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HELA細胞, 人(ren)宮頸(jing)癌細胞 傳代說明
細胞名稱:HELA 人宮(gong)頸(jing)癌細胞
貨號:H001
種屬:人
細胞來(lai)源:從ATCC/中科院/協(xie)和醫院等(deng)地(di)引(yin)進
生長(chang)特(te)性(xing):貼壁 上皮樣(yang)
培養條件:培養基(ji):90%DMEM(L)+10%FBS(推薦使用HAKATA優等胎牛血清(qing)HN-FBS-50)
溫(wen)度:37℃
氣相:95%空氣,5%二氧化碳
傳代(dai)說明:
1.用75%酒(jiu)精噴灑整個(ge)培(pei)養(yang)瓶消(xiao)毒,將(jiang)其(qi)平躺(tang)置(zhi)于(yu)培(pei)養(yang)箱中進(jin)行1-3小時的(de)緩沖,.然后置(zhi)于(yu)無菌操作臺,打開瓶口,將(jiang)其(qi)中的(de)培(pei)養(yang)液(ye)去(qu)掉(diao),再(zai)往其(qi)中加(jia)入5-6mL新鮮培(pei)養(yang)基(ji)(以T25培(pei)養(yang)瓶為例)并(bing)置(zhi)于(yu)細(xi)胞培(pei)養(yang)箱中培(pei)養(yang),根據(ju)細(xi)胞生長狀況及培(pei)養(yang)基(ji)顏色變化對其(qi)進(jin)行換(huan)液(ye)以及傳代,一般2到(dao)3天換(huan)一次液(ye);
2.待細胞(bao)長滿瓶底面積(ji)80%-90%,需要對其(qi)進行傳代(dai),傳代(dai)比例為1:3到1:8;
3傳(chuan)(chuan)代(dai)步驟:將(jiang)0.25%胰酶(mei)-0.53 mM EDTA消(xiao)化(hua)(hua)液(ye)置(zhi)于37°預熱,倒掉培(pei)養(yang)瓶(ping)(ping)中(zhong)的培(pei)養(yang)基(ji),往(wang)培(pei)養(yang)瓶(ping)(ping)中(zhong)加入3-5 ml PBS,輕(qing)晃洗(xi)滌后棄(qi)去。往(wang)瓶(ping)(ping)中(zhong)加1-2 ml預熱好(hao)的胰酶(mei),置(zhi)于37°孵育消(xiao)化(hua)(hua)(次消(xiao)化(hua)(hua)需時常取出置(zhi)于顯微鏡下(xia)觀察(cha),以顯微鏡下(xia)細(xi)胞觸(chu)角(jiao)回收(shou)變圓(yuan)、輕(qing)拍瓶(ping)(ping)壁(bi)見細(xi)胞脫(tuo)落為*消(xiao)化(hua)(hua)時間(jian),記錄*消(xiao)化(hua)(hua)時間(jian),以便于下(xia)次消(xiao)化(hua)(hua)),消(xiao)化(hua)(hua)好(hao)后加入3ml*培(pei)養(yang)基(ji)終止消(xiao)化(hua)(hua)。用(yong)移液(ye)槍輕(qing)輕(qing)吹打瓶(ping)(ping)壁(bi)上的細(xi)胞,使之*脫(tuo)落,然(ran)后收(shou)集細(xi)胞懸液(ye),1200rpm離心(xin)3min,棄(qi)上清,加入*培(pei)養(yang)基(ji)重懸細(xi)胞,進行傳(chuan)(chuan)代(dai)。
保存說明:
凍(dong)存(cun)條(tiao)件(jian):80%*培養(yang)基+10%FBS+10%DMSO
(備注(zhu):建議使用本公司(si)的冷凍液(ye)(H-W-100),用4度(du)保存的冷凍液(ye)直接重懸細胞,不能預熱后使用。)
保(bao)存條(tiao)件:液氮存儲
常見問題說明:
1.培養瓶(ping)有破裂,培養液有漏液:細胞極大可(ke)能會(hui)污(wu)染,所以(yi)我們會(hui)及時(shi)安(an)排幫老師解決。
2.收到(dao)細胞后盡(jin)快更換(huan)為含 10%血清(qing)的(de)新鮮培(pei)養基(ji),如因特殊情況需要繼續使(shi)(shi)用(yong)原瓶培(pei)養基(ji),請在原瓶培(pei)養基(ji)中(zhong)額外添加 10%的(de)血清(qing)(原瓶培(pei)養基(ji)的(de)繼續使(shi)(shi)用(yong)時間(jian)zui長不宜(yi)超過 72 小時)
3.細(xi)(xi)胞(bao)漂(piao)浮:培(pei)(pei)養(yang)(yang)瓶不開(kai)封(feng),瓶口酒精(jing)擦拭后平躺放置在培(pei)(pei)養(yang)(yang)箱。1-2小時后觀(guan)察(cha)(cha),如細(xi)(xi)胞(bao)大(da)部(bu)分又貼回瓶底,表明細(xi)(xi)胞(bao)活力正(zheng)常,剩余漂(piao)浮的細(xi)(xi)胞(bao)可(ke)以去掉,留8-10ml培(pei)(pei)養(yang)(yang)液(ye)培(pei)(pei)養(yang)(yang)觀(guan)察(cha)(cha),細(xi)(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)至匯合度80%,進行消化傳代;如細(xi)(xi)胞(bao)還是(shi)不貼壁,將細(xi)(xi)胞(bao)離心收集轉(zhuan)到(dao)新培(pei)(pei)養(yang)(yang)瓶,原培(pei)(pei)養(yang)(yang)瓶加部(bu)分培(pei)(pei)養(yang)(yang)液(ye)繼(ji)續培(pei)(pei)養(yang)(yang),中間注(zhu)意觀(guan)察(cha)(cha),我們的技術(shu)人員會一直跟(gen)蹤指導,直到(dao)問(wen)題(ti)解決(jue)。
供(gong)應商(shang):慧穎細胞庫(ku)
供應限制:僅供科研使用
SUER0902(XR) 697細(xi)胞,急性淋巴細(xi)胞B細(xi)胞白血(xue)病細(xi)胞 1×106 1ml/T25 詢(xun)價/元
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SUER1254(XR) HTK-細(xi)(xi)胞(bao),漿細(xi)(xi)胞(bao)骨髓瘤 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1255(XR) HuCCT1細胞, 1×106 1ml/T25 詢價(jia)/元
SUER1256(XR) HuG1-N細胞, 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1257(XR) huH-1細(xi)胞,肝(gan)癌(ai)細(xi)胞 1×106 1ml/T25 詢價(jia)/元
SUER1258(XR) HuH28細(xi)胞, 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1259(XR) HuH-6細胞,肝母細胞瘤細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1260(XR) HuH-7細胞,肝癌細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1261(XR) HuNS1細胞, 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1262(XR) HUP-T3細(xi)胞, 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1263(XR) HUP-T4細胞, 1×106 1ml/T25 詢(xun)價/元
SUER1264(XR) HuT 102細胞(bao),霉菌病fungoides-Sezary綜合癥細胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1939(XR) NCM460細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元(yuan)
SUER1940(XR) NHEK細(xi)胞,正常人皮膚(fu)角質細(xi)胞 1×106 1ml/T25 詢價(jia)/元
SUER1941(XR) SH-EP1細胞,神(shen)經母(mu)細胞瘤細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1942(XR) SGC7901/ADR細(xi)胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1943(XR) TA-K細胞,人甲狀腺未(wei)分(fen)化癌(ai)細胞 1×106 1ml/T25 詢(xun)價/元
SUER1944(XR) TAM-1細胞,人涎(xian)腺(xian)腺(xian)樣囊性癌細胞 1×106 1ml/T25 詢(xun)價(jia)/元(yuan)
SUER1945(XR) NHBE細胞,人正常支氣管上皮細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元