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COLO320細胞,人結腸癌細胞 傳代說明

發布時間(jian):2019-06-13瀏覽:1939次

細(xi)胞名稱:COLO320人結腸癌(ai)細(xi)胞

貨號:H062

種屬:人

細胞來源:從(cong)ATCC/中科院(yuan)/協(xie)和醫院(yuan)等(deng)地(di)引進

生長(chang)特(te)性(xing):懸浮貼(tie)壁混(hun)合 圓形

培養條件(jian):培養基:90%RPMI-1640+10%FBS(推薦使用(yong)HAKATA優等胎牛血清HN-FBS-50)

溫(wen)度:37℃    

氣相:95%空氣,5%二氧化碳

傳代說明:

1.用75%酒精噴灑整個(ge)培(pei)養瓶消毒,將(jiang)其(qi)平躺置于培(pei)養箱中進(jin)行1-3小時(shi)的緩沖,.然后(hou)置于無菌操作臺,打開瓶口(kou),將(jiang)其(qi)中的培(pei)養液(ye)去(qu)掉,再(zai)往其(qi)中加入5-6mL新鮮培(pei)養基(以T25培(pei)養瓶為例)并置于細胞培(pei)養箱中培(pei)養,根據細胞生長狀況(kuang)及(ji)培(pei)養基顏色變(bian)化對(dui)其(qi)進(jin)行換液(ye)以及(ji)傳代,一般2到3天換一次(ci)液(ye);

2.待細胞(bao)長滿瓶底(di)面積80%-90%,需要對(dui)其(qi)進行(xing)傳(chuan)代,傳(chuan)代比(bi)例為1:3到1:8;

3傳代(dai)步驟(zou):將0.25%胰酶(mei)(mei)-0.53 mM EDTA消(xiao)(xiao)化(hua)(hua)液(ye)置于37°預熱(re),倒掉培養(yang)(yang)(yang)瓶(ping)中(zhong)(zhong)的培養(yang)(yang)(yang)基(ji),往(wang)培養(yang)(yang)(yang)瓶(ping)中(zhong)(zhong)加(jia)入(ru)3-5 ml PBS,輕(qing)(qing)晃洗滌(di)后棄(qi)去。往(wang)瓶(ping)中(zhong)(zhong)加(jia)1-2 ml預熱(re)好(hao)(hao)的胰酶(mei)(mei),置于37°孵育(yu)消(xiao)(xiao)化(hua)(hua)(次消(xiao)(xiao)化(hua)(hua)需(xu)時常取出置于顯微鏡(jing)下(xia)觀(guan)察(cha),以顯微鏡(jing)下(xia)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)觸(chu)角回收變(bian)圓、輕(qing)(qing)拍瓶(ping)壁(bi)見細(xi)(xi)胞(bao)(bao)脫(tuo)落為(wei)*消(xiao)(xiao)化(hua)(hua)時間(jian)(jian),記錄*消(xiao)(xiao)化(hua)(hua)時間(jian)(jian),以便于下(xia)次消(xiao)(xiao)化(hua)(hua)),消(xiao)(xiao)化(hua)(hua)好(hao)(hao)后加(jia)入(ru)3ml*培養(yang)(yang)(yang)基(ji)終止(zhi)消(xiao)(xiao)化(hua)(hua)。用移(yi)液(ye)槍輕(qing)(qing)輕(qing)(qing)吹(chui)打瓶(ping)壁(bi)上(shang)(shang)的細(xi)(xi)胞(bao)(bao),使之(zhi)*脫(tuo)落,然后收集細(xi)(xi)胞(bao)(bao)懸(xuan)液(ye),1200rpm離心3min,棄(qi)上(shang)(shang)清,加(jia)入(ru)*培養(yang)(yang)(yang)基(ji)重(zhong)懸(xuan)細(xi)(xi)胞(bao)(bao),進行傳代(dai)。

保(bao)存說明(ming):

凍存條件:80%*培養基+10%FBS+10%DMSO

(備注:建議(yi)使(shi)用(yong)本公(gong)司的(de)冷凍液(H-W-100),用(yong)4度保存的(de)冷凍液直接重懸細胞,不能預熱后使(shi)用(yong)。)

保存條件:液氮(dan)存儲

常見(jian)問(wen)題說明:

1.培養瓶有(you)破(po)裂,培養液(ye)有(you)漏液(ye):細胞極大可能會污染,所以我們會及(ji)時安排幫老(lao)師解(jie)決。

2.收到(dao)細(xi)胞后盡(jin)快更換為含 10%血(xue)清的(de)新(xin)鮮培(pei)養基,如(ru)因特殊情況(kuang)需(xu)要繼續使用(yong)原瓶(ping)培(pei)養基,請在原瓶(ping)培(pei)養基中額外添加 10%的(de)血(xue)清(原瓶(ping)培(pei)養基的(de)繼續使用(yong)時間zui長不(bu)宜超過 72 小時)

3.細(xi)胞(bao)(bao)(bao)漂(piao)浮(fu):培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)瓶(ping)(ping)(ping)不(bu)開封,瓶(ping)(ping)(ping)口酒精擦拭后(hou)平躺放置在培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)箱。1-2小時后(hou)觀(guan)察,如細(xi)胞(bao)(bao)(bao)大部分(fen)又貼回瓶(ping)(ping)(ping)底(di),表明(ming)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)活力正常,剩余漂(piao)浮(fu)的(de)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)可以去掉,留(liu)8-10ml培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)液培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)觀(guan)察,細(xi)胞(bao)(bao)(bao)生長(chang)至匯(hui)合度80%,進(jin)行消化傳代;如細(xi)胞(bao)(bao)(bao)還是不(bu)貼壁,將細(xi)胞(bao)(bao)(bao)離心收(shou)集轉(zhuan)到新(xin)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)瓶(ping)(ping)(ping),原培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)瓶(ping)(ping)(ping)加部分(fen)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)液繼續培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang),中間注意觀(guan)察,我(wo)們的(de)技術人員會一直跟蹤指導,直到問(wen)題解決。

 

供應商:慧穎(ying)細胞庫 人源均來自于第三方str鑒(jian)定(ding),請放心購買

供應(ying)限制:僅供科研使(shi)用

 

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SUER1181(XR)    Hep 3B2.1-7細胞,肝癌(ai)細胞   1×106  1ml/T25 詢價/元(yuan)

SUER1182(XR)    Hep G2細胞(bao),肝癌細胞(bao)    1×106  1ml/T25 詢價/元(yuan)

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SUER1192(XR)    HMC-1-8細胞,   1×106  1ml/T25 詢價/元

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SUER1199(XR)    Hs 172.T細(xi)胞,  1×106  1ml/T25 詢價(jia)/元

SUER1200(XR)    Hs 229.T細胞,腺癌;惡性腺瘤細胞    1×106  1ml/T25 詢價(jia)/元(yuan)

SUER1245(XR)    HSC-4細胞(bao),鱗狀細胞(bao)癌,扁平上皮癌細胞(bao)   1×106  1ml/T25 詢價/元

SUER1246(XR)    HT細胞(bao),B細胞(bao)淋巴瘤(liu)不明細胞(bao)    1×106  1ml/T25 詢(xun)價(jia)/元(yuan)

SUER1247(XR)    HT-1080細胞,   1×106  1ml/T25 詢價/元

SUER1248(XR)    HT115細胞, 1×106  1ml/T25 詢價/元

SUER1249(XR)    HT-1197細(xi)胞,   1×106  1ml/T25 詢價(jia)/元(yuan)

SUER1250(XR)    HT-1376細(xi)胞(bao),移行(xing)細(xi)胞(bao)癌細(xi)胞(bao) 1×106  1ml/T25 詢價/元

SUER1251(XR)    HT-144細胞,    1×106  1ml/T25 詢價/元

SUER1252(XR)    HT-29細胞,腺癌細胞 1×106  1ml/T25 詢價/元(yuan)

SUER1253(XR)    HT55細胞,腺(xian)癌細胞  1×106  1ml/T25 詢價(jia)/元

SUER1254(XR)    HTK-細(xi)胞,漿(jiang)細(xi)胞骨髓瘤  1×106  1ml/T25 詢價/元

SUER1255(XR)    HuCCT1細胞(bao),    1×106  1ml/T25 詢(xun)價/元

SUER1256(XR)    HuG1-N細胞,    1×106  1ml/T25 詢價/元(yuan)

SUER1257(XR)    huH-1細(xi)胞(bao),肝癌細(xi)胞(bao) 1×106  1ml/T25 詢價(jia)/元

SUER1258(XR)    HuH28細胞, 1×106  1ml/T25 詢價/元(yuan)

SUER1259(XR)    HuH-6細胞(bao),肝母細胞(bao)瘤細胞(bao)   1×106  1ml/T25 詢價/元

SUER1260(XR)    HuH-7細(xi)胞(bao),肝癌細(xi)胞(bao) 1×106  1ml/T25 詢(xun)價(jia)/元

SUER1261(XR)    HuNS1細胞, 1×106  1ml/T25 詢(xun)價/元

SUER1262(XR)    HUP-T3細胞,    1×106  1ml/T25 詢價/元

SUER1263(XR)    HUP-T4細胞,    1×106  1ml/T25 詢(xun)價/元

SUER1264(XR)    HuT 102細胞,霉(mei)菌病fungoides-Sezary綜(zong)合癥細胞  1×106  1ml/T25 詢(xun)價/元

SUER1939(XR)  NCM460細胞(bao)  1×106  1ml/T25 詢價/元

SUER1940(XR)  NHEK細(xi)胞,正常人皮膚角質(zhi)細(xi)胞    1×106  1ml/T25 詢價/元

SUER1941(XR)  SH-EP1細胞,神經母(mu)細胞瘤(liu)細胞    1×106  1ml/T25 詢價/元

SUER1942(XR)  SGC7901/ADR細(xi)胞 1×106  1ml/T25 詢價/元(yuan)

SUER1943(XR)  TA-K細胞(bao)(bao),人甲狀腺未分(fen)化癌(ai)細胞(bao)(bao)  1×106  1ml/T25 詢價/元(yuan)

SUER1944(XR)  TAM-1細胞,人(ren)涎(xian)腺腺樣(yang)囊(nang)性癌(ai)細胞 1×106  1ml/T25 詢價/元

SUER1945(XR)  NHBE細胞,人正常支氣管上(shang)皮細胞  1×106  1ml/T25 詢價/元

 

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