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細胞(bao)名稱:MDA-MB-468 人乳腺癌細胞(bao)
貨號:H029
種屬(shu):人
細胞來源:從ATCC/中科院(yuan)/協(xie)和(he)醫(yi)院(yuan)等地(di)引進(jin)
生長特性(xing):貼壁 上皮樣(yang)
培養條件:培養基:90%L-15+10%FBS
溫度:37℃
氣(qi)相:95%空氣(qi),5%二氧化(hua)碳
傳代說明:
1.用75%酒精噴灑整(zheng)個培(pei)養(yang)(yang)瓶(ping)消(xiao)毒,將其(qi)平躺置于培(pei)養(yang)(yang)箱中進(jin)(jin)行1-3小時(shi)的緩沖,.然后(hou)置于無菌操作(zuo)臺,打開瓶(ping)口,將其(qi)中的培(pei)養(yang)(yang)液去掉(diao),再往其(qi)中加入(ru)5-6mL新(xin)鮮培(pei)養(yang)(yang)基(以T25培(pei)養(yang)(yang)瓶(ping)為例)并置于細(xi)胞培(pei)養(yang)(yang)箱中培(pei)養(yang)(yang),根據細(xi)胞生長狀況(kuang)及(ji)培(pei)養(yang)(yang)基顏色變化對(dui)其(qi)進(jin)(jin)行換液以及(ji)傳(chuan)代,一般2到(dao)3天換一次液;
2.待細(xi)胞長滿瓶底面積80%-90%,需要對(dui)其進(jin)行傳(chuan)代,傳(chuan)代比例(li)為1:3到1:8;
3傳(chuan)代步驟(zou):將0.25%胰(yi)酶-0.53 mM EDTA消(xiao)(xiao)化(hua)(hua)(hua)液(ye)置于(yu)37°預(yu)熱,倒掉培養瓶(ping)中(zhong)的(de)培養基,往培養瓶(ping)中(zhong)加入3-5 ml PBS,輕晃洗滌后(hou)棄去。往瓶(ping)中(zhong)加1-2 ml預(yu)熱好的(de)胰(yi)酶,置于(yu)37°孵育消(xiao)(xiao)化(hua)(hua)(hua)(次消(xiao)(xiao)化(hua)(hua)(hua)需時常取出置于(yu)顯(xian)微(wei)鏡下(xia)觀察,以顯(xian)微(wei)鏡下(xia)細(xi)胞(bao)(bao)觸角回收(shou)變圓、輕拍(pai)瓶(ping)壁見細(xi)胞(bao)(bao)脫落為*消(xiao)(xiao)化(hua)(hua)(hua)時間(jian),記(ji)錄*消(xiao)(xiao)化(hua)(hua)(hua)時間(jian),以便于(yu)下(xia)次消(xiao)(xiao)化(hua)(hua)(hua)),消(xiao)(xiao)化(hua)(hua)(hua)好后(hou)加入3ml*培養基終止消(xiao)(xiao)化(hua)(hua)(hua)。用移液(ye)槍輕輕吹打瓶(ping)壁上的(de)細(xi)胞(bao)(bao),使之*脫落,然后(hou)收(shou)集細(xi)胞(bao)(bao)懸液(ye),1200rpm離心3min,棄上清,加入*培養基重懸細(xi)胞(bao)(bao),進行傳(chuan)代。
保存說明:
凍存(cun)條件:80%*培(pei)養基+10%FBS+10%DMSO
(備(bei)注:建議使用(yong)本公司的(de)冷凍(dong)液(H-W-100),用(yong)4度保存的(de)冷凍(dong)液直接重懸(xuan)細(xi)胞,不(bu)能預熱后(hou)使用(yong)。)
保存條件:液氮存儲
常見問題說明(ming):
1.培(pei)養瓶有破裂(lie),培(pei)養液有漏液:細胞極大可能會污染,所(suo)以我們會及時安排幫老師(shi)解決。
2.收(shou)到細(xi)胞(bao)后盡快更換(huan)為含 10%血清的新鮮培(pei)養基(ji),如因特殊情(qing)況(kuang)需要繼續(xu)使(shi)用(yong)原瓶(ping)培(pei)養基(ji),請在原瓶(ping)培(pei)養基(ji)中額外添加 10%的血清(原瓶(ping)培(pei)養基(ji)的繼續(xu)使(shi)用(yong)時間zui長不(bu)宜超過 72 小(xiao)時)
3.細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)漂浮:培(pei)養(yang)(yang)瓶(ping)(ping)不開(kai)封,瓶(ping)(ping)口酒精擦拭后平躺放(fang)置(zhi)在培(pei)養(yang)(yang)箱(xiang)。1-2小時后觀(guan)(guan)察,如(ru)(ru)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)大部分又(you)貼回(hui)瓶(ping)(ping)底(di),表(biao)明細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)活力(li)正常,剩余漂浮的細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)可以去掉,留8-10ml培(pei)養(yang)(yang)液培(pei)養(yang)(yang)觀(guan)(guan)察,細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)生(sheng)長至(zhi)匯(hui)合度80%,進行消化傳代;如(ru)(ru)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)還是不貼壁,將(jiang)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)離心收(shou)集轉到新培(pei)養(yang)(yang)瓶(ping)(ping),原培(pei)養(yang)(yang)瓶(ping)(ping)加部分培(pei)養(yang)(yang)液繼續(xu)培(pei)養(yang)(yang),中間(jian)注意觀(guan)(guan)察,我(wo)們的技術(shu)人員會一直跟蹤指導(dao),直到問題解決。
供應商:慧穎細(xi)胞庫 人源均來(lai)自于第三方str鑒定,請(qing)放心購買
供應限制:僅(jin)供科研使用
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SUER1255(XR) HuCCT1細(xi)胞, 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1256(XR) HuG1-N細胞, 1×106 1ml/T25 詢價(jia)/元
SUER1257(XR) huH-1細胞,肝癌細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1258(XR) HuH28細(xi)胞, 1×106 1ml/T25 詢價(jia)/元(yuan)
SUER1259(XR) HuH-6細胞(bao),肝母細胞(bao)瘤細胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢價(jia)/元(yuan)
SUER1260(XR) HuH-7細(xi)胞(bao),肝(gan)癌細(xi)胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1261(XR) HuNS1細胞, 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1262(XR) HUP-T3細胞, 1×106 1ml/T25 詢(xun)價/元
SUER1263(XR) HUP-T4細(xi)胞, 1×106 1ml/T25 詢價(jia)/元
SUER1264(XR) HuT 102細(xi)胞(bao),霉(mei)菌病fungoides-Sezary綜合癥細(xi)胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1939(XR) NCM460細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1940(XR) NHEK細胞(bao),正常人皮(pi)膚角質(zhi)細胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢價(jia)/元
SUER1941(XR) SH-EP1細胞,神經母(mu)細胞瘤(liu)細胞 1×106 1ml/T25 詢(xun)價/元(yuan)
SUER1942(XR) SGC7901/ADR細胞 1×106 1ml/T25 詢(xun)價/元
SUER1943(XR) TA-K細胞(bao)(bao),人甲(jia)狀腺(xian)未分化癌(ai)細胞(bao)(bao) 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1944(XR) TAM-1細胞(bao),人涎腺腺樣囊性(xing)癌細胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢價/元(yuan)
SUER1945(XR) NHBE細(xi)胞,人正(zheng)常支氣管上皮細(xi)胞 1×106 1ml/T25 詢價/元