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細胞(bao)(bao)名稱:LX-2人肝星狀細胞(bao)(bao)
貨號(hao):H028
種屬:人
細胞來源:從ATCC/中(zhong)科(ke)院(yuan)/協和醫院(yuan)等地引(yin)進
生長特性:貼壁(bi) 上皮樣(yang)
培養(yang)條件:培養(yang)基:90%DMEM+10%FBS
溫(wen)度:37℃
氣相(xiang):95%空氣,5%二氧化碳
傳(chuan)代說明:
1.用75%酒(jiu)精(jing)噴灑整個培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)瓶(ping)(ping)消(xiao)毒,將其平躺置于培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)箱中進(jin)行1-3小(xiao)時的(de)緩沖,.然后置于無(wu)菌操作(zuo)臺,打開瓶(ping)(ping)口,將其中的(de)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)液去掉,再(zai)往其中加(jia)入5-6mL新鮮培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)基(以T25培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)瓶(ping)(ping)為(wei)例)并置于細胞(bao)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)箱中培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang),根據(ju)細胞(bao)生長(chang)狀(zhuang)況及(ji)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)基顏色變(bian)化對其進(jin)行換(huan)液以及(ji)傳(chuan)代,一般2到(dao)3天換(huan)一次液;
2.待細胞(bao)長滿瓶(ping)底面(mian)積80%-90%,需要對其進(jin)行傳代(dai)(dai),傳代(dai)(dai)比例為1:3到1:8;
3傳(chuan)(chuan)代步(bu)驟:將0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化(hua)(hua)液(ye)置(zhi)于(yu)37°預熱(re),倒掉培(pei)(pei)養(yang)(yang)瓶(ping)中的培(pei)(pei)養(yang)(yang)基,往培(pei)(pei)養(yang)(yang)瓶(ping)中加(jia)(jia)入(ru)3-5 ml PBS,輕(qing)晃洗滌后(hou)(hou)棄去。往瓶(ping)中加(jia)(jia)1-2 ml預熱(re)好的胰酶,置(zhi)于(yu)37°孵育消化(hua)(hua)(次消化(hua)(hua)需(xu)時(shi)常(chang)取出置(zhi)于(yu)顯微鏡(jing)下(xia)觀察(cha),以(yi)顯微鏡(jing)下(xia)細(xi)(xi)胞(bao)觸角回收變(bian)圓、輕(qing)拍瓶(ping)壁(bi)見細(xi)(xi)胞(bao)脫(tuo)落(luo)為*消化(hua)(hua)時(shi)間,記錄*消化(hua)(hua)時(shi)間,以(yi)便(bian)于(yu)下(xia)次消化(hua)(hua)),消化(hua)(hua)好后(hou)(hou)加(jia)(jia)入(ru)3ml*培(pei)(pei)養(yang)(yang)基終止(zhi)消化(hua)(hua)。用(yong)移液(ye)槍輕(qing)輕(qing)吹打瓶(ping)壁(bi)上(shang)的細(xi)(xi)胞(bao),使之(zhi)*脫(tuo)落(luo),然后(hou)(hou)收集細(xi)(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye),1200rpm離心3min,棄上(shang)清,加(jia)(jia)入(ru)*培(pei)(pei)養(yang)(yang)基重懸(xuan)細(xi)(xi)胞(bao),進行傳(chuan)(chuan)代。
保存說明(ming):
凍存(cun)條(tiao)件(jian):80%*培養基+10%FBS+10%DMSO
(備注(zhu):建(jian)議使(shi)用本公司的冷凍(dong)液(H-W-100),用4度保(bao)存的冷凍(dong)液直接重懸細胞,不能預熱后使(shi)用。)
保(bao)存條件:液氮存儲
常(chang)見問題說明:
1.培養瓶有破(po)裂,培養液(ye)有漏(lou)液(ye):細胞極大可能會污(wu)染(ran),所以我們(men)會及(ji)時安排(pai)幫老師解決。
2.收(shou)到細胞(bao)后(hou)盡快更換為含 10%血清的(de)(de)新鮮培養(yang)基(ji)(ji),如因特殊情況需要繼(ji)續使(shi)用原(yuan)瓶培養(yang)基(ji)(ji),請在原(yuan)瓶培養(yang)基(ji)(ji)中額外(wai)添加 10%的(de)(de)血清(原(yuan)瓶培養(yang)基(ji)(ji)的(de)(de)繼(ji)續使(shi)用時間zui長(chang)不(bu)宜超過 72 小(xiao)時)
3.細(xi)胞(bao)漂浮(fu):培(pei)養(yang)(yang)瓶不開(kai)封,瓶口(kou)酒精擦(ca)拭后平躺放置(zhi)在培(pei)養(yang)(yang)箱。1-2小時后觀察(cha),如細(xi)胞(bao)大(da)部分(fen)又(you)貼(tie)回瓶底(di),表(biao)明細(xi)胞(bao)活(huo)力正(zheng)常,剩余漂浮(fu)的細(xi)胞(bao)可以去掉,留8-10ml培(pei)養(yang)(yang)液(ye)培(pei)養(yang)(yang)觀察(cha),細(xi)胞(bao)生長至匯合度80%,進行消(xiao)化傳(chuan)代;如細(xi)胞(bao)還(huan)是不貼(tie)壁,將細(xi)胞(bao)離心(xin)收集轉到(dao)新培(pei)養(yang)(yang)瓶,原(yuan)培(pei)養(yang)(yang)瓶加(jia)部分(fen)培(pei)養(yang)(yang)液(ye)繼續培(pei)養(yang)(yang),中(zhong)間注意觀察(cha),我們(men)的技術人員(yuan)會一直跟蹤指導(dao),直到(dao)問題解決(jue)。
供應商:慧穎(ying)細胞庫 人(ren)源均來自于第三方str鑒定,請放心(xin)購買
供應限制:僅供科研使用
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SUER1175(XR) HEC-50B細(xi)胞,星形細(xi)胞瘤細(xi)胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
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SUER1256(XR) HuG1-N細胞, 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1257(XR) huH-1細胞,肝癌細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1258(XR) HuH28細胞, 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1259(XR) HuH-6細胞,肝母細胞瘤細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1260(XR) HuH-7細胞(bao),肝癌(ai)細胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1261(XR) HuNS1細胞, 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1262(XR) HUP-T3細(xi)胞, 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1263(XR) HUP-T4細(xi)胞, 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1264(XR) HuT 102細(xi)胞,霉(mei)菌(jun)病fungoides-Sezary綜合癥細(xi)胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
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SUER1941(XR) SH-EP1細胞(bao),神經(jing)母細胞(bao)瘤細胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢價/元
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SUER1943(XR) TA-K細胞(bao),人(ren)甲狀(zhuang)腺未(wei)分(fen)化癌細胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢(xun)價/元
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SUER1945(XR) NHBE細胞,人正常(chang)支氣管上(shang)皮細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元