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細胞(bao)名稱:A673人(ren)尤因肉(rou)瘤細胞(bao)
貨(huo)號:H006
種屬:人(ren)
細胞來(lai)源:從ATCC/中科院/協(xie)和(he)醫院等(deng)地(di)引進(jin)
生長特性(xing):貼壁 上皮樣(yang)
培(pei)養(yang)條(tiao)件:培(pei)養(yang)基:90%DMEM(H)+10%FBS(推薦(jian)使用HAKATA優等胎牛血(xue)清HN-FBS-50)
溫度:37℃
氣(qi)相:95%空氣(qi),5%二氧化碳
傳(chuan)代(dai)說明:
1.用75%酒精噴(pen)灑整個培(pei)(pei)養(yang)瓶(ping)消毒,將(jiang)其平躺置(zhi)于培(pei)(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)進(jin)行1-3小(xiao)時(shi)的(de)(de)緩沖,.然后置(zhi)于無菌操作臺,打(da)開瓶(ping)口,將(jiang)其中(zhong)的(de)(de)培(pei)(pei)養(yang)液去掉,再往其中(zhong)加入5-6mL新鮮(xian)培(pei)(pei)養(yang)基(ji)(以T25培(pei)(pei)養(yang)瓶(ping)為例)并置(zhi)于細(xi)胞培(pei)(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)培(pei)(pei)養(yang),根據細(xi)胞生長狀況及(ji)培(pei)(pei)養(yang)基(ji)顏(yan)色變化(hua)對其進(jin)行換液以及(ji)傳代,一般2到3天(tian)換一次(ci)液;
2.待細胞長滿瓶底面積80%-90%,需要(yao)對其進行傳代,傳代比例為1:3到1:8;
3傳代(dai)步驟:將0.25%胰(yi)酶-0.53 mM EDTA消化(hua)(hua)液(ye)(ye)置于(yu)(yu)37°預(yu)熱(re),倒掉培養(yang)(yang)瓶(ping)中(zhong)的(de)培養(yang)(yang)基,往培養(yang)(yang)瓶(ping)中(zhong)加(jia)入3-5 ml PBS,輕(qing)晃洗滌后棄(qi)去。往瓶(ping)中(zhong)加(jia)1-2 ml預(yu)熱(re)好的(de)胰(yi)酶,置于(yu)(yu)37°孵育消化(hua)(hua)(次(ci)消化(hua)(hua)需時(shi)常取出置于(yu)(yu)顯微鏡下觀察(cha),以顯微鏡下細(xi)(xi)胞(bao)觸(chu)角回(hui)收(shou)變圓、輕(qing)拍瓶(ping)壁(bi)見(jian)細(xi)(xi)胞(bao)脫(tuo)落(luo)為*消化(hua)(hua)時(shi)間(jian),記錄*消化(hua)(hua)時(shi)間(jian),以便于(yu)(yu)下次(ci)消化(hua)(hua)),消化(hua)(hua)好后加(jia)入3ml*培養(yang)(yang)基終止消化(hua)(hua)。用移液(ye)(ye)槍(qiang)輕(qing)輕(qing)吹打(da)瓶(ping)壁(bi)上的(de)細(xi)(xi)胞(bao),使(shi)之*脫(tuo)落(luo),然后收(shou)集細(xi)(xi)胞(bao)懸液(ye)(ye),1200rpm離心3min,棄(qi)上清,加(jia)入*培養(yang)(yang)基重(zhong)懸細(xi)(xi)胞(bao),進行傳代(dai)。
保存說明(ming):
凍存(cun)條件:80%*培養基+10%FBS+10%DMSO
(備注(zhu):建(jian)議使用(yong)(yong)本公司的冷凍(dong)液(ye)(H-W-100),用(yong)(yong)4度(du)保存的冷凍(dong)液(ye)直(zhi)接重懸細胞(bao),不能預(yu)熱后使用(yong)(yong)。)
保存(cun)條件:液氮存(cun)儲
常(chang)見問題說明:
1.培(pei)養瓶(ping)有(you)破裂,培(pei)養液有(you)漏液:細胞極(ji)大(da)可(ke)能會(hui)污染,所以我們會(hui)及時安排(pai)幫老師解決(jue)。
2.收到(dao)細胞后盡快更換為含 10%血清的新鮮培(pei)養基(ji),如因特殊情況需要繼續使(shi)用原(yuan)瓶(ping)培(pei)養基(ji),請在(zai)原(yuan)瓶(ping)培(pei)養基(ji)中(zhong)額(e)外添加 10%的血清(原(yuan)瓶(ping)培(pei)養基(ji)的繼續使(shi)用時間(jian)zui長不(bu)宜超過 72 小時)
3.細(xi)(xi)胞(bao)(bao)漂(piao)浮(fu):培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)瓶(ping)(ping)不(bu)開封,瓶(ping)(ping)口(kou)酒精(jing)擦拭后平躺放置(zhi)在培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)箱(xiang)。1-2小(xiao)時后觀察(cha),如(ru)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)大部(bu)分(fen)又貼回瓶(ping)(ping)底,表明細(xi)(xi)胞(bao)(bao)活力正常,剩余漂(piao)浮(fu)的(de)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)可以去掉(diao),留8-10ml培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)液(ye)(ye)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)觀察(cha),細(xi)(xi)胞(bao)(bao)生長至匯合度80%,進行消(xiao)化(hua)傳代(dai);如(ru)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)還是不(bu)貼壁,將細(xi)(xi)胞(bao)(bao)離(li)心收集(ji)轉到新培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)瓶(ping)(ping),原培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)瓶(ping)(ping)加(jia)部(bu)分(fen)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)液(ye)(ye)繼續培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang),中間(jian)注意觀察(cha),我們的(de)技術(shu)人員會一(yi)直跟蹤指導(dao),直到問題解決。
供(gong)應商:慧穎細(xi)胞庫(ku) 人源均(jun)來自于第三方str鑒定,請放心購買
供應(ying)限制:僅供科研(yan)使用
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SUER1254(XR) HTK-細胞,漿細胞骨髓瘤 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1255(XR) HuCCT1細胞, 1×106 1ml/T25 詢價(jia)/元
SUER1256(XR) HuG1-N細(xi)胞, 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1257(XR) huH-1細胞,肝癌細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1258(XR) HuH28細(xi)胞, 1×106 1ml/T25 詢價/元(yuan)
SUER1259(XR) HuH-6細(xi)胞(bao),肝母細(xi)胞(bao)瘤細(xi)胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1260(XR) HuH-7細胞,肝(gan)癌細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1261(XR) HuNS1細(xi)胞, 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1262(XR) HUP-T3細胞(bao), 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1263(XR) HUP-T4細胞, 1×106 1ml/T25 詢價(jia)/元
SUER1264(XR) HuT 102細胞(bao),霉(mei)菌病fungoides-Sezary綜(zong)合癥(zheng)細胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢價/元(yuan)
SUER1939(XR) NCM460細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1940(XR) NHEK細胞(bao),正常人皮(pi)膚角質細胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢價(jia)/元
SUER1941(XR) SH-EP1細(xi)胞,神經母細(xi)胞瘤細(xi)胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1942(XR) SGC7901/ADR細胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1943(XR) TA-K細胞(bao),人甲(jia)狀腺未(wei)分化癌細胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1944(XR) TAM-1細胞,人涎腺腺樣(yang)囊性癌細胞 1×106 1ml/T25 詢(xun)價(jia)/元(yuan)
SUER1945(XR) NHBE細胞,人正常支氣管(guan)上皮細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元