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標(biao)題：A549-GFP細(xi)胞，GFP標(biao)記的人非小細(xi)胞肺癌(ai)細(xi)胞 傳代說明
細胞名(ming)稱：A549-GFP GFP標記(ji)的(de)人非小細胞肺(fei)癌(ai)細胞
貨號：H067
種屬：人
細胞來(lai)源：從ATCC/中科院/協和醫院等地引進
生長特(te)性：貼壁(bi) 上皮樣
培(pei)(pei)養(yang)條件(jian)：培(pei)(pei)養(yang)基：90%F-12K+10%FBS（推薦使用HAKATA優(you)等胎牛血清HN-FBS-50）
溫度(du)：37℃
氣相：95%空氣，5%二氧化碳(tan)
傳代說明：
1.用75%酒精噴(pen)灑整個(ge)培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)瓶消毒，將其(qi)平躺置于培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)箱(xiang)中進行1-3小(xiao)時的緩沖，.然后置于無(wu)菌操作臺，打開瓶口，將其(qi)中的培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)液去(qu)掉(diao)，再(zai)往其(qi)中加(jia)入5-6mL新鮮培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)基(ji)(以T25培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)瓶為例(li))并(bing)置于細胞(bao)培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)箱(xiang)中培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)，根據(ju)細胞(bao)生長狀況及培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)基(ji)顏色變化對其(qi)進行換液以及傳代，一(yi)般2到3天換一(yi)次液；
2.待細胞(bao)長滿瓶(ping)底面(mian)積80%-90%，需要對其進行傳(chuan)代，傳(chuan)代比例為1:3到1:8；
3傳(chuan)代步驟(zou)：將0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消(xiao)化(hua)液置(zhi)于(yu)(yu)37°預熱，倒掉培(pei)養瓶(ping)(ping)中的培(pei)養基，往培(pei)養瓶(ping)(ping)中加入(ru)3-5 ml PBS，輕晃洗滌后棄去。往瓶(ping)(ping)中加1-2 ml預熱好(hao)的胰酶，置(zhi)于(yu)(yu)37°孵育消(xiao)化(hua)（次消(xiao)化(hua)需時(shi)常取(qu)出置(zhi)于(yu)(yu)顯(xian)微鏡下(xia)觀察(cha)，以(yi)顯(xian)微鏡下(xia)細(xi)胞觸(chu)角回(hui)收變圓、輕拍瓶(ping)(ping)壁見細(xi)胞脫落為*消(xiao)化(hua)時(shi)間(jian)，記錄*消(xiao)化(hua)時(shi)間(jian)，以(yi)便于(yu)(yu)下(xia)次消(xiao)化(hua)），消(xiao)化(hua)好(hao)后加入(ru)3ml*培(pei)養基終止消(xiao)化(hua)。用移液槍輕輕吹打瓶(ping)(ping)壁上的細(xi)胞，使之*脫落，然后收集細(xi)胞懸液，1200rpm離心3min，棄上清，加入(ru)*培(pei)養基重懸細(xi)胞，進行傳(chuan)代。
保(bao)存說明：
凍(dong)存條件：80%*培(pei)養基+10%FBS+10%DMSO
(備注：建(jian)議(yi)使(shi)用本公司的(de)冷(leng)凍(dong)液（H-W-100），用4度(du)保存的(de)冷(leng)凍(dong)液直接重懸細胞，不(bu)能預(yu)熱后使(shi)用。)
保存(cun)條(tiao)件(jian)：液氮(dan)存(cun)儲
常見問題說明：
1.培(pei)養(yang)瓶有破(po)裂，培(pei)養(yang)液(ye)有漏液(ye)：細胞極大可能會(hui)污(wu)染(ran)，所(suo)以我們(men)會(hui)及時(shi)安排幫老師解(jie)決。
2.收到細胞后盡快更(geng)換為(wei)含 10%血清的新(xin)鮮培養基(ji)(ji)，如因特(te)殊情況需要繼(ji)續使用原(yuan)瓶(ping)培養基(ji)(ji)，請在原(yuan)瓶(ping)培養基(ji)(ji)中額外添加(jia) 10%的血清（原(yuan)瓶(ping)培養基(ji)(ji)的繼(ji)續使用時間zui長不宜(yi)超過 72 小(xiao)時）
3.細(xi)胞(bao)漂(piao)浮(fu)：培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)瓶(ping)不(bu)開封，瓶(ping)口(kou)酒精擦拭后平躺放置在培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)箱。1-2小(xiao)時后觀(guan)(guan)察(cha)，如細(xi)胞(bao)大(da)部(bu)分又貼(tie)回瓶(ping)底，表明細(xi)胞(bao)活力正常(chang)，剩余漂(piao)浮(fu)的細(xi)胞(bao)可以(yi)去掉(diao)，留8-10ml培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)液(ye)(ye)培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)觀(guan)(guan)察(cha)，細(xi)胞(bao)生長(chang)至匯合度80%，進行消化傳代；如細(xi)胞(bao)還是不(bu)貼(tie)壁(bi)，將細(xi)胞(bao)離(li)心收集轉到新培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)瓶(ping)，原(yuan)培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)瓶(ping)加部(bu)分培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)液(ye)(ye)繼續培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)，中間注意觀(guan)(guan)察(cha)，我們的技術(shu)人員會(hui)一(yi)直跟蹤指導，直到問題解決。
供應商：慧穎細(xi)胞庫 人源均來自于第三方str鑒定，請(qing)放心購買(mai)
供應限(xian)制：僅(jin)供科(ke)研使用
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SUER1253(XR) HT55細胞，腺癌(ai)細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1254(XR) HTK-細胞(bao)，漿(jiang)細胞(bao)骨髓瘤(liu) 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1255(XR) HuCCT1細胞(bao)， ; 1×106 1ml/T25 詢價(jia)/元
SUER1256(XR) HuG1-N細(xi)胞， 1×106 1ml/T25 詢價(jia)/元
SUER1257(XR) huH-1細(xi)胞(bao)，肝癌(ai)細(xi)胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1258(XR) HuH28細胞， 1×106 1ml/T25 詢(xun)價/元
SUER1259(XR) HuH-6細(xi)(xi)胞(bao)，肝母(mu)細(xi)(xi)胞(bao)瘤細(xi)(xi)胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢(xun)價/元
SUER1260(XR) HuH-7細胞(bao)，肝癌(ai)細胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢價(jia)/元
SUER1261(XR) HuNS1細胞， 1×106 1ml/T25 詢價/元(yuan)
SUER1262(XR) HUP-T3細胞， 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1263(XR) HUP-T4細胞， 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1264(XR) HuT 102細(xi)胞，霉菌(jun)病fungoides-Sezary綜合癥細(xi)胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1939（XR） NCM460細(xi)胞 1×106 ; 1ml/T25 詢價/元
SUER1940（XR） ; NHEK細胞，正(zheng)常人皮膚角質細胞 1×106 1ml/T25 詢(xun)價/元
SUER1941（XR） SH-EP1細(xi)胞，神經母細(xi)胞瘤細(xi)胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1942（XR） SGC7901/ADR細(xi)胞 1×106 1ml/T25 詢價/元(yuan)
SUER1943（XR） TA-K細(xi)胞，人甲狀(zhuang)腺未分化癌(ai)細(xi)胞 1×106 1ml/T25 詢價/元(yuan)
SUER1944（XR） TAM-1細胞(bao)，人涎腺腺樣囊性癌細胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1945（XR） NHBE細胞(bao)，人(ren)正常支氣管上(shang)皮細胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢價/元(yuan)
