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細胞(bao)名稱:ZR-75-1人乳(ru)腺(xian)癌(ai)細胞(bao)
貨號:H040
種屬:人
細胞來(lai)源:從ATCC/中科院(yuan)/協和醫院(yuan)等地引進
生(sheng)長特性:貼壁(bi) 上皮樣
培養條件:培養基:90%RPMI-1640+10%FBS(推薦使(shi)用HAKATA優等(deng)胎牛血清HN-FBS-50)
溫度:37℃
氣相:95%空氣,5%二氧化碳
傳(chuan)代說明:
1.用75%酒(jiu)精噴灑整個培(pei)(pei)(pei)養(yang)瓶消(xiao)毒,將其平躺置(zhi)于(yu)培(pei)(pei)(pei)養(yang)箱中(zhong)(zhong)進(jin)行1-3小時(shi)的緩(huan)沖,.然后置(zhi)于(yu)無菌操(cao)作臺,打開瓶口,將其中(zhong)(zhong)的培(pei)(pei)(pei)養(yang)液去掉,再往其中(zhong)(zhong)加入5-6mL新(xin)鮮培(pei)(pei)(pei)養(yang)基(ji)(以T25培(pei)(pei)(pei)養(yang)瓶為例)并置(zhi)于(yu)細胞培(pei)(pei)(pei)養(yang)箱中(zhong)(zhong)培(pei)(pei)(pei)養(yang),根據細胞生長(chang)狀況(kuang)及培(pei)(pei)(pei)養(yang)基(ji)顏色變(bian)化對其進(jin)行換液以及傳代,一(yi)般2到3天換一(yi)次液;
2.待細胞長滿瓶(ping)底面積80%-90%,需要對其進(jin)行傳(chuan)(chuan)代(dai),傳(chuan)(chuan)代(dai)比例(li)為1:3到1:8;
3傳(chuan)代步驟(zou):將0.25%胰酶(mei)-0.53 mM EDTA消(xiao)(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)液置(zhi)于(yu)37°預熱(re),倒掉培養瓶(ping)中(zhong)的(de)培養基,往培養瓶(ping)中(zhong)加(jia)(jia)入3-5 ml PBS,輕晃洗滌后(hou)棄(qi)去。往瓶(ping)中(zhong)加(jia)(jia)1-2 ml預熱(re)好(hao)的(de)胰酶(mei),置(zhi)于(yu)37°孵育消(xiao)(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)(次(ci)消(xiao)(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)需時常(chang)取出置(zhi)于(yu)顯(xian)微鏡(jing)下(xia)(xia)觀察,以顯(xian)微鏡(jing)下(xia)(xia)細胞(bao)觸角回收變(bian)圓、輕拍瓶(ping)壁見細胞(bao)脫落為*消(xiao)(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)時間(jian),記錄(lu)*消(xiao)(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)時間(jian),以便于(yu)下(xia)(xia)次(ci)消(xiao)(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)),消(xiao)(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)好(hao)后(hou)加(jia)(jia)入3ml*培養基終止消(xiao)(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)。用移(yi)液槍輕輕吹打(da)瓶(ping)壁上的(de)細胞(bao),使之*脫落,然后(hou)收集細胞(bao)懸(xuan)液,1200rpm離心3min,棄(qi)上清,加(jia)(jia)入*培養基重懸(xuan)細胞(bao),進行傳(chuan)代。
保存(cun)說明(ming):
凍存條(tiao)件(jian):80%*培養基+10%FBS+10%DMSO
(備(bei)注:建議(yi)使(shi)用(yong)(yong)本公司的(de)(de)冷(leng)凍液(H-W-100),用(yong)(yong)4度保存的(de)(de)冷(leng)凍液直接重懸(xuan)細胞,不能預熱后使(shi)用(yong)(yong)。)
保存條件:液氮存儲
常見問題(ti)說(shuo)明(ming):
1.培養(yang)瓶有(you)破裂,培養(yang)液有(you)漏液:細(xi)胞極大可能(neng)會污(wu)染,所以我們會及時安排(pai)幫老師(shi)解決。
2.收到細胞后(hou)盡快(kuai)更(geng)換為(wei)含 10%血清(qing)的(de)新鮮培(pei)養基,如因特殊情況需要繼(ji)續使用原瓶培(pei)養基,請在原瓶培(pei)養基中額(e)外添加 10%的(de)血清(qing)(原瓶培(pei)養基的(de)繼(ji)續使用時間zui長不宜超(chao)過 72 小時)
3.細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)漂浮:培(pei)養(yang)瓶(ping)(ping)不(bu)開封,瓶(ping)(ping)口酒精擦(ca)拭后平躺放置(zhi)在培(pei)養(yang)箱(xiang)。1-2小時后觀察,如細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)大部分又(you)貼(tie)回瓶(ping)(ping)底,表明細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)活力正常,剩(sheng)余漂浮的細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)可以去掉,留8-10ml培(pei)養(yang)液培(pei)養(yang)觀察,細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)生長至(zhi)匯(hui)合度(du)80%,進行消化傳代;如細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)還是不(bu)貼(tie)壁(bi),將細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)離心收集轉到(dao)新培(pei)養(yang)瓶(ping)(ping),原培(pei)養(yang)瓶(ping)(ping)加部分培(pei)養(yang)液繼續(xu)培(pei)養(yang),中間(jian)注意(yi)觀察,我們的技(ji)術人員會一直(zhi)跟(gen)蹤指導,直(zhi)到(dao)問(wen)題解(jie)決。
供應商:慧(hui)穎細胞庫 人源均來自于第三方str鑒定,請放心購(gou)買(mai)
供應(ying)限制:僅供科研使用
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SUER1256(XR) HuG1-N細(xi)胞, 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1257(XR) huH-1細(xi)胞,肝癌細(xi)胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1258(XR) HuH28細胞, 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1259(XR) HuH-6細胞,肝母(mu)細胞瘤細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1260(XR) HuH-7細胞,肝癌細胞 1×106 1ml/T25 詢價(jia)/元
SUER1261(XR) HuNS1細胞, 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1262(XR) HUP-T3細胞, 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1263(XR) HUP-T4細胞, 1×106 1ml/T25 詢(xun)價/元
SUER1264(XR) HuT 102細胞,霉菌(jun)病fungoides-Sezary綜合癥細胞 1×106 1ml/T25 詢(xun)價(jia)/元(yuan)
SUER1939(XR) NCM460細胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1940(XR) NHEK細胞,正常人皮(pi)膚(fu)角質細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1941(XR) SH-EP1細胞,神經母細胞瘤細胞 1×106 1ml/T25 詢價(jia)/元(yuan)
SUER1942(XR) SGC7901/ADR細(xi)胞 1×106 1ml/T25 詢價(jia)/元
SUER1943(XR) TA-K細胞,人甲狀腺(xian)未分化癌細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1944(XR) TAM-1細胞,人涎腺腺樣囊(nang)性癌細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1945(XR) NHBE細胞,人(ren)正常支氣管上皮細胞 1×106 1ml/T25 詢(xun)價/元(yuan)