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細胞名稱:LOVO 人結腸癌細胞
貨(huo)號:H025
種屬:人(ren)
細胞來(lai)源(yuan):從ATCC/中科院/協和醫院等地引進
生(sheng)長特性:貼壁 上皮樣
培養條(tiao)件:培養基:90%F-12K+10%FBS(推薦使用HAKATA優等胎(tai)牛血清HN-FBS-50)
溫(wen)度(du):37℃
氣(qi)相(xiang):95%空(kong)氣(qi),5%二氧化碳
傳(chuan)代說明:
1.用75%酒精噴灑(sa)整個培(pei)(pei)(pei)養(yang)瓶消(xiao)毒,將其(qi)平躺置于(yu)培(pei)(pei)(pei)養(yang)箱中進行1-3小時的(de)(de)緩沖,.然(ran)后(hou)置于(yu)無菌操(cao)作(zuo)臺,打(da)開瓶口(kou),將其(qi)中的(de)(de)培(pei)(pei)(pei)養(yang)液(ye)去(qu)掉,再往其(qi)中加入(ru)5-6mL新鮮(xian)培(pei)(pei)(pei)養(yang)基(以T25培(pei)(pei)(pei)養(yang)瓶為(wei)例)并置于(yu)細胞培(pei)(pei)(pei)養(yang)箱中培(pei)(pei)(pei)養(yang),根據細胞生長狀況及培(pei)(pei)(pei)養(yang)基顏色變(bian)化對(dui)其(qi)進行換液(ye)以及傳代,一般2到3天換一次液(ye);
2.待細胞長滿瓶底面積80%-90%,需要對其進行傳代(dai),傳代(dai)比例(li)為1:3到1:8;
3傳(chuan)代步驟(zou):將(jiang)0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消(xiao)(xiao)(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)液置(zhi)于37°預熱,倒掉培(pei)(pei)養瓶(ping)(ping)中(zhong)的培(pei)(pei)養基,往培(pei)(pei)養瓶(ping)(ping)中(zhong)加(jia)入(ru)3-5 ml PBS,輕晃洗滌(di)后(hou)棄去(qu)。往瓶(ping)(ping)中(zhong)加(jia)1-2 ml預熱好(hao)的胰酶,置(zhi)于37°孵育消(xiao)(xiao)(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)(次(ci)消(xiao)(xiao)(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)需(xu)時(shi)常(chang)取出(chu)置(zhi)于顯微鏡下(xia)觀察(cha),以顯微鏡下(xia)細胞(bao)(bao)觸角回收變圓、輕拍瓶(ping)(ping)壁見細胞(bao)(bao)脫(tuo)落為*消(xiao)(xiao)(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)時(shi)間,記錄*消(xiao)(xiao)(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)時(shi)間,以便于下(xia)次(ci)消(xiao)(xiao)(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)),消(xiao)(xiao)(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)好(hao)后(hou)加(jia)入(ru)3ml*培(pei)(pei)養基終止消(xiao)(xiao)(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)。用移液槍輕輕吹打瓶(ping)(ping)壁上(shang)的細胞(bao)(bao),使之*脫(tuo)落,然(ran)后(hou)收集(ji)細胞(bao)(bao)懸液,1200rpm離心(xin)3min,棄上(shang)清,加(jia)入(ru)*培(pei)(pei)養基重懸細胞(bao)(bao),進(jin)行傳(chuan)代。
保存(cun)說明:
凍存條(tiao)件:80%*培養基+10%FBS+10%DMSO
(備注:建議使用本公司的冷凍(dong)液(H-W-100),用4度保存的冷凍(dong)液直接(jie)重(zhong)懸細胞,不(bu)能預熱后使用。)
保存條件:液(ye)氮存儲
常(chang)見問(wen)題說明:
1.培養瓶(ping)有(you)破裂,培養液有(you)漏(lou)液:細胞極大(da)可能(neng)會(hui)污染,所以我(wo)們會(hui)及時安排幫老師解(jie)決。
2.收到細胞后盡快更換為含 10%血清(qing)的新鮮培(pei)養(yang)基,如因特(te)殊情況需要繼續使用(yong)原(yuan)瓶培(pei)養(yang)基,請在(zai)原(yuan)瓶培(pei)養(yang)基中(zhong)額外添(tian)加 10%的血清(qing)(原(yuan)瓶培(pei)養(yang)基的繼續使用(yong)時(shi)間zui長不宜超過 72 小(xiao)時(shi))
3.細(xi)(xi)胞(bao)漂(piao)浮(fu):培養(yang)(yang)瓶(ping)不(bu)開封,瓶(ping)口酒精擦拭后平躺放置在培養(yang)(yang)箱。1-2小時后觀察(cha),如(ru)細(xi)(xi)胞(bao)大(da)部分又貼回瓶(ping)底,表(biao)明(ming)細(xi)(xi)胞(bao)活(huo)力正常(chang),剩余漂(piao)浮(fu)的(de)細(xi)(xi)胞(bao)可以去(qu)掉,留8-10ml培養(yang)(yang)液培養(yang)(yang)觀察(cha),細(xi)(xi)胞(bao)生(sheng)長至(zhi)匯合度80%,進行消化(hua)傳代;如(ru)細(xi)(xi)胞(bao)還(huan)是不(bu)貼壁,將細(xi)(xi)胞(bao)離心收集轉到新培養(yang)(yang)瓶(ping),原培養(yang)(yang)瓶(ping)加部分培養(yang)(yang)液繼續培養(yang)(yang),中間(jian)注意觀察(cha),我們的(de)技術人員會一(yi)直跟蹤指導,直到問題解決。
供應商:慧穎細胞庫(ku) 人源均來自于(yu)第三方str鑒定,請放(fang)心購(gou)買
供應限(xian)制(zhi):僅供科研使用
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SUER1259(XR) HuH-6細(xi)胞,肝母細(xi)胞瘤細(xi)胞 1×106 1ml/T25 詢價(jia)/元
SUER1260(XR) HuH-7細(xi)胞(bao),肝(gan)癌細(xi)胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢(xun)價/元(yuan)
SUER1261(XR) HuNS1細胞, 1×106 1ml/T25 詢(xun)價/元
SUER1262(XR) HUP-T3細胞, 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1263(XR) HUP-T4細胞(bao), 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1264(XR) HuT 102細胞,霉菌病fungoides-Sezary綜合癥(zheng)細胞 1×106 1ml/T25 詢價(jia)/元
SUER1939(XR) NCM460細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1940(XR) NHEK細胞,正(zheng)常人皮膚(fu)角質細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1941(XR) SH-EP1細(xi)胞,神經母細(xi)胞瘤細(xi)胞 1×106 1ml/T25 詢價/元(yuan)
SUER1942(XR) SGC7901/ADR細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1943(XR) TA-K細胞,人甲狀腺(xian)未分化(hua)癌細胞 1×106 1ml/T25 詢價(jia)/元(yuan)
SUER1944(XR) TAM-1細胞,人涎腺腺樣囊性(xing)癌細胞 1×106 1ml/T25 詢價(jia)/元
SUER1945(XR) NHBE細胞,人(ren)正常支氣(qi)管上皮細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元