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細(xi)胞(bao)名稱:H460人(ren)大細(xi)胞(bao)肺癌細(xi)胞(bao)
貨號:H015
種屬:人
細胞來源:從(cong)ATCC/中科院/協和(he)醫(yi)院等地引進
生長(chang)特性:貼壁 上皮樣
培養條件:培養基(ji):90%RPMI-1640+10%FBS(推薦使用HAKATA優等胎(tai)牛血清HN-FBS-50)
溫度:37℃
氣相:95%空氣,5%二氧化碳
傳代(dai)說(shuo)明:
1.用75%酒精(jing)噴灑整個(ge)培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)瓶(ping)(ping)消毒,將其平躺置于(yu)培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)箱中進行1-3小時的緩沖,.然后置于(yu)無菌操作臺(tai),打開瓶(ping)(ping)口,將其中的培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)液去掉,再往其中加入(ru)5-6mL新鮮培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)基(以(yi)T25培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)瓶(ping)(ping)為例)并(bing)置于(yu)細(xi)(xi)胞培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)箱中培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang),根(gen)據細(xi)(xi)胞生(sheng)長(chang)狀況及培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)基顏色(se)變化對其進行換液以(yi)及傳代(dai),一般2到3天(tian)換一次液;
2.待(dai)細胞長滿瓶底(di)面積80%-90%,需要對(dui)其進行傳代,傳代比例為1:3到1:8;
3傳代步驟:將0.25%胰(yi)酶(mei)-0.53 mM EDTA消(xiao)化(hua)(hua)(hua)液置于(yu)(yu)37°預熱,倒(dao)掉培(pei)(pei)養瓶中的(de)培(pei)(pei)養基,往(wang)培(pei)(pei)養瓶中加(jia)入(ru)(ru)3-5 ml PBS,輕(qing)(qing)晃洗滌后棄(qi)去。往(wang)瓶中加(jia)1-2 ml預熱好的(de)胰(yi)酶(mei),置于(yu)(yu)37°孵育消(xiao)化(hua)(hua)(hua)(次消(xiao)化(hua)(hua)(hua)需時常取出置于(yu)(yu)顯微(wei)鏡下觀察,以顯微(wei)鏡下細(xi)胞(bao)觸角回(hui)收變圓、輕(qing)(qing)拍瓶壁(bi)見細(xi)胞(bao)脫落為*消(xiao)化(hua)(hua)(hua)時間,記錄*消(xiao)化(hua)(hua)(hua)時間,以便于(yu)(yu)下次消(xiao)化(hua)(hua)(hua)),消(xiao)化(hua)(hua)(hua)好后加(jia)入(ru)(ru)3ml*培(pei)(pei)養基終止消(xiao)化(hua)(hua)(hua)。用移液槍輕(qing)(qing)輕(qing)(qing)吹打瓶壁(bi)上的(de)細(xi)胞(bao),使之(zhi)*脫落,然(ran)后收集細(xi)胞(bao)懸(xuan)液,1200rpm離心3min,棄(qi)上清,加(jia)入(ru)(ru)*培(pei)(pei)養基重懸(xuan)細(xi)胞(bao),進行傳代。
保(bao)存說明(ming):
凍存條件(jian):80%*培(pei)養基+10%FBS+10%DMSO
(備(bei)注:建(jian)議使用本公(gong)司的(de)冷凍液(H-W-100),用4度保(bao)存(cun)的(de)冷凍液直(zhi)接重懸細(xi)胞,不能預熱后使用。)
保存條件:液氮(dan)存儲
常見問(wen)題說明:
1.培養瓶(ping)有破裂,培養液有漏(lou)液:細胞極大可能(neng)會污染,所以(yi)我們會及(ji)時安(an)排幫老師(shi)解決。
2.收到細胞后(hou)盡快更換為含(han) 10%血清(qing)的(de)新鮮培(pei)(pei)養基(ji),如因(yin)特殊(shu)情(qing)況需(xu)要繼續使(shi)用(yong)原(yuan)瓶(ping)培(pei)(pei)養基(ji),請(qing)在原(yuan)瓶(ping)培(pei)(pei)養基(ji)中額外(wai)添(tian)加(jia) 10%的(de)血清(qing)(原(yuan)瓶(ping)培(pei)(pei)養基(ji)的(de)繼續使(shi)用(yong)時(shi)間zui長不(bu)宜超過 72 小時(shi))
3.細(xi)(xi)(xi)胞(bao)漂浮:培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)瓶(ping)不(bu)(bu)開封,瓶(ping)口酒精擦拭后平躺(tang)放置在培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)箱。1-2小(xiao)時后觀(guan)察(cha),如細(xi)(xi)(xi)胞(bao)大部分又貼回瓶(ping)底(di),表(biao)明細(xi)(xi)(xi)胞(bao)活力正常(chang),剩余(yu)漂浮的細(xi)(xi)(xi)胞(bao)可以去掉,留8-10ml培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)液(ye)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)觀(guan)察(cha),細(xi)(xi)(xi)胞(bao)生(sheng)長至(zhi)匯合度80%,進行消化傳代;如細(xi)(xi)(xi)胞(bao)還(huan)是不(bu)(bu)貼壁,將細(xi)(xi)(xi)胞(bao)離心收集(ji)轉到新(xin)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)瓶(ping),原培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)瓶(ping)加部分培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)液(ye)繼(ji)續培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang),中間注意觀(guan)察(cha),我們的技術(shu)人員會一(yi)直跟蹤指導,直到問題解(jie)決。
供應商(shang):慧(hui)穎細胞(bao)庫 人源(yuan)均來自于第三方str鑒(jian)定,請放心購買
供應限制:僅(jin)供科研(yan)使用
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SUER1251(XR) HT-144細胞(bao), 1×106 1ml/T25 詢價(jia)/元
SUER1252(XR) HT-29細(xi)胞,腺癌(ai)細(xi)胞 1×106 1ml/T25 詢價(jia)/元(yuan)
SUER1253(XR) HT55細胞,腺癌細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1254(XR) HTK-細胞,漿細胞骨(gu)髓瘤 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1255(XR) HuCCT1細胞, 1×106 1ml/T25 詢(xun)價/元(yuan)
SUER1256(XR) HuG1-N細(xi)胞, 1×106 1ml/T25 詢(xun)價/元(yuan)
SUER1257(XR) huH-1細胞(bao),肝癌細胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1258(XR) HuH28細胞, 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1259(XR) HuH-6細胞,肝母細胞瘤細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元(yuan)
SUER1260(XR) HuH-7細(xi)胞,肝癌細(xi)胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1261(XR) HuNS1細(xi)胞(bao), 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1262(XR) HUP-T3細胞, 1×106 1ml/T25 詢價/元(yuan)
SUER1263(XR) HUP-T4細(xi)胞, 1×106 1ml/T25 詢(xun)價/元(yuan)
SUER1264(XR) HuT 102細胞,霉菌病fungoides-Sezary綜合癥細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1939(XR) NCM460細胞 1×106 1ml/T25 詢價(jia)/元
SUER1940(XR) NHEK細胞(bao),正常人皮膚(fu)角(jiao)質細胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢價/元(yuan)
SUER1941(XR) SH-EP1細(xi)胞,神經(jing)母細(xi)胞瘤細(xi)胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1942(XR) SGC7901/ADR細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1943(XR) TA-K細(xi)胞,人甲狀(zhuang)腺未分(fen)化癌(ai)細(xi)胞 1×106 1ml/T25 詢價/元(yuan)
SUER1944(XR) TAM-1細(xi)胞(bao),人涎(xian)腺腺樣囊(nang)性癌細(xi)胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1945(XR) NHBE細(xi)胞(bao),人(ren)正常支氣管(guan)上(shang)皮細(xi)胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢價/元