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細(xi)胞名稱:A549人非小細(xi)(xi)胞肺癌細(xi)(xi)胞
貨號:H005
種屬:人(ren)
細胞來源:從(cong)ATCC/中科院/協和醫院等地(di)引(yin)進
生(sheng)長(chang)特性:貼壁 上皮樣(yang)
培養(yang)條件:培養(yang)基:90%RPMI-1640+10%FBS(推薦(jian)使用(yong)HAKATA優等(deng)胎(tai)牛血清HN-FBS-50)
溫(wen)度:37℃
氣(qi)相:95%空氣(qi),5%二(er)氧化碳(tan)
傳代說明:
1.用75%酒精噴灑整個培養(yang)(yang)瓶消(xiao)毒,將其(qi)平躺置于(yu)培養(yang)(yang)箱中(zhong)進行(xing)1-3小時的緩沖(chong),.然后置于(yu)無菌操作臺,打(da)開瓶口(kou),將其(qi)中(zhong)的培養(yang)(yang)液去(qu)掉(diao),再往其(qi)中(zhong)加入5-6mL新鮮培養(yang)(yang)基(以T25培養(yang)(yang)瓶為例)并置于(yu)細(xi)胞(bao)培養(yang)(yang)箱中(zhong)培養(yang)(yang),根據(ju)細(xi)胞(bao)生長狀況及(ji)培養(yang)(yang)基顏色變化對其(qi)進行(xing)換液以及(ji)傳(chuan)代,一般2到3天換一次液;
2.待細胞長滿瓶底(di)面(mian)積80%-90%,需要對其進(jin)行傳代,傳代比例(li)為(wei)1:3到1:8;
3傳代步(bu)驟:將0.25%胰(yi)(yi)酶-0.53 mM EDTA消(xiao)化(hua)(hua)液置(zhi)于(yu)37°預(yu)熱,倒掉培(pei)養(yang)瓶中(zhong)的培(pei)養(yang)基,往培(pei)養(yang)瓶中(zhong)加(jia)入3-5 ml PBS,輕(qing)晃(huang)洗滌(di)后棄去。往瓶中(zhong)加(jia)1-2 ml預(yu)熱好的胰(yi)(yi)酶,置(zhi)于(yu)37°孵(fu)育消(xiao)化(hua)(hua)(次消(xiao)化(hua)(hua)需時(shi)常(chang)取出置(zhi)于(yu)顯(xian)微鏡(jing)下觀察,以顯(xian)微鏡(jing)下細胞(bao)(bao)(bao)觸角回收(shou)變圓、輕(qing)拍(pai)瓶壁見細胞(bao)(bao)(bao)脫落(luo)為*消(xiao)化(hua)(hua)時(shi)間,記錄*消(xiao)化(hua)(hua)時(shi)間,以便于(yu)下次消(xiao)化(hua)(hua)),消(xiao)化(hua)(hua)好后加(jia)入3ml*培(pei)養(yang)基終止消(xiao)化(hua)(hua)。用移液槍輕(qing)輕(qing)吹打瓶壁上(shang)的細胞(bao)(bao)(bao),使之*脫落(luo),然后收(shou)集細胞(bao)(bao)(bao)懸(xuan)(xuan)液,1200rpm離(li)心3min,棄上(shang)清,加(jia)入*培(pei)養(yang)基重懸(xuan)(xuan)細胞(bao)(bao)(bao),進行傳代。
保存說明:
凍存條件:80%*培養基+10%FBS+10%DMSO
(備(bei)注:建議使用(yong)本公司(si)的冷凍液(ye)(H-W-100),用(yong)4度(du)保存的冷凍液(ye)直接重懸細胞,不能預熱后使用(yong)。)
保存(cun)條件:液氮(dan)存(cun)儲
常(chang)見問(wen)題(ti)說明:
1.培養瓶有破裂(lie),培養液(ye)有漏液(ye):細胞極大(da)可能會污染,所以(yi)我們會及時(shi)安排幫老師解(jie)決。
2.收到(dao)細胞后盡(jin)快更換為含 10%血清(qing)的(de)新(xin)鮮培(pei)養基,如因特殊情(qing)況需(xu)要繼續使(shi)用原(yuan)瓶培(pei)養基,請(qing)在原(yuan)瓶培(pei)養基中(zhong)額外添(tian)加 10%的(de)血清(qing)(原(yuan)瓶培(pei)養基的(de)繼續使(shi)用時(shi)間zui長不宜超過 72 小時(shi))
3.細(xi)胞(bao)漂浮:培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)瓶(ping)不開封,瓶(ping)口酒精(jing)擦拭后平躺(tang)放置在培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)箱。1-2小時后觀察(cha),如(ru)細(xi)胞(bao)大部分又貼回瓶(ping)底,表(biao)明(ming)細(xi)胞(bao)活力(li)正常,剩余漂浮的細(xi)胞(bao)可(ke)以去掉(diao),留(liu)8-10ml培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)液(ye)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)觀察(cha),細(xi)胞(bao)生長至匯合度80%,進行消化(hua)傳代;如(ru)細(xi)胞(bao)還(huan)是(shi)不貼壁,將細(xi)胞(bao)離(li)心(xin)收集轉到(dao)新(xin)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)瓶(ping),原培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)瓶(ping)加(jia)部分培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)液(ye)繼續培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang),中間注(zhu)意(yi)觀察(cha),我們的技術(shu)人員會(hui)一(yi)直(zhi)跟蹤指導,直(zhi)到(dao)問題解決(jue)。
供應商:慧穎細胞(bao)庫(ku) 人源均來自(zi)于第三方str鑒定,請放心購(gou)買
供應限(xian)制:僅供科(ke)研使(shi)用
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SUER1259(XR) HuH-6細胞,肝母細胞瘤(liu)細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1260(XR) HuH-7細胞(bao),肝(gan)癌細胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1261(XR) HuNS1細胞, 1×106 1ml/T25 詢價/元(yuan)
SUER1262(XR) HUP-T3細胞, 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1263(XR) HUP-T4細(xi)胞, 1×106 1ml/T25 詢(xun)價(jia)/元
SUER1264(XR) HuT 102細(xi)胞(bao),霉菌病fungoides-Sezary綜合癥細(xi)胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢價/元(yuan)
SUER1939(XR) NCM460細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1940(XR) NHEK細胞(bao),正常(chang)人皮膚角質細胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1941(XR) SH-EP1細胞(bao),神經母細胞(bao)瘤細胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1942(XR) SGC7901/ADR細(xi)胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1943(XR) TA-K細(xi)胞(bao),人(ren)甲狀腺未分化癌細(xi)胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢(xun)價/元
SUER1944(XR) TAM-1細胞,人涎腺腺樣囊性癌(ai)細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1945(XR) NHBE細胞,人正常支氣管上(shang)皮(pi)細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元