人臍帶間(jian)充質干細胞生長特性(xing)，人臍帶間(jian)充質干細胞用途

代號：hUC-MSCs細胞；HUMSC細(xi)胞

中文(wen)名(ming)稱：人臍帶間充質(zhi)干(gan)細(xi)胞

代(dai)數：P1或 P3代

來源：東(dong)方醫院(yuan)

hUC-MSCs細胞；中文名稱：人臍帶間充質干細胞 來源：上海(hai)市東方醫院  出(chu)售P1代和(he)P3代
取(qu)自滿(man)月自然分(fen)娩的(de)胎(tai)兒臍(qi)帶，檢測(ce)結果表明，本產品無細菌(jun)、真(zhen)菌(jun)、支原體和(he)病(bing)毒污染，表達多種間充質干(gan)細胞特異標記，具有良好的(de)增(zeng)殖和(he)分(fen)化(hua)潛能，可以分(fen)化(hua)為成骨細胞、脂肪細胞、軟骨細胞等。
生長特(te)性(xing)：貼壁生長（形(xing)態紡錘狀，成纖(xian)維細(xi)胞樣）
培養條件(jian)：培(pei)養基：DMEM/F12 90%+FBS 10%+b-FGF 10ng/mL （建議使用本公(gong)司(si)間充質干細胞無血清(qing)培養基(ji)）
溫(wen)度：37℃     氣相：95%空氣，5%二氧化(hua)碳
培養瓶/皿：使用(yong)無(wu)血清培養(yang)基時應使用(yong)針對間充(chong)質干細胞特別TC處(chu)理的(de)培養瓶/皿，或(huo)使(shi)用(yong)纖連蛋(dan)白或(huo)其他促貼壁試劑包被過的(de)培養瓶/皿(min)
細(xi)胞特性：
經(jing)測試，本(ben)產(chan)品具有良(liang)好的增殖和分化潛能，可分化為成骨細(xi)(xi)胞、脂(zhi)肪細(xi)(xi)胞、軟(ruan)骨細(xi)(xi)胞等。流式檢測結果顯示，CD29、CD44、CD73、CD105、CD166陽性，CD11a、CD34、CD45陰(yin)性。
運輸保(bao)存：
采用干冰保存運輸
收到細胞時，若干冰(bing)已經*融(rong)化，請立即將細胞復蘇培養；若尚留(liu)有干冰(bing)，請立即將細胞放入液氮中保存(cun)待用，請按條件(jian)貯(zhu)存(cun)細胞，切不可將細胞置于高溫環境。
 
產品(pin)承諾：
人臍(qi)帶間質干細(xi)胞(bao)的體外培養周期有限。建議使用(yong)本公司配套的培養基和正確的培養方(fang)法(fa)來解凍、傳代，以此保證(zheng)細(xi)胞(bao)具備良好(hao)的增殖和分化(hua)能力。
 
用途：
本產品只提(ti)供給進(jin)一(yi)步的科研使用(yong)(yong)，不(bu)可應用(yong)(yong)于治療(liao)等(deng)其(qi)他方面。
1.用(yong)75%酒精噴灑整個培(pei)養(yang)瓶消毒，將其平躺置于培(pei)養(yang)箱中進行1-3小時的緩沖(chong)，.然后置于無菌操作臺，打(da)開(kai)瓶口，將其中(zhong)的培養(yang)液去掉，再往其中(zhong)加入5-6 mL新鮮培(pei)養基（以T25培養瓶為(wei)例）并置(zhi)于細(xi)胞培養箱中培養，根據細(xi)胞生長狀況及(ji)培養基顏色(se)變化對(dui)其進行(xing)換液(ye)以及(ji)傳代，一般2到3天換(huan)一次液；
2.待細胞長(chang)滿瓶(ping)底面(mian)積80%-90%，需要(yao)對其進行傳代，次傳代比例為1:3，之后推薦傳代(dai)比例為(wei)1:5到1:10；
3傳代步驟：將0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消(xiao)化液與DPBS置于37°預熱，倒(dao)掉培(pei)養(yang)瓶中(zhong)的(de)培(pei)養(yang)基，往培(pei)養(yang)瓶中(zhong)加入(ru)3-5 ml DPBS，輕(qing)晃洗(xi)滌后棄去。使用DPBS將胰(yi)酶稀釋4倍，往瓶中加2 ml稀釋后(hou)的胰酶，置于室溫孵育消化(hua)（次消化(hua)需時常取出置于顯微鏡(jing)下觀(guan)察，以顯微鏡(jing)下細胞觸角(jiao)回收變圓、輕拍瓶壁見細胞脫(tuo)落為好(hao)的消化(hua)時間(jian)，記(ji)錄好(hao)的消化(hua)時間(jian)，以便于下次消化(hua)），消化(hua)好(hao)后(hou)加入2ml含(han)血清的(de)*培養基或其他胰酶(mei)中和液終止消(xiao)化。用移(yi)液槍輕輕吹打瓶壁上的(de)細(xi)胞，使之*脫落，然后收(shou)集細(xi)胞懸(xuan)液并吹打成單個細(xi)胞懸(xuan)液，1200rpm離心5min，棄上(shang)清，加(jia)入(ru)*培(pei)養(yang)基重懸細胞，進(jin)行傳代。
保存(cun)：凍(dong)存(cun)條件：80%*培養基(ji)+10%FBS+10%DMSO
(備注：建議使用本公司(si)的冷凍液（H-W-100），用4度(du)保存的冷凍液直接重懸細胞(bao)，不能預(yu)熱后(hou)使用。)
保存(cun)條件(jian)：液氮(dan)存(cun)儲
常見問(wen)題以(yi)及解決方案
1.培養(yang)(yang)瓶有(you)破裂，培養(yang)(yang)液有(you)漏(lou)液：細胞極大可能(neng)會污(wu)染，所以我們會及時安(an)排(pai)幫老師解決。
2.收到細胞后(hou)盡(jin)快更換(huan)為含 10%血清的新鮮培(pei)養(yang)(yang)基(ji)，如因特殊情(qing)況需要繼續使用原瓶培(pei)養(yang)(yang)基(ji)，請在原瓶培(pei)養(yang)(yang)基(ji)中額外添(tian)加 10%的血清（原瓶(ping)培(pei)養基的繼續使用時間長不(bu)宜超過 72 小時）
3.細胞(bao)漂浮：培養(yang)瓶(ping)(ping)不(bu)開封(feng)，瓶(ping)(ping)口酒精擦拭后平躺放置在培養(yang)箱(xiang)。1-2小時后觀察，如細(xi)胞(bao)大部(bu)分又(you)貼回(hui)瓶底，表(biao)明(ming)細(xi)胞(bao)活力正(zheng)常，剩余漂浮的細(xi)胞(bao)可以去掉(diao)，留8-10ml培養液培養觀察(cha)，細(xi)胞生(sheng)長至匯合度80%，進行(xing)消化傳代；如(ru)細(xi)胞還是不貼壁，將細(xi)胞離心收集轉(zhuan)到新培(pei)養瓶，原培(pei)養瓶加部分(fen)培(pei)養液繼續培(pei)養，中(zhong)間(jian)注意觀察，我們的技術人員會(hui)一直跟蹤指導，直到問題解決。
 
以(yi)上說明書僅供參考，請(qing)以(yi)隨貨說明書為(wei)主

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