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細(xi)胞名稱:RD-ES 人尤文(wen)氏肉瘤細(xi)胞
貨號:H046
種屬:人
細胞來源:從(cong)ATCC/中科(ke)院(yuan)/協和醫院(yuan)等地引進(jin)
生長特性(xing):貼壁 上皮樣
培養條件:培養基(ji):85%RPMI-1640+15%FBS(推薦使用(yong)HAKATA優等胎牛血清HN-FBS-50)
溫度:37℃
氣相:95%空氣,5%二氧化碳(tan)
傳(chuan)代說明:
1.用(yong)75%酒精噴灑整個(ge)培(pei)養(yang)(yang)(yang)瓶消毒,將(jiang)其(qi)平躺置于(yu)培(pei)養(yang)(yang)(yang)箱(xiang)中進行(xing)1-3小(xiao)時的(de)緩沖,.然后置于(yu)無菌操(cao)作臺,打開瓶口(kou),將(jiang)其(qi)中的(de)培(pei)養(yang)(yang)(yang)液去掉,再往其(qi)中加入5-6mL新鮮(xian)培(pei)養(yang)(yang)(yang)基(以T25培(pei)養(yang)(yang)(yang)瓶為例)并(bing)置于(yu)細胞(bao)培(pei)養(yang)(yang)(yang)箱(xiang)中培(pei)養(yang)(yang)(yang),根據細胞(bao)生長狀況及培(pei)養(yang)(yang)(yang)基顏色變化(hua)對其(qi)進行(xing)換液以及傳代,一(yi)般(ban)2到3天換一(yi)次液;
2.待細胞長滿瓶底(di)面積80%-90%,需要對其進行傳代(dai),傳代(dai)比例為1:3到1:8;
3傳(chuan)代步驟:將0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化(hua)(hua)液置(zhi)于(yu)37°預(yu)熱,倒掉培(pei)養(yang)瓶(ping)中的(de)培(pei)養(yang)基,往培(pei)養(yang)瓶(ping)中加入(ru)(ru)3-5 ml PBS,輕(qing)(qing)晃(huang)洗(xi)滌(di)后棄去(qu)。往瓶(ping)中加1-2 ml預(yu)熱好的(de)胰酶,置(zhi)于(yu)37°孵育消化(hua)(hua)(次(ci)消化(hua)(hua)需時常取(qu)出置(zhi)于(yu)顯微(wei)鏡下(xia)觀察,以顯微(wei)鏡下(xia)細胞觸角回(hui)收(shou)變圓、輕(qing)(qing)拍(pai)瓶(ping)壁見細胞脫(tuo)落(luo)為*消化(hua)(hua)時間(jian),記錄*消化(hua)(hua)時間(jian),以便于(yu)下(xia)次(ci)消化(hua)(hua)),消化(hua)(hua)好后加入(ru)(ru)3ml*培(pei)養(yang)基終止消化(hua)(hua)。用(yong)移液槍輕(qing)(qing)輕(qing)(qing)吹打(da)瓶(ping)壁上(shang)的(de)細胞,使之(zhi)*脫(tuo)落(luo),然后收(shou)集(ji)細胞懸液,1200rpm離心(xin)3min,棄上(shang)清,加入(ru)(ru)*培(pei)養(yang)基重(zhong)懸細胞,進行傳(chuan)代。
保存說明:
凍(dong)存(cun)條件:80%*培養(yang)基+10%FBS+10%DMSO
(備注(zhu):建議使用(yong)本公司的(de)冷凍液(H-W-100),用(yong)4度(du)保(bao)存(cun)的(de)冷凍液直接重懸細胞,不能(neng)預熱(re)后使用(yong)。)
保存條件:液(ye)氮存儲
常(chang)見(jian)問題(ti)說明:
1.培養瓶有破裂,培養液有漏液:細胞極大可能會污(wu)染(ran),所以我們會及(ji)時安排幫(bang)老師解(jie)決。
2.收到細胞后盡快(kuai)更(geng)換為含 10%血清的(de)(de)新鮮培養(yang)基(ji),如因特殊情(qing)況需要繼(ji)續(xu)使(shi)用原(yuan)(yuan)瓶培養(yang)基(ji),請在原(yuan)(yuan)瓶培養(yang)基(ji)中額外添加(jia) 10%的(de)(de)血清(原(yuan)(yuan)瓶培養(yang)基(ji)的(de)(de)繼(ji)續(xu)使(shi)用時間zui長不宜超過 72 小時)
3.細(xi)(xi)胞(bao)漂浮(fu)(fu):培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)瓶(ping)不開(kai)封,瓶(ping)口酒精擦拭后平躺放(fang)置在培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)箱。1-2小(xiao)時后觀(guan)(guan)察(cha)(cha),如細(xi)(xi)胞(bao)大部分又貼回(hui)瓶(ping)底,表明細(xi)(xi)胞(bao)活力正常,剩余漂浮(fu)(fu)的(de)細(xi)(xi)胞(bao)可以去掉,留8-10ml培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)液(ye)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)觀(guan)(guan)察(cha)(cha),細(xi)(xi)胞(bao)生(sheng)長至匯合度80%,進行消(xiao)化傳代;如細(xi)(xi)胞(bao)還是(shi)不貼壁,將細(xi)(xi)胞(bao)離心收集轉到新培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)瓶(ping),原培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)瓶(ping)加部分培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)液(ye)繼續(xu)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang),中間注意觀(guan)(guan)察(cha)(cha),我(wo)們的(de)技術(shu)人員會一直(zhi)跟蹤指導,直(zhi)到問題解決。
供應商:慧(hui)穎細胞(bao)庫 人(ren)源均來自于第三方(fang)str鑒定,請放(fang)心購買(mai)
供(gong)應限制:僅供(gong)科(ke)研使(shi)用
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SUER1172(XR) HEC-1-B細(xi)胞,星形(xing)細(xi)胞瘤細(xi)胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
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SUER1174(XR) HEC-265細胞(bao),星形(xing)細胞(bao)瘤細胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1175(XR) HEC-50B細胞(bao),星形細胞(bao)瘤細胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢價/元
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SUER1253(XR) HT55細(xi)(xi)胞(bao),腺癌細(xi)(xi)胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1254(XR) HTK-細胞(bao),漿細胞(bao)骨髓瘤 1×106 1ml/T25 詢價/元(yuan)
SUER1255(XR) HuCCT1細胞, 1×106 1ml/T25 詢價(jia)/元(yuan)
SUER1256(XR) HuG1-N細胞, 1×106 1ml/T25 詢價/元(yuan)
SUER1257(XR) huH-1細(xi)胞(bao)(bao),肝癌細(xi)胞(bao)(bao) 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1258(XR) HuH28細(xi)胞(bao), 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1259(XR) HuH-6細胞(bao),肝母細胞(bao)瘤(liu)細胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1260(XR) HuH-7細胞(bao),肝癌細胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢(xun)價/元(yuan)
SUER1261(XR) HuNS1細胞, 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1262(XR) HUP-T3細胞, 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1263(XR) HUP-T4細胞, 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1264(XR) HuT 102細(xi)胞(bao),霉菌病fungoides-Sezary綜合癥(zheng)細(xi)胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢價/元(yuan)
SUER1939(XR) NCM460細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1940(XR) NHEK細胞,正(zheng)常人皮膚角質(zhi)細胞 1×106 1ml/T25 詢(xun)價/元
SUER1941(XR) SH-EP1細(xi)(xi)胞(bao),神經母細(xi)(xi)胞(bao)瘤細(xi)(xi)胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢價(jia)/元
SUER1942(XR) SGC7901/ADR細(xi)胞 1×106 1ml/T25 詢(xun)價/元
SUER1943(XR) TA-K細胞,人甲狀腺未分化癌細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1944(XR) TAM-1細胞,人涎腺腺樣囊性癌(ai)細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1945(XR) NHBE細(xi)胞,人正常(chang)支(zhi)氣管上(shang)皮細(xi)胞 1×106 1ml/T25 詢價/元(yuan)