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細胞名稱:C33A 人宮(gong)頸癌細胞
貨號:H009
種屬:人
細胞來(lai)源:從ATCC/中(zhong)科(ke)院(yuan)/協和(he)醫院(yuan)等(deng)地引進
生長特性:貼壁 上皮樣
培(pei)養(yang)條(tiao)件:培(pei)養(yang)基:90%DMEM(L)+10%FBS(推(tui)薦使(shi)用HAKATA優等胎牛血清HN-FBS-50)
溫度:37℃
氣(qi)(qi)相:95%空氣(qi)(qi),5%二(er)氧化碳
傳代說明:
1.用75%酒精噴灑整個培養瓶消毒,將其(qi)平(ping)躺置于培養箱中(zhong)(zhong)進行1-3小時(shi)的(de)緩沖(chong),.然后置于無菌操作臺,打開瓶口,將其(qi)中(zhong)(zhong)的(de)培養液去掉(diao),再往其(qi)中(zhong)(zhong)加入(ru)5-6mL新鮮培養基(ji)(以(yi)(yi)T25培養瓶為例)并(bing)置于細胞(bao)培養箱中(zhong)(zhong)培養,根(gen)據細胞(bao)生長狀況及(ji)培養基(ji)顏色變化對(dui)其(qi)進行換(huan)(huan)液以(yi)(yi)及(ji)傳代(dai),一般2到(dao)3天換(huan)(huan)一次液;
2.待細(xi)胞(bao)長(chang)滿瓶底(di)面積80%-90%,需要對其進行(xing)傳代,傳代比例為1:3到(dao)1:8;
3傳代(dai)步驟(zou):將0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化(hua)液置(zhi)于(yu)(yu)37°預熱,倒掉培養(yang)瓶中的培養(yang)基,往培養(yang)瓶中加入(ru)3-5 ml PBS,輕晃(huang)洗滌(di)后棄去。往瓶中加1-2 ml預熱好的胰酶,置(zhi)于(yu)(yu)37°孵育消化(hua)(次(ci)消化(hua)需(xu)時常取出置(zhi)于(yu)(yu)顯微(wei)鏡下(xia)(xia)(xia)觀察,以顯微(wei)鏡下(xia)(xia)(xia)細(xi)胞觸角回收(shou)變圓、輕拍瓶壁見細(xi)胞脫落為(wei)*消化(hua)時間,記錄*消化(hua)時間,以便于(yu)(yu)下(xia)(xia)(xia)次(ci)消化(hua)),消化(hua)好后加入(ru)3ml*培養(yang)基終(zhong)止(zhi)消化(hua)。用移液槍輕輕吹(chui)打(da)瓶壁上的細(xi)胞,使之*脫落,然后收(shou)集(ji)細(xi)胞懸(xuan)液,1200rpm離心(xin)3min,棄上清(qing),加入(ru)*培養(yang)基重懸(xuan)細(xi)胞,進行傳代(dai)。
保(bao)存說明:
凍存條(tiao)件:80%*培養(yang)基+10%FBS+10%DMSO
(備注:建議使用(yong)本公司(si)的(de)冷凍(dong)液(ye)(H-W-100),用(yong)4度保(bao)存的(de)冷凍(dong)液(ye)直接重懸細胞,不能預熱后使用(yong)。)
保存條件:液氮(dan)存儲
常見問題(ti)說明:
1.培(pei)養瓶有破裂,培(pei)養液(ye)有漏液(ye):細(xi)胞極(ji)大(da)可能會污(wu)染,所以(yi)我們(men)會及時(shi)安排幫老師解決。
2.收到(dao)細胞(bao)后盡快更(geng)換為含 10%血(xue)清(qing)(qing)的新鮮培養(yang)(yang)(yang)基(ji),如(ru)因特(te)殊情況(kuang)需(xu)要(yao)繼(ji)續(xu)(xu)使用原瓶(ping)(ping)培養(yang)(yang)(yang)基(ji),請在原瓶(ping)(ping)培養(yang)(yang)(yang)基(ji)中額外添加(jia) 10%的血(xue)清(qing)(qing)(原瓶(ping)(ping)培養(yang)(yang)(yang)基(ji)的繼(ji)續(xu)(xu)使用時間zui長不宜超(chao)過 72 小時)
3.細(xi)胞(bao)(bao)(bao)漂浮(fu):培(pei)養(yang)瓶(ping)(ping)不開封,瓶(ping)(ping)口(kou)酒精擦拭(shi)后(hou)平(ping)躺放置(zhi)在培(pei)養(yang)箱。1-2小時后(hou)觀(guan)察(cha)(cha),如細(xi)胞(bao)(bao)(bao)大部分(fen)又(you)貼回瓶(ping)(ping)底,表(biao)明(ming)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)活力(li)正(zheng)常(chang),剩余漂浮(fu)的細(xi)胞(bao)(bao)(bao)可以(yi)去(qu)掉(diao),留8-10ml培(pei)養(yang)液培(pei)養(yang)觀(guan)察(cha)(cha),細(xi)胞(bao)(bao)(bao)生長至匯合(he)度80%,進行消化(hua)傳代(dai);如細(xi)胞(bao)(bao)(bao)還是不貼壁(bi),將細(xi)胞(bao)(bao)(bao)離心收集(ji)轉到新培(pei)養(yang)瓶(ping)(ping),原培(pei)養(yang)瓶(ping)(ping)加部分(fen)培(pei)養(yang)液繼續培(pei)養(yang),中間(jian)注意觀(guan)察(cha)(cha),我們(men)的技術人員會一直(zhi)跟蹤指導(dao),直(zhi)到問(wen)題(ti)解決。
供(gong)應商(shang):慧穎(ying)細(xi)胞庫 人源(yuan)均來自于第三方str鑒定,請放心購買
供應限制:僅(jin)供科研(yan)使(shi)用(yong)
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SUER1260(XR) HuH-7細胞,肝(gan)癌細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元(yuan)
SUER1261(XR) HuNS1細胞, 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1262(XR) HUP-T3細胞, 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1263(XR) HUP-T4細胞, 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1264(XR) HuT 102細胞(bao),霉菌病fungoides-Sezary綜(zong)合癥細胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢(xun)價/元
SUER1939(XR) NCM460細(xi)胞 1×106 1ml/T25 詢(xun)價/元(yuan)
SUER1940(XR) NHEK細胞,正常人皮膚(fu)角質細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1941(XR) SH-EP1細(xi)胞(bao),神經母細(xi)胞(bao)瘤細(xi)胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1942(XR) SGC7901/ADR細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1943(XR) TA-K細(xi)胞(bao),人甲狀腺未分化癌細(xi)胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1944(XR) TAM-1細(xi)胞,人(ren)涎腺腺樣囊(nang)性癌細(xi)胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1945(XR) NHBE細胞,人正常支氣(qi)管上(shang)皮細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元