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細(xi)(xi)胞名稱:293T 人(ren)胚(pei)腎細(xi)(xi)胞
貨號:H003
種屬:人
細胞來源:從ATCC/中科院/協和(he)醫院等地(di)引(yin)進(jin)
生(sheng)長特性(xing):貼壁 上(shang)皮樣
培養條件:培養基:90%DMEM(H)+10%FBS+2mM L谷氨酰(xian)胺(an)(推(tui)薦使用HAKATA優等胎牛血清HN-FBS-50)
溫度:37℃
氣相:95%空氣,5%二氧化碳
傳代說明:
1.用(yong)75%酒精噴灑整個培養(yang)瓶(ping)消毒,將其(qi)平躺置于培養(yang)箱中進(jin)行1-3小時的緩沖,.然后(hou)置于無菌操(cao)作臺,打開瓶(ping)口,將其(qi)中的培養(yang)液(ye)去掉(diao),再往其(qi)中加(jia)入5-6mL新鮮培養(yang)基(以T25培養(yang)瓶(ping)為例(li))并置于細胞培養(yang)箱中培養(yang),根據細胞生長狀況及(ji)培養(yang)基顏色變化對(dui)其(qi)進(jin)行換(huan)液(ye)以及(ji)傳代,一般(ban)2到3天換(huan)一次液(ye);
2.待細胞長滿瓶底(di)面積80%-90%,需(xu)要對其進行傳代(dai),傳代(dai)比例為1:3到1:8;
3傳(chuan)代(dai)步驟:將(jiang)0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液(ye)置(zhi)于37°預熱(re),倒掉培(pei)養(yang)(yang)瓶中(zhong)(zhong)的培(pei)養(yang)(yang)基(ji),往培(pei)養(yang)(yang)瓶中(zhong)(zhong)加入(ru)3-5 ml PBS,輕(qing)晃洗滌后(hou)棄去。往瓶中(zhong)(zhong)加1-2 ml預熱(re)好的胰酶,置(zhi)于37°孵(fu)育消化(次消化需時常取出置(zhi)于顯(xian)微鏡(jing)下(xia)(xia)觀察,以顯(xian)微鏡(jing)下(xia)(xia)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)觸角回(hui)收變(bian)圓(yuan)、輕(qing)拍瓶壁見細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)脫落(luo)為*消化時間,記(ji)錄*消化時間,以便于下(xia)(xia)次消化),消化好后(hou)加入(ru)3ml*培(pei)養(yang)(yang)基(ji)終止(zhi)消化。用(yong)移液(ye)槍輕(qing)輕(qing)吹打瓶壁上的細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao),使(shi)之(zhi)*脫落(luo),然后(hou)收集細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)懸液(ye),1200rpm離心3min,棄上清,加入(ru)*培(pei)養(yang)(yang)基(ji)重懸細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao),進行傳(chuan)代(dai)。
保存說明(ming):
凍存條件(jian):80%*培養基(ji)+10%FBS+10%DMSO
(備(bei)注:建議使用本(ben)公司的冷凍液(H-W-100),用4度保存的冷凍液直接(jie)重懸細胞,不(bu)能(neng)預熱后(hou)使用。)
保(bao)存條件:液氮(dan)存儲(chu)
常見問題說明(ming):
1.培養瓶(ping)有破裂,培養液有漏液:細胞極(ji)大可能會污染,所以(yi)我們(men)會及時安排幫老師解決。
2.收到細胞后盡快更(geng)換為(wei)含 10%血清的(de)新鮮培(pei)(pei)養基,如因特殊(shu)情況需要繼續(xu)使用原(yuan)(yuan)瓶(ping)培(pei)(pei)養基,請在(zai)原(yuan)(yuan)瓶(ping)培(pei)(pei)養基中額外添加 10%的(de)血清(原(yuan)(yuan)瓶(ping)培(pei)(pei)養基的(de)繼續(xu)使用時(shi)間zui長不(bu)宜超過 72 小時(shi))
3.細(xi)胞(bao)(bao)漂(piao)浮(fu)(fu):培(pei)養(yang)(yang)(yang)瓶(ping)(ping)(ping)不開封(feng),瓶(ping)(ping)(ping)口酒精擦拭后(hou)平躺(tang)放(fang)置在培(pei)養(yang)(yang)(yang)箱。1-2小時(shi)后(hou)觀察(cha)(cha),如細(xi)胞(bao)(bao)大部(bu)(bu)分又貼回瓶(ping)(ping)(ping)底(di),表(biao)明(ming)細(xi)胞(bao)(bao)活(huo)力正常,剩余漂(piao)浮(fu)(fu)的(de)細(xi)胞(bao)(bao)可以去(qu)掉(diao),留8-10ml培(pei)養(yang)(yang)(yang)液(ye)(ye)培(pei)養(yang)(yang)(yang)觀察(cha)(cha),細(xi)胞(bao)(bao)生長至匯合度(du)80%,進行消化傳(chuan)代;如細(xi)胞(bao)(bao)還是不貼壁,將(jiang)細(xi)胞(bao)(bao)離心收集轉到新培(pei)養(yang)(yang)(yang)瓶(ping)(ping)(ping),原培(pei)養(yang)(yang)(yang)瓶(ping)(ping)(ping)加部(bu)(bu)分培(pei)養(yang)(yang)(yang)液(ye)(ye)繼續培(pei)養(yang)(yang)(yang),中間(jian)注意(yi)觀察(cha)(cha),我們的(de)技術(shu)人(ren)員會一直跟蹤指導,直到問(wen)題(ti)解決。
供應(ying)商:慧穎細(xi)胞庫 人源均來(lai)自于第(di)三方str鑒定(ding),請放心購(gou)買(mai)
供應限制(zhi):僅供科研(yan)使用(yong)
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SUER1176(XR) HEC-59細胞,星形細胞瘤細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
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SUER1257(XR) huH-1細胞,肝(gan)癌細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1258(XR) HuH28細胞, 1×106 1ml/T25 詢價(jia)/元(yuan)
SUER1259(XR) HuH-6細(xi)胞,肝母細(xi)胞瘤細(xi)胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1260(XR) HuH-7細胞,肝癌細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1261(XR) HuNS1細胞, 1×106 1ml/T25 詢(xun)價(jia)/元
SUER1262(XR) HUP-T3細(xi)胞, 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1263(XR) HUP-T4細胞, 1×106 1ml/T25 詢價(jia)/元
SUER1264(XR) HuT 102細胞,霉菌病fungoides-Sezary綜合(he)癥細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1939(XR) NCM460細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元(yuan)
SUER1940(XR) NHEK細胞,正常人皮膚(fu)角質細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元(yuan)
SUER1941(XR) SH-EP1細胞(bao),神經母細胞(bao)瘤(liu)細胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢價/元(yuan)
SUER1942(XR) SGC7901/ADR細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元(yuan)
SUER1943(XR) TA-K細胞,人甲狀腺未分(fen)化(hua)癌細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1944(XR) TAM-1細(xi)胞,人涎腺(xian)腺(xian)樣囊(nang)性癌細(xi)胞 1×106 1ml/T25 詢價/元(yuan)
SUER1945(XR) NHBE細(xi)胞,人正常支(zhi)氣管(guan)上皮(pi)細(xi)胞 1×106 1ml/T25 詢價/元