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細(xi)胞名稱:COLO320人結腸癌(ai)細(xi)胞
貨號:H062
種屬:人
細胞來源:從(cong)ATCC/中科院(yuan)/協(xie)和醫院(yuan)等(deng)地(di)引進
生長(chang)特(te)性(xing):懸浮貼(tie)壁混(hun)合 圓形
培養條件(jian):培養基:90%RPMI-1640+10%FBS(推薦使用(yong)HAKATA優等胎牛血清HN-FBS-50)
溫(wen)度:37℃
氣相:95%空氣,5%二氧化碳
傳代說明:
1.用75%酒精噴灑整個(ge)培(pei)養瓶消毒,將(jiang)其(qi)平躺置于培(pei)養箱中進(jin)行1-3小時(shi)的緩沖,.然后(hou)置于無菌操作臺,打開瓶口(kou),將(jiang)其(qi)中的培(pei)養液(ye)去(qu)掉,再(zai)往其(qi)中加入5-6mL新鮮培(pei)養基(以T25培(pei)養瓶為例)并置于細胞培(pei)養箱中培(pei)養,根據細胞生長狀況(kuang)及(ji)培(pei)養基顏色變(bian)化對(dui)其(qi)進(jin)行換液(ye)以及(ji)傳代,一般2到3天換一次(ci)液(ye);
2.待細胞(bao)長滿瓶底(di)面積80%-90%,需要對(dui)其(qi)進行(xing)傳(chuan)代,傳(chuan)代比(bi)例為1:3到1:8;
3傳代(dai)步驟(zou):將0.25%胰酶(mei)(mei)-0.53 mM EDTA消(xiao)(xiao)化(hua)(hua)液(ye)置于37°預熱(re),倒掉培養(yang)(yang)(yang)瓶(ping)中(zhong)(zhong)的培養(yang)(yang)(yang)基(ji),往(wang)培養(yang)(yang)(yang)瓶(ping)中(zhong)(zhong)加(jia)入(ru)3-5 ml PBS,輕(qing)(qing)晃洗滌(di)后棄(qi)去。往(wang)瓶(ping)中(zhong)(zhong)加(jia)1-2 ml預熱(re)好(hao)(hao)的胰酶(mei)(mei),置于37°孵育(yu)消(xiao)(xiao)化(hua)(hua)(次消(xiao)(xiao)化(hua)(hua)需(xu)時常取出置于顯微鏡(jing)下(xia)觀(guan)察(cha),以顯微鏡(jing)下(xia)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)觸(chu)角回收變(bian)圓、輕(qing)(qing)拍瓶(ping)壁(bi)見細(xi)(xi)胞(bao)(bao)脫(tuo)落為(wei)*消(xiao)(xiao)化(hua)(hua)時間(jian)(jian),記錄*消(xiao)(xiao)化(hua)(hua)時間(jian)(jian),以便于下(xia)次消(xiao)(xiao)化(hua)(hua)),消(xiao)(xiao)化(hua)(hua)好(hao)(hao)后加(jia)入(ru)3ml*培養(yang)(yang)(yang)基(ji)終止(zhi)消(xiao)(xiao)化(hua)(hua)。用移(yi)液(ye)槍輕(qing)(qing)輕(qing)(qing)吹(chui)打瓶(ping)壁(bi)上(shang)(shang)的細(xi)(xi)胞(bao)(bao),使之(zhi)*脫(tuo)落,然后收集細(xi)(xi)胞(bao)(bao)懸(xuan)液(ye),1200rpm離心3min,棄(qi)上(shang)(shang)清,加(jia)入(ru)*培養(yang)(yang)(yang)基(ji)重(zhong)懸(xuan)細(xi)(xi)胞(bao)(bao),進行傳代(dai)。
保(bao)存說明(ming):
凍存條件:80%*培養基+10%FBS+10%DMSO
(備注:建議(yi)使(shi)用(yong)本公(gong)司的(de)冷凍液(H-W-100),用(yong)4度保存的(de)冷凍液直接重懸細胞,不能預熱后使(shi)用(yong)。)
保存條件:液氮(dan)存儲
常見(jian)問(wen)題說明:
1.培養瓶有(you)破(po)裂,培養液(ye)有(you)漏液(ye):細胞極大可能會污染,所以我們會及(ji)時安排幫老(lao)師解(jie)決。
2.收到(dao)細(xi)胞后盡(jin)快更換為含 10%血(xue)清的(de)新(xin)鮮培(pei)養基,如(ru)因特殊情況(kuang)需(xu)要繼續使用(yong)原瓶(ping)培(pei)養基,請在原瓶(ping)培(pei)養基中額外添加 10%的(de)血(xue)清(原瓶(ping)培(pei)養基的(de)繼續使用(yong)時間zui長不(bu)宜超過 72 小時)
3.細(xi)胞(bao)(bao)(bao)漂(piao)浮(fu):培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)瓶(ping)(ping)(ping)不(bu)開封,瓶(ping)(ping)(ping)口酒精擦拭后(hou)平躺放置在培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)箱。1-2小時后(hou)觀(guan)察,如細(xi)胞(bao)(bao)(bao)大部分(fen)又貼回瓶(ping)(ping)(ping)底(di),表明(ming)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)活力正常,剩余漂(piao)浮(fu)的(de)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)可以去掉,留(liu)8-10ml培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)液培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)觀(guan)察,細(xi)胞(bao)(bao)(bao)生長(chang)至匯(hui)合度80%,進(jin)行消化傳代;如細(xi)胞(bao)(bao)(bao)還是不(bu)貼壁,將細(xi)胞(bao)(bao)(bao)離心收(shou)集轉(zhuan)到新(xin)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)瓶(ping)(ping)(ping),原培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)瓶(ping)(ping)(ping)加部分(fen)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)液繼續培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang),中間注意觀(guan)察,我(wo)們的(de)技術人員會一直跟蹤指導,直到問(wen)題解決。
供應商:慧穎(ying)細胞庫 人源均來自于第三方str鑒(jian)定(ding),請放心購買
供應(ying)限制:僅供科研使(shi)用
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SUER1257(XR) huH-1細(xi)胞(bao),肝癌細(xi)胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢價(jia)/元
SUER1258(XR) HuH28細胞, 1×106 1ml/T25 詢價/元(yuan)
SUER1259(XR) HuH-6細胞(bao),肝母細胞(bao)瘤細胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1260(XR) HuH-7細(xi)胞(bao),肝癌細(xi)胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢(xun)價(jia)/元
SUER1261(XR) HuNS1細胞, 1×106 1ml/T25 詢(xun)價/元
SUER1262(XR) HUP-T3細胞, 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1263(XR) HUP-T4細胞, 1×106 1ml/T25 詢(xun)價/元
SUER1264(XR) HuT 102細胞,霉(mei)菌病fungoides-Sezary綜(zong)合癥細胞 1×106 1ml/T25 詢(xun)價/元
SUER1939(XR) NCM460細胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1940(XR) NHEK細(xi)胞,正常人皮膚角質(zhi)細(xi)胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1941(XR) SH-EP1細胞,神經母(mu)細胞瘤(liu)細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1942(XR) SGC7901/ADR細(xi)胞 1×106 1ml/T25 詢價/元(yuan)
SUER1943(XR) TA-K細胞(bao)(bao),人甲狀腺未分(fen)化癌(ai)細胞(bao)(bao) 1×106 1ml/T25 詢價/元(yuan)
SUER1944(XR) TAM-1細胞,人(ren)涎(xian)腺腺樣(yang)囊(nang)性癌(ai)細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1945(XR) NHBE細胞,人正常支氣管上(shang)皮細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元