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細胞名稱:ECC-1 人(ren)宮頸(jing)內膜(mo)腺癌細胞
貨號:H050
種屬:人
細胞(bao)來源:從(cong)ATCC/中科院(yuan)/協和醫院(yuan)等地引進
生(sheng)長特性:貼壁 上皮樣
培(pei)養(yang)條(tiao)件(jian):培(pei)養(yang)基:90%DMEM+10%FBS(推薦使用HAKATA優等胎牛血清HN-FBS-50)
溫度:37℃
氣相:95%空氣,5%二氧化碳(tan)
傳代說(shuo)明:
1.用75%酒精噴灑整個培(pei)(pei)(pei)養(yang)瓶(ping)消毒,將其平躺置(zhi)于(yu)培(pei)(pei)(pei)養(yang)箱中(zhong)進行1-3小(xiao)時的(de)緩沖,.然后置(zhi)于(yu)無菌操(cao)作臺,打開瓶(ping)口(kou),將其中(zhong)的(de)培(pei)(pei)(pei)養(yang)液去掉(diao),再(zai)往(wang)其中(zhong)加(jia)入5-6mL新鮮培(pei)(pei)(pei)養(yang)基(ji)(以T25培(pei)(pei)(pei)養(yang)瓶(ping)為例)并(bing)置(zhi)于(yu)細(xi)胞培(pei)(pei)(pei)養(yang)箱中(zhong)培(pei)(pei)(pei)養(yang),根據細(xi)胞生長狀(zhuang)況及培(pei)(pei)(pei)養(yang)基(ji)顏色變(bian)化對其進行換液以及傳代,一般(ban)2到3天換一次(ci)液;
2.待細胞(bao)長滿瓶(ping)底面積80%-90%,需要對其(qi)進行傳代,傳代比(bi)例為1:3到1:8;
3傳(chuan)代(dai)步(bu)驟:將0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消(xiao)化(hua)(hua)(hua)液(ye)置(zhi)于37°預(yu)(yu)熱,倒(dao)掉培(pei)(pei)養瓶(ping)中(zhong)的(de)培(pei)(pei)養基(ji),往培(pei)(pei)養瓶(ping)中(zhong)加(jia)入3-5 ml PBS,輕晃洗滌后棄去。往瓶(ping)中(zhong)加(jia)1-2 ml預(yu)(yu)熱好的(de)胰酶,置(zhi)于37°孵育(yu)消(xiao)化(hua)(hua)(hua)(次消(xiao)化(hua)(hua)(hua)需時常取(qu)出置(zhi)于顯微鏡(jing)下觀(guan)察,以顯微鏡(jing)下細胞(bao)觸角回收(shou)變圓、輕拍瓶(ping)壁見細胞(bao)脫(tuo)落(luo)為*消(xiao)化(hua)(hua)(hua)時間(jian),記錄(lu)*消(xiao)化(hua)(hua)(hua)時間(jian),以便于下次消(xiao)化(hua)(hua)(hua)),消(xiao)化(hua)(hua)(hua)好后加(jia)入3ml*培(pei)(pei)養基(ji)終止消(xiao)化(hua)(hua)(hua)。用移液(ye)槍輕輕吹(chui)打瓶(ping)壁上的(de)細胞(bao),使之*脫(tuo)落(luo),然(ran)后收(shou)集細胞(bao)懸液(ye),1200rpm離心3min,棄上清(qing),加(jia)入*培(pei)(pei)養基(ji)重(zhong)懸細胞(bao),進行傳(chuan)代(dai)。
保存說明:
凍存條件(jian):80%*培養基+10%FBS+10%DMSO
(備注:建議使用本公司的冷凍(dong)液(ye)(H-W-100),用4度保存的冷凍(dong)液(ye)直接重懸細胞,不能預熱后使用。)
保存條件:液氮存儲
常見問題說明(ming):
1.培(pei)養(yang)(yang)瓶有破裂,培(pei)養(yang)(yang)液有漏液:細胞極大可能會污染,所(suo)以我們(men)會及時安排幫(bang)老師解決。
2.收(shou)到細胞后(hou)盡快更換為含 10%血清的(de)新鮮培養(yang)基(ji)(ji),如因特(te)殊情況需要繼(ji)續(xu)使用原瓶培養(yang)基(ji)(ji),請在原瓶培養(yang)基(ji)(ji)中額外添加 10%的(de)血清(原瓶培養(yang)基(ji)(ji)的(de)繼(ji)續(xu)使用時間(jian)zui長不宜超(chao)過 72 小時)
3.細(xi)(xi)胞(bao)(bao)漂(piao)浮:培(pei)(pei)(pei)養瓶(ping)(ping)不開封,瓶(ping)(ping)口(kou)酒精擦拭后平(ping)躺(tang)放置在培(pei)(pei)(pei)養箱(xiang)。1-2小時后觀(guan)察(cha),如細(xi)(xi)胞(bao)(bao)大部(bu)分又貼(tie)回瓶(ping)(ping)底(di),表明細(xi)(xi)胞(bao)(bao)活力正常,剩(sheng)余漂(piao)浮的細(xi)(xi)胞(bao)(bao)可(ke)以去掉,留8-10ml培(pei)(pei)(pei)養液培(pei)(pei)(pei)養觀(guan)察(cha),細(xi)(xi)胞(bao)(bao)生長至匯合度(du)80%,進行消化傳代;如細(xi)(xi)胞(bao)(bao)還(huan)是(shi)不貼(tie)壁,將細(xi)(xi)胞(bao)(bao)離(li)心收集轉到新(xin)培(pei)(pei)(pei)養瓶(ping)(ping),原培(pei)(pei)(pei)養瓶(ping)(ping)加部(bu)分培(pei)(pei)(pei)養液繼續培(pei)(pei)(pei)養,中間(jian)注意觀(guan)察(cha),我們的技術人員會一直跟蹤指導,直到問題(ti)解決(jue)。
供應(ying)商:慧穎細(xi)胞庫 人源均來自于第三方(fang)str鑒定(ding),請放心購買
供(gong)應限制:僅供(gong)科研使(shi)用(yong)
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SUER1257(XR) huH-1細胞,肝(gan)癌細胞 1×106 1ml/T25 詢價(jia)/元
SUER1258(XR) HuH28細胞, 1×106 1ml/T25 詢價(jia)/元
SUER1259(XR) HuH-6細胞,肝母細胞瘤細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1260(XR) HuH-7細胞,肝(gan)癌細胞 1×106 1ml/T25 詢(xun)價/元
SUER1261(XR) HuNS1細胞(bao), 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1262(XR) HUP-T3細胞, 1×106 1ml/T25 詢(xun)價(jia)/元
SUER1263(XR) HUP-T4細胞, 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1264(XR) HuT 102細胞,霉菌病fungoides-Sezary綜合癥(zheng)細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1939(XR) NCM460細胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢(xun)價/元
SUER1940(XR) NHEK細(xi)胞,正常(chang)人皮膚角質細(xi)胞 1×106 1ml/T25 詢價/元(yuan)
SUER1941(XR) SH-EP1細(xi)(xi)胞,神經母細(xi)(xi)胞瘤細(xi)(xi)胞 1×106 1ml/T25 詢價/元(yuan)
SUER1942(XR) SGC7901/ADR細(xi)胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢(xun)價/元
SUER1943(XR) TA-K細(xi)(xi)胞,人甲(jia)狀腺未分化(hua)癌細(xi)(xi)胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1944(XR) TAM-1細胞,人涎(xian)腺腺樣囊性癌細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1945(XR) NHBE細胞,人正常支氣管上皮細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元(yuan)