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細胞名稱:HCT116人結腸癌細胞
貨(huo)號:H017
種屬:人
細胞來源:從ATCC/中(zhong)科(ke)院/協和醫院等地引進
生長特性:貼壁(bi) 上皮(pi)樣
培(pei)(pei)養條件(jian):培(pei)(pei)養基:90%MCCOY’+10%FBS(推薦(jian)使(shi)用(yong)HAKATA優等胎牛(niu)血(xue)清HN-FBS-50)
溫度:37℃
氣(qi)相:95%空氣(qi),5%二氧(yang)化碳
傳(chuan)代說明(ming):
1.用75%酒精噴灑(sa)整(zheng)個培(pei)養(yang)(yang)瓶(ping)消(xiao)毒,將其平躺置(zhi)于培(pei)養(yang)(yang)箱中(zhong)進行1-3小時的(de)(de)緩(huan)沖(chong),.然后置(zhi)于無菌(jun)操作臺,打開瓶(ping)口,將其中(zhong)的(de)(de)培(pei)養(yang)(yang)液(ye)去掉,再(zai)往其中(zhong)加(jia)入5-6mL新鮮(xian)培(pei)養(yang)(yang)基(以(yi)T25培(pei)養(yang)(yang)瓶(ping)為例)并置(zhi)于細(xi)(xi)胞培(pei)養(yang)(yang)箱中(zhong)培(pei)養(yang)(yang),根據細(xi)(xi)胞生長狀況及(ji)培(pei)養(yang)(yang)基顏(yan)色(se)變化(hua)對其進行換(huan)液(ye)以(yi)及(ji)傳(chuan)代,一般2到3天(tian)換(huan)一次液(ye);
2.待細胞長(chang)滿瓶底面(mian)積80%-90%,需要對其進(jin)行傳代(dai),傳代(dai)比例為1:3到(dao)1:8;
3傳(chuan)代步驟(zou):將0.25%胰酶(mei)-0.53 mM EDTA消化(hua)液(ye)置(zhi)于(yu)37°預熱(re),倒掉(diao)培(pei)養(yang)(yang)瓶(ping)中的培(pei)養(yang)(yang)基(ji),往(wang)培(pei)養(yang)(yang)瓶(ping)中加入3-5 ml PBS,輕(qing)(qing)晃洗滌后棄去。往(wang)瓶(ping)中加1-2 ml預熱(re)好的胰酶(mei),置(zhi)于(yu)37°孵育消化(hua)(次消化(hua)需時(shi)常取(qu)出置(zhi)于(yu)顯(xian)微鏡下(xia)觀察,以顯(xian)微鏡下(xia)細(xi)胞(bao)觸(chu)角回收變圓、輕(qing)(qing)拍(pai)瓶(ping)壁見細(xi)胞(bao)脫落(luo)為*消化(hua)時(shi)間,記錄*消化(hua)時(shi)間,以便于(yu)下(xia)次消化(hua)),消化(hua)好后加入3ml*培(pei)養(yang)(yang)基(ji)終止(zhi)消化(hua)。用(yong)移液(ye)槍輕(qing)(qing)輕(qing)(qing)吹打瓶(ping)壁上的細(xi)胞(bao),使之*脫落(luo),然后收集(ji)細(xi)胞(bao)懸液(ye),1200rpm離心(xin)3min,棄上清,加入*培(pei)養(yang)(yang)基(ji)重(zhong)懸細(xi)胞(bao),進行傳(chuan)代。
保存說(shuo)明:
凍(dong)存(cun)條(tiao)件:80%*培養基+10%FBS+10%DMSO
(備注:建議使用本公司的(de)冷凍(dong)液(H-W-100),用4度保(bao)存(cun)的(de)冷凍(dong)液直接(jie)重懸細胞,不能預熱后使用。)
保存(cun)條件(jian):液氮存(cun)儲
常見問(wen)題說(shuo)明:
1.培養瓶有破(po)裂,培養液(ye)有漏液(ye):細胞極大可能會污染,所以我們會及時安排幫老師解決。
2.收到細胞后盡快更換為含 10%血(xue)清的(de)新鮮培(pei)養(yang)基(ji),如因特殊情況需要繼續使用(yong)原瓶(ping)(ping)培(pei)養(yang)基(ji),請(qing)在原瓶(ping)(ping)培(pei)養(yang)基(ji)中額外(wai)添(tian)加 10%的(de)血(xue)清(原瓶(ping)(ping)培(pei)養(yang)基(ji)的(de)繼續使用(yong)時間zui長(chang)不(bu)宜超過 72 小時)
3.細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)漂浮:培(pei)養(yang)(yang)(yang)瓶不開封,瓶口(kou)酒精(jing)擦拭后平躺放置在培(pei)養(yang)(yang)(yang)箱(xiang)。1-2小時后觀(guan)察,如細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)大部(bu)分又貼回瓶底(di),表明細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)活力正常,剩(sheng)余漂浮的細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)可以去掉,留8-10ml培(pei)養(yang)(yang)(yang)液培(pei)養(yang)(yang)(yang)觀(guan)察,細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)生長至匯合度80%,進行消化(hua)傳代;如細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)還是不貼壁,將細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)離心收集轉到(dao)新培(pei)養(yang)(yang)(yang)瓶,原培(pei)養(yang)(yang)(yang)瓶加部(bu)分培(pei)養(yang)(yang)(yang)液繼(ji)續培(pei)養(yang)(yang)(yang),中間(jian)注(zhu)意觀(guan)察,我們(men)的技術人員(yuan)會一直跟(gen)蹤指(zhi)導,直到(dao)問(wen)題解決。
供應(ying)商(shang):慧穎(ying)細胞庫 人源均來自(zi)于第三方(fang)str鑒定,請(qing)放心購買
供應限制:僅(jin)供科(ke)研(yan)使用
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SUER1174(XR) HEC-265細(xi)胞,星形(xing)細(xi)胞瘤細(xi)胞 1×106 1ml/T25 詢(xun)價/元(yuan)
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SUER1252(XR) HT-29細(xi)胞(bao),腺(xian)癌細(xi)胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1253(XR) HT55細胞,腺癌細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1254(XR) HTK-細胞,漿細胞骨髓瘤 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1255(XR) HuCCT1細胞(bao), 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1256(XR) HuG1-N細胞, 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1257(XR) huH-1細(xi)胞,肝癌細(xi)胞 1×106 1ml/T25 詢價/元(yuan)
SUER1258(XR) HuH28細胞, 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1259(XR) HuH-6細(xi)胞,肝(gan)母細(xi)胞瘤(liu)細(xi)胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1260(XR) HuH-7細(xi)胞,肝癌(ai)細(xi)胞 1×106 1ml/T25 詢(xun)價/元(yuan)
SUER1261(XR) HuNS1細胞, 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1262(XR) HUP-T3細胞(bao), 1×106 1ml/T25 詢(xun)價/元
SUER1263(XR) HUP-T4細(xi)胞, 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1264(XR) HuT 102細胞(bao),霉(mei)菌(jun)病fungoides-Sezary綜合(he)癥細胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1939(XR) NCM460細(xi)胞 1×106 1ml/T25 詢價(jia)/元
SUER1940(XR) NHEK細胞,正(zheng)常人皮膚角質細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元(yuan)
SUER1941(XR) SH-EP1細胞(bao),神經母細胞(bao)瘤細胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1942(XR) SGC7901/ADR細(xi)胞 1×106 1ml/T25 詢價(jia)/元
SUER1943(XR) TA-K細(xi)胞,人(ren)甲狀腺未分化癌細(xi)胞 1×106 1ml/T25 詢價(jia)/元(yuan)
SUER1944(XR) TAM-1細胞,人涎腺腺樣囊性癌細胞 1×106 1ml/T25 詢價(jia)/元
SUER1945(XR) NHBE細胞,人正常(chang)支氣(qi)管(guan)上皮細胞 1×106 1ml/T25 詢價(jia)/元(yuan)