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細胞名(ming)稱:HELA S3 人宮頸癌細胞
貨號:H049
種屬:人
細(xi)胞來(lai)源:從(cong)ATCC/中(zhong)科院(yuan)(yuan)/協(xie)和醫院(yuan)(yuan)等地引(yin)進
生長特性(xing):貼壁 上皮樣
培養條(tiao)件:培養基:90%F-12K+10%FBS(推薦使(shi)用HAKATA優等胎牛血清HN-FBS-50)
溫度:37℃
氣相:95%空(kong)氣,5%二氧化(hua)碳(tan)
傳代說明:
1.用75%酒精噴灑(sa)整(zheng)個培(pei)(pei)養(yang)(yang)瓶消毒,將其(qi)平躺置(zhi)于(yu)培(pei)(pei)養(yang)(yang)箱中進行1-3小時的緩(huan)沖,.然后置(zhi)于(yu)無菌(jun)操作臺(tai),打(da)開瓶口,將其(qi)中的培(pei)(pei)養(yang)(yang)液去(qu)掉,再往其(qi)中加入5-6mL新(xin)鮮培(pei)(pei)養(yang)(yang)基(以T25培(pei)(pei)養(yang)(yang)瓶為例(li))并置(zhi)于(yu)細胞(bao)(bao)培(pei)(pei)養(yang)(yang)箱中培(pei)(pei)養(yang)(yang),根據細胞(bao)(bao)生長(chang)狀況(kuang)及(ji)培(pei)(pei)養(yang)(yang)基顏(yan)色變化(hua)對其(qi)進行換液以及(ji)傳代(dai),一(yi)般(ban)2到3天換一(yi)次液;
2.待細胞(bao)長滿瓶底面(mian)積80%-90%,需(xu)要對其進行傳代,傳代比(bi)例(li)為1:3到(dao)1:8;
3傳代步驟(zou):將(jiang)0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)液置于37°預(yu)熱,倒(dao)掉培(pei)(pei)養瓶(ping)中(zhong)的培(pei)(pei)養基(ji),往培(pei)(pei)養瓶(ping)中(zhong)加(jia)入(ru)3-5 ml PBS,輕(qing)晃洗滌后棄去。往瓶(ping)中(zhong)加(jia)1-2 ml預(yu)熱好(hao)的胰酶,置于37°孵育消(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)(次(ci)消(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)需時(shi)常取出置于顯(xian)微(wei)鏡下(xia)觀察,以顯(xian)微(wei)鏡下(xia)細胞觸角回收變(bian)圓、輕(qing)拍瓶(ping)壁(bi)見(jian)細胞脫落(luo)為*消(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)時(shi)間,記錄*消(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)時(shi)間,以便(bian)于下(xia)次(ci)消(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)),消(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)好(hao)后加(jia)入(ru)3ml*培(pei)(pei)養基(ji)終止消(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)。用(yong)移液槍輕(qing)輕(qing)吹打瓶(ping)壁(bi)上的細胞,使之*脫落(luo),然后收集(ji)細胞懸液,1200rpm離心3min,棄上清,加(jia)入(ru)*培(pei)(pei)養基(ji)重懸細胞,進行傳代。
保存說(shuo)明:
凍存條件(jian):80%*培養基+10%FBS+10%DMSO
(備注:建(jian)議使(shi)用本公司(si)的冷凍液(H-W-100),用4度保存(cun)的冷凍液直(zhi)接重懸細胞,不能預熱后使(shi)用。)
保存(cun)條(tiao)件:液氮存(cun)儲(chu)
常見問題說明:
1.培養瓶有(you)破裂,培養液有(you)漏液:細(xi)胞(bao)極大可能會污(wu)染,所以我們會及時安排幫(bang)老(lao)師解決。
2.收到(dao)細胞(bao)后盡快(kuai)更換為含 10%血(xue)清的(de)(de)新鮮(xian)培(pei)養基(ji),如(ru)因特殊情(qing)況(kuang)需要繼(ji)續(xu)使(shi)用(yong)原(yuan)瓶(ping)培(pei)養基(ji),請(qing)在原(yuan)瓶(ping)培(pei)養基(ji)中額外添加 10%的(de)(de)血(xue)清(原(yuan)瓶(ping)培(pei)養基(ji)的(de)(de)繼(ji)續(xu)使(shi)用(yong)時間(jian)zui長不宜超(chao)過 72 小(xiao)時)
3.細胞漂浮:培(pei)養(yang)(yang)瓶(ping)(ping)不(bu)開封,瓶(ping)(ping)口酒精擦拭(shi)后(hou)平躺放置在培(pei)養(yang)(yang)箱。1-2小時后(hou)觀(guan)(guan)察(cha),如(ru)細胞大(da)部分又(you)貼(tie)回瓶(ping)(ping)底,表明細胞活力正(zheng)常,剩(sheng)余漂浮的細胞可以去掉,留8-10ml培(pei)養(yang)(yang)液培(pei)養(yang)(yang)觀(guan)(guan)察(cha),細胞生長至(zhi)匯合度(du)80%,進行消化傳代;如(ru)細胞還是不(bu)貼(tie)壁,將細胞離(li)心收集(ji)轉(zhuan)到(dao)新培(pei)養(yang)(yang)瓶(ping)(ping),原(yuan)培(pei)養(yang)(yang)瓶(ping)(ping)加部分培(pei)養(yang)(yang)液繼續(xu)培(pei)養(yang)(yang),中(zhong)間注意觀(guan)(guan)察(cha),我(wo)們的技術(shu)人(ren)員(yuan)會(hui)一直跟蹤指導,直到(dao)問題解決(jue)。
供(gong)應(ying)商:慧穎細胞(bao)庫 人源均來自于(yu)第三方str鑒定,請放心購買(mai)
供應限制:僅供科研(yan)使用
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SUER1262(XR) HUP-T3細胞, 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1263(XR) HUP-T4細胞(bao), 1×106 1ml/T25 詢價(jia)/元(yuan)
SUER1264(XR) HuT 102細胞,霉菌病(bing)fungoides-Sezary綜合癥細胞 1×106 1ml/T25 詢價(jia)/元
SUER1939(XR) NCM460細胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢價/元
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SUER1941(XR) SH-EP1細(xi)(xi)胞(bao),神經母(mu)細(xi)(xi)胞(bao)瘤細(xi)(xi)胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢價(jia)/元
SUER1942(XR) SGC7901/ADR細胞 1×106 1ml/T25 詢(xun)價(jia)/元
SUER1943(XR) TA-K細胞,人甲狀腺(xian)未分化癌細胞 1×106 1ml/T25 詢(xun)價/元
SUER1944(XR) TAM-1細(xi)胞(bao),人(ren)涎腺腺樣囊性(xing)癌細(xi)胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1945(XR) NHBE細(xi)胞,人(ren)正常支(zhi)氣管上皮(pi)細(xi)胞 1×106 1ml/T25 詢價/元