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細(xi)胞名稱:HGC27 人胃癌細(xi)胞(未分化(hua))
貨(huo)號:H020
種屬:人
細胞來源:從ATCC/中(zhong)科院(yuan)/協和醫院(yuan)等地引進
生(sheng)長特性:貼壁 上皮樣
培(pei)養條件(jian):培(pei)養基(ji):90%DMEM(H)+10%FBS(推薦使用HAKATA優(you)等(deng)胎牛血清HN-FBS-50)
溫(wen)度:37℃
氣相:95%空氣,5%二氧化碳
傳代說明:
1.用75%酒精噴灑整個培(pei)(pei)養(yang)(yang)瓶消毒,將(jiang)其(qi)平(ping)躺(tang)置于(yu)(yu)(yu)培(pei)(pei)養(yang)(yang)箱中進行(xing)1-3小(xiao)時的(de)(de)緩沖,.然后置于(yu)(yu)(yu)無菌操作臺(tai),打開瓶口,將(jiang)其(qi)中的(de)(de)培(pei)(pei)養(yang)(yang)液(ye)去掉(diao),再往其(qi)中加入5-6mL新(xin)鮮培(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)(以T25培(pei)(pei)養(yang)(yang)瓶為例)并(bing)置于(yu)(yu)(yu)細胞培(pei)(pei)養(yang)(yang)箱中培(pei)(pei)養(yang)(yang),根(gen)據細胞生(sheng)長狀況及培(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)顏色變化對其(qi)進行(xing)換液(ye)以及傳代,一般2到3天換一次(ci)液(ye);
2.待(dai)細(xi)胞(bao)長滿瓶底(di)面積80%-90%,需要對(dui)其進行傳(chuan)代(dai),傳(chuan)代(dai)比例為1:3到1:8;
3傳代(dai)步驟:將0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化(hua)液(ye)置于37°預(yu)熱,倒(dao)掉培養(yang)(yang)瓶中(zhong)的培養(yang)(yang)基(ji),往(wang)培養(yang)(yang)瓶中(zhong)加(jia)入3-5 ml PBS,輕(qing)晃洗滌(di)后棄(qi)去。往(wang)瓶中(zhong)加(jia)1-2 ml預(yu)熱好的胰酶,置于37°孵(fu)育消化(hua)(次消化(hua)需時(shi)(shi)常(chang)取出置于顯(xian)微鏡(jing)下觀(guan)察,以(yi)顯(xian)微鏡(jing)下細(xi)(xi)胞(bao)觸角回收變圓(yuan)、輕(qing)拍瓶壁見(jian)細(xi)(xi)胞(bao)脫(tuo)(tuo)落(luo)為(wei)*消化(hua)時(shi)(shi)間,記錄*消化(hua)時(shi)(shi)間,以(yi)便于下次消化(hua)),消化(hua)好后加(jia)入3ml*培養(yang)(yang)基(ji)終(zhong)止消化(hua)。用(yong)移液(ye)槍輕(qing)輕(qing)吹打瓶壁上(shang)的細(xi)(xi)胞(bao),使之*脫(tuo)(tuo)落(luo),然(ran)后收集細(xi)(xi)胞(bao)懸液(ye),1200rpm離(li)心(xin)3min,棄(qi)上(shang)清(qing),加(jia)入*培養(yang)(yang)基(ji)重懸細(xi)(xi)胞(bao),進行(xing)傳代(dai)。
保存說明:
凍存條件:80%*培養基+10%FBS+10%DMSO
(備(bei)注:建議使用本公司(si)的(de)冷凍液(H-W-100),用4度保存的(de)冷凍液直接(jie)重懸細胞,不能預(yu)熱后使用。)
保存條件(jian):液(ye)氮存儲(chu)
常見問題說明:
1.培(pei)養瓶有破裂,培(pei)養液有漏液:細胞極大可(ke)能會污染,所以我(wo)們會及時安排(pai)幫老(lao)師解決。
2.收到(dao)細(xi)胞后盡快(kuai)更換為含 10%血清的新鮮培養基,如因特殊情況需要繼續使用原瓶培養基,請在原瓶培養基中(zhong)額(e)外(wai)添加 10%的血清(原瓶培養基的繼續使用時間zui長不(bu)宜(yi)超過 72 小(xiao)時)
3.細胞(bao)漂(piao)浮:培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)瓶不開封,瓶口(kou)酒精擦拭后平躺放(fang)置(zhi)在培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)箱(xiang)。1-2小(xiao)時后觀察,如(ru)細胞(bao)大部(bu)分又貼回(hui)瓶底(di),表明細胞(bao)活力正常,剩余漂(piao)浮的(de)細胞(bao)可以去掉,留8-10ml培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)液(ye)培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)觀察,細胞(bao)生長至匯合度80%,進行消化傳代;如(ru)細胞(bao)還(huan)是不貼壁,將(jiang)細胞(bao)離心(xin)收(shou)集(ji)轉到新(xin)培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)瓶,原(yuan)培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)瓶加部(bu)分培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)液(ye)繼續培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang),中間(jian)注意(yi)觀察,我們(men)的(de)技(ji)術人員會(hui)一直跟蹤指導,直到問(wen)題解決。
供(gong)應(ying)商:慧穎細胞(bao)庫(ku) 人(ren)源均來自于(yu)第三方str鑒(jian)定,請放心購(gou)買(mai)
供(gong)應限制:僅供(gong)科研使用
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SUER1260(XR) HuH-7細胞,肝癌細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1261(XR) HuNS1細胞, 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1262(XR) HUP-T3細胞, 1×106 1ml/T25 詢(xun)價(jia)/元
SUER1263(XR) HUP-T4細胞(bao), 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1264(XR) HuT 102細胞,霉菌病fungoides-Sezary綜(zong)合癥細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1939(XR) NCM460細(xi)胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1940(XR) NHEK細胞,正(zheng)常(chang)人(ren)皮(pi)膚角質細胞 1×106 1ml/T25 詢價(jia)/元
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SUER1945(XR) NHBE細胞,人正常支氣管上皮(pi)細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元