這里要明(ming)白,胰(yi)(yi)酶切割細(xi)胞外基質的(de)(de)(de)(de)一些(xie)負責粘連和(he)附著的(de)(de)(de)(de)蛋(dan)白,而(er)EDTA通(tong)過螯合Ca離子,作(zuo)用(yong)(yong)(yong)于整聯蛋(dan)白的(de)(de)(de)(de)活性(xing),所以EDTA的(de)(de)(de)(de)作(zuo)用(yong)(yong)(yong)更加(jia)(jia)溫和(he)。有(you)的(de)(de)(de)(de)人在(zai)胰(yi)(yi)酶里添加(jia)(jia)一些(xie)EDTA,或者對付特別(bie)難消(xiao)化的(de)(de)(de)(de)細(xi)胞,添加(jia)(jia)多一些(xie)EDTA,就是這個道理。一般不要試圖延(yan)長消(xiao)化時間(如果10min還消(xiao)化不*的(de)(de)(de)(de)話),而(er)應(ying)該想其它(ta)辦法。
PBS洗滌:
消(xiao)化之前用PBS洗滌,是常見(jian)的(de)(de)操(cao)作,因(yin)為(wei)血清(qing)中含(han)有(you)抑(yi)制(zhi)胰(yi)(yi)酶(mei)的(de)(de)蛋白。對(dui)于一些(xie)難消(xiao)化細胞(bao),可以配制(zhi)不含(han)Ca,Mg離(li)子的(de)(de)PBS,因(yin)為(wei)這些(xie)離(li)子也會抑(yi)制(zhi)胰(yi)(yi)酶(mei)的(de)(de)活性。但(dan)對(dui)于絕(jue)大部分細胞(bao)用胰(yi)(yi)酶(mei)或者EDTA溶(rong)(rong)液潤洗即可消(xiao)化,不需要配制(zhi)不含(han)Ca,Mg離(li)子的(de)(de)溶(rong)(rong)液。
細(xi)胞代號 細胞名稱 種屬 鑒定(ding)結果
H1944,人非小細胞肺癌細胞 消化要有(you)個度(du)
編(bian)號 中文(wen)名稱 是否鑒定
5637 人膀胱癌(ai)細胞 人 √
7703 人肝癌細胞 人 √
143B 人骨肉瘤(liu)細(xi)胞 人 √
22RV1 人(ren)前列腺癌細胞 人 √
293FT 人胚腎細胞 人 √
293T 人胚腎(shen)細胞(bao) 人 √
435S 人乳腺(xian)癌(ai)細胞/人(ren)黑素瘤細(xi)胞 人(ren) √
453 人乳腺癌細胞 人(ren) √
6T-CEM 人T細胞(bao)白血病細胞(bao) 人 √
769-P 人腎細(xi)胞腺癌細(xi)胞 人(ren) √
786-O 人腎透明細(xi)胞腺癌(ai)細(xi)胞 人 √
95-D 人高轉移肺癌細胞 人 √
97H 人高轉移(yi)性肝癌細胞(bao) 人 √
A172 人膠質母細胞(bao)瘤(liu)細胞(bao) 人(ren) √
A2058 人黑色(se)素瘤細胞 人(ren) √
A2780 人(ren)卵巢癌細胞 人 √
A375 人(ren)黑色素瘤細胞(bao)株 人 √
A431 人(ren)表(biao)皮(pi)癌細胞 人(ren) √
A498 人腎癌細(xi)胞 人 √
A549 人非小細(xi)(xi)胞肺癌(ai)細(xi)(xi) 人 √
A-673 人橫紋肌肉瘤細胞 人 √
ACHN 人腎細(xi)胞(bao)腺癌(ai)細(xi)胞(bao) 人 √
AGS 人胃(wei)腺癌細胞 人 √
AN3CA 人(ren)子宮內膜腺癌(轉移)細胞 人 √
ARH-77 人漿細(xi)胞白(bai)血病 人 √
ARO 沒有(you),找(zhao)不到信息 人 √
ARPE-19 人視網膜上皮細胞 人 √
B-CPAP 人(ren)甲狀(zhuang)腺癌細胞 人 √
BEAS-2b 人(ren)正常肺上皮(pi)細胞 人 √
BEWO 人絨(rong)毛(mao)膜腫瘤細胞(bao) 人(ren) √
BGC-823 人胃(wei)腺癌細胞(低分化) 人 √
BT-474 人乳腺導管癌細胞 人(ren) √
BT-549 人乳腺管癌細胞 人 √
BXPC-3 人原位胰腺(xian)腺(xian)癌細(xi)胞 人 √
C-33 A 人(ren)子宮頸癌細胞 人 √
C643 人甲狀腺癌細(xi)胞 人(ren) √
C8166 人T淋巴細(xi)(xi)胞(bao)白血病細(xi)(xi)胞(bao) 人 √
Ca Ski 人宮頸(jing)癌腸轉移細胞/人(ren)宮頸癌上皮細胞 人 √
Caco2 人結直(zhi)腸腺癌細胞 人(ren) √
CAKI-1 人(ren)腎(shen)透明細(xi)胞(bao)癌皮膚轉移細(xi)胞(bao) 人 √
cal-27 人舌(she)鱗癌細胞 人 √
CALU-1 人(ren)肺癌細胞 人 √
CALU-3 人(ren)肺腺癌細(xi)胞(胸水) 人 √
CCD-1095SK 人乳腺浸(jin)潤性導管癌旁皮膚細胞 人 √
CCRF-CEM 人急性淋(lin)巴細(xi)胞白血病T淋巴(ba)細胞 人 √
CEM/C1 人急性淋巴細胞白血病(bing)細胞 人(ren) √
CFPAC-1 人胰腺癌細胞 人(ren) √
CNE1 人鼻咽癌細胞 人 √
CNE2 人鼻咽癌細胞 人 √
COLO 205 人結腸癌細胞 人 √
COLO 320DM 人結直腸腺癌細胞 人 √
CW-2 人結腸腺癌細(xi)胞 人 √
DAOY Daoy細胞,具(ju)體不(bu)清楚 人 √
DAUDI 人Burkitt's淋巴瘤細胞 人 √
DETROIT 562 人(ren)咽頭癌(ai)胸水轉移細(xi)胞 人 √
DLD-1 人結直腸腺癌上皮(pi)細胞 人(ren) √
DU 145 人前列(lie)腺癌細胞 人(ren) √
EA.HY926 人臍靜脈細胞融合(he)細胞 人 √
ECV304 人臍靜脈內皮細胞 人 √
ES-2 人卵(luan)巢透明細胞癌細胞 人(ren) √
FADU 人咽(yan)鱗癌細胞 人 √
FTC-133 人(ren)濾泡(pao)性甲狀腺癌細胞 人 √
GBC-SD 人(ren)膽(dan)囊癌(ai)細(xi)胞 人 √
GCIY 人 √
H1299 人非小細胞肺癌(ai)細胞 人 √
H1395 人(ren)肺腺癌(ai)細胞 人 √
H1650 人非(fei)小(xiao)細胞(bao)肺癌細胞(bao) 人 √
H1703 人(ren)肺(fei)鱗癌細胞 人(ren) √
H1755 人肺癌細胞 人 √
H1944 人非小細胞肺(fei)癌細胞 人 √
H1975 人肺腺癌細胞 人 √
H2170 人肺鱗癌細胞 人 √
H226 人肺(fei)鱗(lin)癌細胞 人(ren) √
H292 人肺(fei)癌細(xi)胞(bao)(淋巴(ba)結轉移(yi)) 人 √
H358 人非小細(xi)胞肺癌細(xi)胞 人 √
H460 人(ren)大細胞肺癌細胞 人(ren) √
H520 人肺(fei)鱗癌細胞 人 √
H596 人肺腺鱗癌細胞 人(ren) √
H661 人大細胞肺(fei)癌細胞 人 √
H716 人結直腸腺癌(ai)細胞 人 √
H838 人非小細(xi)胞肺(fei)癌細(xi)胞 人 √
Hacat 人(ren)永生化角質形(xing)成細胞 人 √
HBE 人(ren)支氣管上皮樣細(xi)胞 人 √
HBL-100 人整合SV40基因(yin)的(de)乳腺上皮細胞 人 √
HCC1937 人乳腺(xian)癌細胞 人(ren) √
HCC827 人非小細(xi)胞(bao)肺癌(ai)細(xi)胞(bao) 人(ren) √
HCCC-9810 人(ren)膽管細(xi)胞型肝癌細(xi)胞 人 √
HCCLM3 人高轉移(yi)肝癌細胞(bao) 人 √
HCT-116 人結腸癌(ai)細胞 人 √
HCT-8 人回盲腸(chang)癌細胞 人(ren) √
HEC-1-A 人子宮內膜(mo)腺癌細胞 人 √
HEC-1-B 人子宮內膜(mo)腺癌細胞 人 √
HEK-293 人胚腎細(xi)胞 人 √
HEL 人紅白細胞(bao)白血病細胞(bao) 人 √
HELA229 人宮頸癌復蘇細胞 人 √
Hela-J 人 √
Hep G2 人肝癌細胞 人 √
HEP-2 人喉(hou)表皮樣(yang)癌細胞 人(ren) √
HEP3B 人肝癌細(xi)胞 人 √
HEY 人卵巢(chao)癌細胞 人 √
HFF 人包皮(pi)成纖維(wei)細(xi)胞 人 √
HFL1 人胚肺成纖維細(xi)胞 人 √
HFOB1.19 人SV40轉染成骨細胞(bao) 人(ren) √
HGC-27 人胃(wei)癌細胞(未分化(hua)) 人 √
HK-2 人腎皮質近曲(qu)小管上皮細胞 人 √
HL-60 人原髓細胞白(bai)血病細胞 人 √
HMEC-1 人微(wei)血(xue)管內皮細(xi)胞 人(ren) √
HO-8910 人卵巢癌細(xi)胞 人 √
HPN1 人(ren) √
HS683 細胞人腦視神(shen)經膠質瘤細胞 人(ren) √
Hs888Lu 人(ren)肺成纖維細胞 人(ren) √
HT-1080 人(ren)纖維肉(rou)瘤(liu)細(xi)胞 人 √
HT-29 人(ren)結腸癌細胞 人(ren) √
HT-3 人 √
HTR8 人滋養細(xi)胞 人 √
HUCCT1 膽管上皮癌細胞 人 √
HuH-6 人肝母細胞瘤(liu)細胞 人 √
HUH-7 人肝癌細胞 人(ren) √
HUT78 人T淋巴細胞白血病細胞 人 √
HUVEC-C 人臍靜脈內(nei)皮細胞 人 √
ISK 人 √
JAR 人 √
JEG-3 人 √
JEKO-1 人(ren) √
Jurkat,Clone E6-1 人 √
K-562 人 √
KATO III 人(ren) √
KLE 人(ren) √
KTC-1 人 √
KU812 人 √
KYSE-150 人 √
LI-7 人 √
LNcap clone FGC 人 √
L-O2 人(ren) √
LOVO 人 √
LS 174T 人 √
MCF10A 人 √
MCF-7 人(ren) √
MDA-MB-231 人 √
MDA-MB-231(DMEM) 人 √
MDA-MB-231(L-15) 人 √
MDA-MB-436 人 √
MDA-MB-468 人 √
MG-63 人 √
MGC-803 人(ren) √
MIA PaCa-2 人 √
MM.1S 人(ren) √
MNNG/HOS Cl #5 人 √
MRC-5 人 √
MV4-11 人 √
N87 人 √
NCI-H1299 人 √
NCI-H1563 人 √
NCI-H2452 人 √
NCI-H647 人 √
NK-92 人 √
NTHY-ORI-31 人 √
OCM1A 人 √
OS-RC-2 人 √
OVCAR-3 人 √
PANC-1 人(ren) √
PC-3 人 √
PC-3M 人 √
PC-9 人 √
PLC/PRF/5 人 √
Raji 人 √
RBE 人 √
RD 人 √
RKO 人 √
RL95-2 人 √
RT4 人 √
RWPE-1 人 √
SAOS-2 人(ren) √
SH-SY5Y 人(ren) √
SiHa 人 √
SJCRH30 人 √
SK-BR-3 人 √
SK-HEP-1 人 √
SK-MES-1 人(ren) √
SK-N-BE(2) 人 √
SK-NEP-1 人 √
SK-N-SH 人 √
SK-OV-3 人(ren) √
SPC-A-1 人 √
SU-DHL-6 人 √
SV-HUC-1 人 √
SW 1990 人 √
SW1353 √
SW480 人 √
SW579 人 √
SW620 人 √
SW-620 人 √
SW839 人 √
SW982 人 √
T/G HA-VSMC 人 √
T-24 人(ren) √
T47D 人(ren) √
T82 人 √
T84 人 √
TCA-8113 人 √
TE 353.Sk 人(ren) √
TE-1 人 √
THP-1 人 √
TMK1 人 √
TPC-1 人 √
TT 人 √
TTA1 人 √
U-118MG 人 √
U-2 OS 人 √
U251 人 √
U87 人(ren) √
U-87MG 人 √
U-937 人(ren) √
UM-UC-3 人 √
VCAP 人(ren) √
WERI-RB-1 人 √
WI-38 人 √
WISH 人 √
WPMY-1 √
ZR-75-1 人 √
ZR-75-30 人 √