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細(xi)胞(bao)名(ming)稱(cheng):HEK293人(ren)胚腎細(xi)胞(bao)
貨號:H018
種屬:人
細胞來源:從ATCC/中科院(yuan)(yuan)/協和醫(yi)院(yuan)(yuan)等地(di)引進(jin)
生長特性:貼壁(bi) 上皮樣
培養(yang)(yang)條件:培養(yang)(yang)基:90%DMEM(H)+10%FBS+2mM L谷(gu)氨酰(xian)胺(推薦(jian)使用(yong)HAKATA優等胎牛血(xue)清HN-FBS-50)
溫度(du):37℃
氣相:95%空氣,5%二氧化碳
傳(chuan)代說明:
1.用75%酒精噴(pen)灑整個培(pei)養(yang)(yang)瓶消毒,將其平躺置(zhi)(zhi)于(yu)培(pei)養(yang)(yang)箱中(zhong)進行1-3小時的緩沖,.然(ran)后置(zhi)(zhi)于(yu)無菌操(cao)作臺,打開瓶口,將其中(zhong)的培(pei)養(yang)(yang)液去掉(diao),再往其中(zhong)加(jia)入(ru)5-6mL新鮮培(pei)養(yang)(yang)基(以T25培(pei)養(yang)(yang)瓶為例(li))并置(zhi)(zhi)于(yu)細胞(bao)培(pei)養(yang)(yang)箱中(zhong)培(pei)養(yang)(yang),根據細胞(bao)生長狀(zhuang)況及培(pei)養(yang)(yang)基顏(yan)色變化對其進行換(huan)液以及傳代,一般2到3天換(huan)一次液;
2.待細胞長滿瓶底面(mian)積80%-90%,需要對其進行傳(chuan)代(dai),傳(chuan)代(dai)比例為(wei)1:3到1:8;
3傳(chuan)(chuan)代(dai)步驟:將0.25%胰(yi)酶-0.53 mM EDTA消(xiao)(xiao)化(hua)液置(zhi)于(yu)(yu)37°預(yu)熱,倒掉培(pei)養瓶(ping)中的培(pei)養基,往培(pei)養瓶(ping)中加入(ru)(ru)3-5 ml PBS,輕(qing)晃洗滌后(hou)(hou)棄去。往瓶(ping)中加1-2 ml預(yu)熱好的胰(yi)酶,置(zhi)于(yu)(yu)37°孵育消(xiao)(xiao)化(hua)(次消(xiao)(xiao)化(hua)需(xu)時常取出置(zhi)于(yu)(yu)顯微鏡(jing)下觀察,以顯微鏡(jing)下細胞(bao)觸角(jiao)回收(shou)變(bian)圓、輕(qing)拍瓶(ping)壁(bi)見細胞(bao)脫(tuo)落為*消(xiao)(xiao)化(hua)時間,記錄*消(xiao)(xiao)化(hua)時間,以便于(yu)(yu)下次消(xiao)(xiao)化(hua)),消(xiao)(xiao)化(hua)好后(hou)(hou)加入(ru)(ru)3ml*培(pei)養基終(zhong)止消(xiao)(xiao)化(hua)。用移(yi)液槍(qiang)輕(qing)輕(qing)吹打瓶(ping)壁(bi)上的細胞(bao),使(shi)之(zhi)*脫(tuo)落,然后(hou)(hou)收(shou)集細胞(bao)懸液,1200rpm離心3min,棄上清(qing),加入(ru)(ru)*培(pei)養基重懸細胞(bao),進(jin)行傳(chuan)(chuan)代(dai)。
保存說明(ming):
凍存條件:80%*培養基+10%FBS+10%DMSO
(備注:建議使用本公司的冷(leng)凍液(H-W-100),用4度保存(cun)的冷(leng)凍液直(zhi)接重懸細胞,不(bu)能預(yu)熱后(hou)使用。)
保存條件:液氮存儲
常見(jian)問題說明(ming):
1.培養瓶有破裂,培養液有漏液:細(xi)胞極(ji)大可能會污染,所(suo)以我們會及時安(an)排(pai)幫老師(shi)解決。
2.收到細胞后盡快更換為含 10%血清(qing)的新鮮培(pei)養(yang)基(ji),如因特殊情(qing)況需要繼(ji)續使(shi)用原瓶培(pei)養(yang)基(ji),請在原瓶培(pei)養(yang)基(ji)中額外(wai)添加 10%的血清(qing)(原瓶培(pei)養(yang)基(ji)的繼(ji)續使(shi)用時間(jian)zui長不宜(yi)超過 72 小時)
3.細(xi)(xi)胞(bao)漂浮:培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)瓶不開(kai)封,瓶口酒精(jing)擦拭后平躺(tang)放置在培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)箱。1-2小(xiao)時后觀察,如細(xi)(xi)胞(bao)大部(bu)分又貼回瓶底(di),表明細(xi)(xi)胞(bao)活力正常,剩(sheng)余漂浮的(de)(de)細(xi)(xi)胞(bao)可以去掉,留8-10ml培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)液培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)觀察,細(xi)(xi)胞(bao)生長至(zhi)匯合度80%,進行消化傳代(dai);如細(xi)(xi)胞(bao)還是不貼壁,將細(xi)(xi)胞(bao)離心收集轉到(dao)(dao)新培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)瓶,原培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)瓶加部(bu)分培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)液繼續培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang),中間注意觀察,我們(men)的(de)(de)技術人(ren)員會(hui)一直(zhi)跟(gen)蹤指(zhi)導,直(zhi)到(dao)(dao)問題解決。
供應商(shang):慧穎(ying)細(xi)胞庫 人源(yuan)均來自(zi)于第三方str鑒定(ding),請放心購買
供應限制:僅供科研使用(yong)
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SUER0949(XR) BDCM細(xi)(xi)胞(bao),急性(xing)淋巴細(xi)(xi)胞(bao)B細(xi)(xi)胞(bao)白血病細(xi)(xi)胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢價(jia)/元
SUER0950(XR) Becker細(xi)(xi)胞,星(xing)形細(xi)(xi)胞瘤(liu)分(fen)級(ji)IV細(xi)(xi)胞 1×106 1ml/T25 詢價(jia)/元
SUER0951(XR) BEN細胞, 1×106 1ml/T25 詢價(jia)/元
SUER0952(XR) BFTC-905細(xi)(xi)(xi)胞,移行細(xi)(xi)(xi)胞癌細(xi)(xi)(xi)胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
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SUER0954(XR) BHT-101細(xi)胞,未分化癌細(xi)胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER0955(XR) BHY細(xi)胞,鱗(lin)狀(zhuang)細(xi)胞癌(ai),扁(bian)平上皮癌(ai)細(xi)胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER0956(XR) BICR 16細胞,鱗狀細胞癌,扁平上皮癌細胞 1×106 1ml/T25 詢價(jia)/元
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SUER0960(XR) BICR 56細(xi)胞(bao),鱗狀細(xi)胞(bao)癌,扁平上皮(pi)癌細(xi)胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢價(jia)/元(yuan)
SUER0961(XR) BICR 6細胞,鱗狀細胞癌(ai),扁平上皮癌(ai)細胞 1×106 1ml/T25 詢(xun)價(jia)/元
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SUER1162(XR) HCC-95細(xi)胞(bao)(bao),鱗狀細(xi)胞(bao)(bao)癌(ai),扁平上皮癌(ai)細(xi)胞(bao)(bao) 1×106 1ml/T25 詢價/元
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SUER1167(XR) HD-MY-Z細胞(bao),霍奇金淋(lin)巴瘤(liu)細胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢價/元
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SUER1171(XR) HEC-1-A細胞,星形細胞瘤細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
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SUER1187(XR) HL-60細(xi)胞,急(ji)性髓性白血病(bing)細(xi)胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
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SUER1256(XR) HuG1-N細胞, 1×106 1ml/T25 詢價/元(yuan)
SUER1257(XR) huH-1細(xi)胞,肝癌(ai)細(xi)胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1258(XR) HuH28細(xi)胞, 1×106 1ml/T25 詢(xun)價(jia)/元
SUER1259(XR) HuH-6細(xi)胞,肝母細(xi)胞瘤細(xi)胞 1×106 1ml/T25 詢價/元(yuan)
SUER1260(XR) HuH-7細(xi)胞(bao),肝癌細(xi)胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢價(jia)/元
SUER1261(XR) HuNS1細胞, 1×106 1ml/T25 詢價(jia)/元
SUER1262(XR) HUP-T3細(xi)胞, 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1263(XR) HUP-T4細胞, 1×106 1ml/T25 詢(xun)價/元(yuan)
SUER1264(XR) HuT 102細(xi)胞,霉(mei)菌病fungoides-Sezary綜合(he)癥細(xi)胞 1×106 1ml/T25 詢價/元(yuan)
SUER1939(XR) NCM460細胞 1×106 1ml/T25 詢(xun)價/元
SUER1940(XR) NHEK細(xi)胞(bao),正常人皮(pi)膚角質細(xi)胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢價/元(yuan)
SUER1941(XR) SH-EP1細(xi)(xi)胞,神(shen)經母(mu)細(xi)(xi)胞瘤細(xi)(xi)胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1942(XR) SGC7901/ADR細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1943(XR) TA-K細胞,人(ren)甲狀腺未(wei)分化癌細胞 1×106 1ml/T25 詢價(jia)/元
SUER1944(XR) TAM-1細(xi)胞(bao),人涎腺腺樣(yang)囊性癌細(xi)胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1945(XR) NHBE細(xi)胞(bao),人正(zheng)常(chang)支氣(qi)管上皮細(xi)胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢價/元