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細胞名稱:hs578.t 人乳腺(xian)癌(ai)細胞
貨號:H068
種屬:人
細胞(bao)來(lai)源:從ATCC/中(zhong)科院(yuan)/協和(he)醫院(yuan)等地引進
生長特性:貼壁(bi) 上皮樣
培養條件:培養基:90%DMEM+10%FBS+10μg/ml 重組人胰島(dao)素(推薦使用HAKATA優等胎牛血清HN-FBS-50)
溫度:37℃
氣(qi)相:95%空氣(qi),5%二氧化碳
傳代說明(ming):
1.用75%酒精噴灑整個培(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)瓶消毒,將(jiang)其(qi)平躺(tang)置(zhi)(zhi)于(yu)培(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)箱中進行1-3小時的緩(huan)沖(chong),.然后置(zhi)(zhi)于(yu)無(wu)菌操作臺(tai),打開瓶口(kou),將(jiang)其(qi)中的培(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)液去(qu)掉,再往其(qi)中加入5-6mL新鮮(xian)培(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)基(以T25培(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)瓶為例(li))并置(zhi)(zhi)于(yu)細胞培(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)箱中培(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang),根據細胞生長狀況及(ji)培(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)基顏色變化對其(qi)進行換液以及(ji)傳代,一般2到(dao)3天換一次液;
2.待細胞長滿瓶底面積80%-90%,需要對其進行(xing)傳(chuan)代,傳(chuan)代比例為1:3到1:8;
3傳代步驟:將0.25%胰(yi)酶(mei)-0.53 mM EDTA消(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)液(ye)置(zhi)于(yu)37°預熱,倒掉培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)的培(pei)養(yang)基,往(wang)培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)加(jia)入(ru)3-5 ml PBS,輕晃洗滌后(hou)(hou)棄(qi)去。往(wang)瓶(ping)中(zhong)加(jia)1-2 ml預熱好(hao)的胰(yi)酶(mei),置(zhi)于(yu)37°孵育消(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)(次消(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)需(xu)時(shi)(shi)常取出(chu)置(zhi)于(yu)顯微鏡下(xia)觀察(cha),以顯微鏡下(xia)細(xi)(xi)胞觸角回收變(bian)圓、輕拍瓶(ping)壁(bi)見細(xi)(xi)胞脫落(luo)為*消(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)時(shi)(shi)間,記錄*消(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)時(shi)(shi)間,以便于(yu)下(xia)次消(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)),消(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)好(hao)后(hou)(hou)加(jia)入(ru)3ml*培(pei)養(yang)基終止消(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)。用移液(ye)槍輕輕吹(chui)打瓶(ping)壁(bi)上的細(xi)(xi)胞,使之*脫落(luo),然后(hou)(hou)收集細(xi)(xi)胞懸液(ye),1200rpm離(li)心3min,棄(qi)上清,加(jia)入(ru)*培(pei)養(yang)基重懸細(xi)(xi)胞,進行傳代。
保存說明:
凍存條件:80%*培(pei)養基+10%FBS+10%DMSO
(備注:建議使用(yong)本(ben)公司的冷凍液(ye)(H-W-100),用(yong)4度保存(cun)的冷凍液(ye)直接重(zhong)懸細胞(bao),不能預熱后使用(yong)。)
保存條件:液氮存儲
常見問(wen)題說明:
1.培養瓶有破裂,培養液(ye)有漏液(ye):細胞極大(da)可能會污染,所以我們(men)會及時(shi)安排幫老師解決(jue)。
2.收(shou)到細胞后盡快更換為含 10%血清的(de)新(xin)鮮(xian)培(pei)養基,如因(yin)特殊情況需要繼續使用原(yuan)瓶(ping)(ping)培(pei)養基,請在原(yuan)瓶(ping)(ping)培(pei)養基中(zhong)額外(wai)添加 10%的(de)血清(原(yuan)瓶(ping)(ping)培(pei)養基的(de)繼續使用時間zui長不(bu)宜超過 72 小時)
3.細(xi)胞(bao)(bao)漂浮(fu):培(pei)養(yang)瓶(ping)(ping)不開封,瓶(ping)(ping)口酒精擦拭后(hou)(hou)平(ping)躺放(fang)置在培(pei)養(yang)箱。1-2小時后(hou)(hou)觀(guan)察,如細(xi)胞(bao)(bao)大(da)部分(fen)又貼回(hui)瓶(ping)(ping)底,表明細(xi)胞(bao)(bao)活(huo)力正常,剩余漂浮(fu)的細(xi)胞(bao)(bao)可以去掉,留8-10ml培(pei)養(yang)液培(pei)養(yang)觀(guan)察,細(xi)胞(bao)(bao)生長至匯合度(du)80%,進行消化傳代;如細(xi)胞(bao)(bao)還是不貼壁,將細(xi)胞(bao)(bao)離心收集轉(zhuan)到新培(pei)養(yang)瓶(ping)(ping),原培(pei)養(yang)瓶(ping)(ping)加(jia)部分(fen)培(pei)養(yang)液繼續培(pei)養(yang),中間(jian)注意觀(guan)察,我(wo)們的技術(shu)人員(yuan)會一直跟蹤指導,直到問題(ti)解決。
供應(ying)商:慧穎細胞庫(ku) 人源均來自于第三(san)方str鑒定,請放(fang)心購買
供(gong)應限制:僅供(gong)科研(yan)使用
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SUER1172(XR) HEC-1-B細(xi)胞(bao),星形細(xi)胞(bao)瘤(liu)細(xi)胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢(xun)價(jia)/元
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SUER1250(XR) HT-1376細(xi)胞,移(yi)行細(xi)胞癌細(xi)胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1251(XR) HT-144細胞, 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1252(XR) HT-29細(xi)(xi)胞(bao),腺(xian)癌細(xi)(xi)胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1253(XR) HT55細胞,腺癌(ai)細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1254(XR) HTK-細(xi)胞(bao),漿(jiang)細(xi)胞(bao)骨髓瘤 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1255(XR) HuCCT1細(xi)胞, 1×106 1ml/T25 詢(xun)價/元
SUER1256(XR) HuG1-N細胞, 1×106 1ml/T25 詢價(jia)/元(yuan)
SUER1257(XR) huH-1細胞,肝癌細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元(yuan)
SUER1258(XR) HuH28細胞, 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1259(XR) HuH-6細(xi)胞(bao),肝母細(xi)胞(bao)瘤(liu)細(xi)胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢價/元(yuan)
SUER1260(XR) HuH-7細胞(bao),肝癌細胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢(xun)價/元(yuan)
SUER1261(XR) HuNS1細胞, 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1262(XR) HUP-T3細(xi)胞, 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1263(XR) HUP-T4細胞(bao), 1×106 1ml/T25 詢價/元(yuan)
SUER1264(XR) HuT 102細(xi)胞,霉菌病(bing)fungoides-Sezary綜合癥細(xi)胞 1×106 1ml/T25 詢價/元(yuan)
SUER1939(XR) NCM460細(xi)胞 1×106 1ml/T25 詢(xun)價/元
SUER1940(XR) NHEK細(xi)(xi)胞,正常人皮膚角(jiao)質(zhi)細(xi)(xi)胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1941(XR) SH-EP1細(xi)胞(bao)(bao),神經母細(xi)胞(bao)(bao)瘤(liu)細(xi)胞(bao)(bao) 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1942(XR) SGC7901/ADR細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1943(XR) TA-K細胞(bao)(bao),人甲(jia)狀腺未分化癌(ai)細胞(bao)(bao) 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1944(XR) TAM-1細胞,人涎腺(xian)腺(xian)樣囊(nang)性癌細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1945(XR) NHBE細(xi)胞(bao),人正常支氣(qi)管上皮細(xi)胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢價/元