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細胞(bao)名(ming)稱:MCF-7 人乳(ru)腺癌(ai)細胞(bao)
貨號:H027
種屬:人(ren)
細胞來源:從(cong)ATCC/中(zhong)科院/協和醫(yi)院等地引(yin)進
生長特性:貼壁 上皮樣
培養條件(jian):培養基:90%DMEM+10%FBS+10μg/ml 重組人胰(yi)島素
溫度:37℃
氣(qi)相:95%空氣(qi),5%二(er)氧化碳
傳代說明:
1.用75%酒精噴灑(sa)整個(ge)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)瓶消毒,將其(qi)平躺置(zhi)(zhi)于培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)箱中(zhong)進(jin)行1-3小時的緩沖,.然后置(zhi)(zhi)于無菌操作臺,打開瓶口,將其(qi)中(zhong)的培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)液(ye)去掉,再往其(qi)中(zhong)加入(ru)5-6mL新(xin)鮮培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)基(以(yi)T25培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)瓶為例)并置(zhi)(zhi)于細(xi)胞(bao)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)箱中(zhong)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang),根(gen)據細(xi)胞(bao)生長狀況及培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)基顏色(se)變化對(dui)其(qi)進(jin)行換液(ye)以(yi)及傳(chuan)代,一般2到(dao)3天換一次液(ye);
2.待細胞長滿瓶底面積80%-90%,需(xu)要對其進行傳代,傳代比例為1:3到1:8;
3傳代步驟:將0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化(hua)(hua)液(ye)(ye)置(zhi)于37°預(yu)熱,倒掉培養(yang)(yang)瓶中(zhong)的(de)培養(yang)(yang)基(ji),往培養(yang)(yang)瓶中(zhong)加入3-5 ml PBS,輕(qing)晃(huang)洗滌(di)后棄(qi)去。往瓶中(zhong)加1-2 ml預(yu)熱好(hao)的(de)胰酶,置(zhi)于37°孵育消化(hua)(hua)(次(ci)消化(hua)(hua)需時常(chang)取出(chu)置(zhi)于顯(xian)微鏡下觀察,以顯(xian)微鏡下細(xi)胞觸角(jiao)回收變圓、輕(qing)拍瓶壁見細(xi)胞脫(tuo)落(luo)為*消化(hua)(hua)時間,記錄*消化(hua)(hua)時間,以便(bian)于下次(ci)消化(hua)(hua)),消化(hua)(hua)好(hao)后加入3ml*培養(yang)(yang)基(ji)終止消化(hua)(hua)。用(yong)移液(ye)(ye)槍(qiang)輕(qing)輕(qing)吹打瓶壁上的(de)細(xi)胞,使之*脫(tuo)落(luo),然后收集細(xi)胞懸(xuan)液(ye)(ye),1200rpm離心3min,棄(qi)上清,加入*培養(yang)(yang)基(ji)重懸(xuan)細(xi)胞,進行傳代。
保存說明:
凍存(cun)條件:80%*培養基(ji)+10%FBS+10%DMSO
(備注:建議使用本公司的冷凍液(H-W-100),用4度保(bao)存(cun)的冷凍液直接重(zhong)懸細胞,不能預熱后使用。)
保存(cun)條件:液(ye)氮(dan)存(cun)儲
常見問題(ti)說明:
1.培(pei)養瓶有破裂,培(pei)養液有漏液:細(xi)胞極大可能會污(wu)染,所(suo)以(yi)我們(men)會及時安(an)排幫老師解決。
2.收到細胞后盡(jin)快更換為含 10%血(xue)清的(de)新鮮培(pei)(pei)養基(ji),如因(yin)特殊情況需(xu)要繼續使(shi)用原(yuan)(yuan)瓶培(pei)(pei)養基(ji),請在(zai)原(yuan)(yuan)瓶培(pei)(pei)養基(ji)中(zhong)額外(wai)添加(jia) 10%的(de)血(xue)清(原(yuan)(yuan)瓶培(pei)(pei)養基(ji)的(de)繼續使(shi)用時(shi)間zui長(chang)不宜超過 72 小時(shi))
3.細(xi)胞(bao)(bao)漂浮(fu):培(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)瓶不(bu)開封,瓶口(kou)酒精擦(ca)拭后平躺放置在培(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)箱。1-2小時后觀(guan)察,如細(xi)胞(bao)(bao)大(da)部分(fen)又貼回瓶底,表明細(xi)胞(bao)(bao)活力正常,剩(sheng)余漂浮(fu)的細(xi)胞(bao)(bao)可以去掉,留(liu)8-10ml培(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)液培(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)觀(guan)察,細(xi)胞(bao)(bao)生長至匯合度80%,進行消化傳代;如細(xi)胞(bao)(bao)還是不(bu)貼壁,將細(xi)胞(bao)(bao)離心收(shou)集轉到新培(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)瓶,原培(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)瓶加部分(fen)培(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)液繼續培(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang),中間注意(yi)觀(guan)察,我們的技術人員會一直跟蹤指(zhi)導,直到問題解決。
供應商:慧穎細胞庫 人(ren)源均來自于第三方str鑒定,請(qing)放心購買
供應限制(zhi):僅供科研(yan)使(shi)用(yong)
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SUER1260(XR) HuH-7細胞,肝癌細胞 1×106 1ml/T25 詢價(jia)/元
SUER1261(XR) HuNS1細(xi)胞(bao), 1×106 1ml/T25 詢價(jia)/元
SUER1262(XR) HUP-T3細胞, 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1263(XR) HUP-T4細胞, 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1264(XR) HuT 102細胞,霉菌病fungoides-Sezary綜(zong)合癥細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元(yuan)
SUER1939(XR) NCM460細(xi)胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1940(XR) NHEK細胞(bao),正常人皮膚(fu)角質細胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1941(XR) SH-EP1細(xi)胞,神經母細(xi)胞瘤(liu)細(xi)胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1942(XR) SGC7901/ADR細胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1943(XR) TA-K細胞,人甲狀(zhuang)腺未(wei)分化癌細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1944(XR) TAM-1細胞,人涎(xian)腺腺樣囊性癌細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1945(XR) NHBE細(xi)胞,人正常支氣管上(shang)皮(pi)細(xi)胞 1×106 1ml/T25 詢價/元