人(ren)臍(qi)帶(dai)間充質干細胞(bao)特(te)性，人(ren)臍(qi)帶(dai)間充質干細胞(bao)來源

代號：hUC-MSCs細(xi)胞；HUMSC細(xi)胞

中文名稱(cheng)：人(ren)臍帶間充質干細(xi)胞

代數(shu)：P1或(huo) P3代

來(lai)源：東方(fang)醫院

hUC-MSCs細(xi)胞(bao)；中(zhong)文名稱：人臍帶間充(chong)質干細(xi)胞(bao) 來源：上海市東方(fang)醫院  出售P1代和P3代
取自滿月(yue)自然分娩的(de)胎兒臍(qi)帶，檢測結果表(biao)明，本產品無細(xi)(xi)菌(jun)、真菌(jun)、支原體和病毒污染，表(biao)達多種間充(chong)質干細(xi)(xi)胞(bao)(bao)特異標記，具有(you)良好的(de)增殖和分化潛能，可以分化為成骨(gu)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)、脂肪細(xi)(xi)胞(bao)(bao)、軟骨(gu)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)等(deng)。
生長特性：貼(tie)壁生長（形態紡錘狀，成纖維細胞(bao)樣）
培養(yang)條(tiao)件：培養基：DMEM/F12 90%+FBS 10%+b-FGF 10ng/mL （建議(yi)使用本(ben)公司間充質干細胞無血清培養基）
溫度：37℃     氣相：95%空(kong)氣，5%二氧(yang)化(hua)碳
培養瓶/皿：使(shi)用無血清培養(yang)基時應使(shi)用針(zhen)對間充質干細胞特(te)別(bie)TC處理的(de)培養(yang)瓶(ping)/皿，或使用纖連(lian)蛋白(bai)或其他促貼(tie)壁(bi)試劑包被過的培(pei)養瓶(ping)/皿
細胞(bao)特性(xing)：
經測(ce)試，本產品具有良(liang)好的增殖和(he)分(fen)化潛能，可分(fen)化為成(cheng)骨(gu)細(xi)胞、脂肪(fang)細(xi)胞、軟骨(gu)細(xi)胞等。流式檢測(ce)結果顯(xian)示，CD29、CD44、CD73、CD105、CD166陽性，CD11a、CD34、CD45陰性。
運輸(shu)保(bao)存：
采用干冰保存運輸
收到細(xi)(xi)胞時，若干冰已經*融化，請(qing)(qing)立即將細(xi)(xi)胞復蘇培養；若尚留有(you)干冰，請(qing)(qing)立即將細(xi)(xi)胞放入液氮(dan)中保存(cun)待用，請(qing)(qing)按條件貯存(cun)細(xi)(xi)胞，切不可將細(xi)(xi)胞置于高溫環境。
 
產品(pin)承(cheng)諾：
人臍(qi)帶間質干細胞(bao)的(de)體外培養(yang)周期有限。建議使用本公(gong)司(si)配套的(de)培養(yang)基和(he)正確的(de)培養(yang)方法來(lai)解凍、傳(chuan)代，以此保證細胞(bao)具備良好的(de)增殖和(he)分(fen)化能力。
 
用途：
本(ben)產品只提供(gong)給進一(yi)步的科研使(shi)用，不(bu)可應用于治(zhi)療(liao)等其他方面。
1.用75%酒精噴灑(sa)整(zheng)個培養瓶(ping)消毒，將其平躺置(zhi)于培養箱中進(jin)行1-3小時的緩沖，.然后置于(yu)無(wu)菌操(cao)作臺，打(da)開瓶口，將其中(zhong)的培養液去(qu)掉(diao)，再(zai)往其中(zhong)加入5-6 mL新鮮培養基(ji)（以T25培養(yang)(yang)瓶為(wei)例）并置于(yu)細(xi)胞(bao)培養(yang)(yang)箱(xiang)中(zhong)培養(yang)(yang)，根據細(xi)胞(bao)生長狀況及培養(yang)(yang)基顏色變化對其進行換液以(yi)及傳代，一般(ban)2到3天換一次液；
2.待細胞長(chang)滿瓶(ping)底面積80%-90%，需要對其進行(xing)傳(chuan)代，次傳(chuan)代比(bi)例為1:3，之后推薦傳代比例(li)為1:5到1:10；
3傳代(dai)步驟：將0.25%胰酶(mei)-0.53 mM EDTA消(xiao)化(hua)液與DPBS置于37°預熱(re)，倒(dao)掉培(pei)養(yang)瓶中的培(pei)養(yang)基，往(wang)培(pei)養(yang)瓶中加入3-5 ml DPBS，輕晃洗滌后棄(qi)去。使用(yong)DPBS將胰酶稀釋4倍，往瓶(ping)中加2 ml稀(xi)釋后(hou)的胰酶，置(zhi)于(yu)(yu)室(shi)溫孵育消(xiao)化（次消(xiao)化需時(shi)常取出置(zhi)于(yu)(yu)顯微鏡下觀察，以顯微鏡下細胞觸(chu)角回收變圓(yuan)、輕拍(pai)瓶壁見細胞脫落(luo)為好(hao)的消(xiao)化時(shi)間，記錄(lu)好(hao)的消(xiao)化時(shi)間，以便于(yu)(yu)下次消(xiao)化），消(xiao)化好(hao)后(hou)加入2ml含血清的*培養基或(huo)其(qi)他胰(yi)酶中和液終止(zhi)消化。用移液槍輕輕吹打瓶壁上的細胞，使之(zhi)*脫落(luo)，然后(hou)收(shou)集細胞懸液并(bing)吹打成單個細胞懸液，1200rpm離(li)心5min，棄上清，加入*培養基重懸細胞，進行傳代。
保(bao)存：凍存條(tiao)件(jian)：80%*培養(yang)基(ji)+10%FBS+10%DMSO
(備注：建議(yi)使用本公司的冷凍液（H-W-100），用(yong)4度保存的冷(leng)凍液直接重懸細胞，不能預熱后使用。)
保存(cun)條件：液氮存(cun)儲
常見問題以及解決(jue)方案
1.培養瓶有破裂，培養液有漏(lou)液：細(xi)胞(bao)極(ji)大可(ke)能會污染(ran)，所以我們(men)會及時安排幫老師解決。
2.收到細胞后盡快(kuai)更換為含(han) 10%血清的新鮮培(pei)養基，如(ru)因特殊情況需要繼續使用原瓶培(pei)養基，請在原瓶培(pei)養基中額(e)外添加 10%的(de)血(xue)清（原瓶培養基的(de)繼續使用時間長不宜(yi)超過 72 小時）
3.細胞漂浮：培養瓶(ping)不開封，瓶(ping)口(kou)酒精(jing)擦拭后(hou)平(ping)躺放置(zhi)在(zai)培養箱。1-2小(xiao)時(shi)后觀察，如細(xi)胞(bao)大部分又貼回瓶底(di)，表明細(xi)胞(bao)活力(li)正常(chang)，剩余漂浮的細(xi)胞(bao)可(ke)以去掉(diao)，留8-10ml培養液培養觀察，細胞生(sheng)長至匯(hui)合度80%，進行消化傳(chuan)代(dai)；如細胞還是不貼壁，將(jiang)細胞離心收集轉到(dao)(dao)新培(pei)(pei)養(yang)瓶(ping)，原(yuan)培(pei)(pei)養(yang)瓶(ping)加部分培(pei)(pei)養(yang)液繼續培(pei)(pei)養(yang)，中間(jian)注意觀察，我們的技術人員會一直跟蹤指導(dao)，直到(dao)(dao)問題解決。
 
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