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細(xi)胞名稱:ECV-304 人膀胱癌細(xi)胞
貨號:H073
種(zhong)屬:人
細胞(bao)來源:從ATCC/中科院/協(xie)和醫(yi)院等(deng)地引進
生長特(te)性:貼壁 上皮樣
培養(yang)條件:培養(yang)基(ji):80%M199+20%FBS(推薦使用(yong)HAKATA優等胎牛血清HN-FBS-50)
溫度:37℃
氣(qi)相(xiang):95%空氣(qi),5%二氧化碳
傳代說明:
1.用75%酒精(jing)噴(pen)灑整個(ge)培(pei)養(yang)瓶(ping)消毒,將其(qi)平(ping)躺置(zhi)于(yu)培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)(zhong)(zhong)進(jin)行1-3小時的緩沖(chong),.然后(hou)置(zhi)于(yu)無菌操作臺(tai),打(da)開瓶(ping)口,將其(qi)中(zhong)(zhong)(zhong)的培(pei)養(yang)液去掉,再往其(qi)中(zhong)(zhong)(zhong)加(jia)入5-6mL新鮮培(pei)養(yang)基(以T25培(pei)養(yang)瓶(ping)為例(li))并置(zhi)于(yu)細胞培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)(zhong)(zhong)培(pei)養(yang),根據細胞生長狀況及培(pei)養(yang)基顏色變化對其(qi)進(jin)行換(huan)液以及傳代,一般2到(dao)3天換(huan)一次液;
2.待細(xi)胞長滿瓶底面積80%-90%,需要(yao)對其(qi)進行傳代,傳代比例為1:3到1:8;
3傳代(dai)步驟(zou):將0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)(hua)液置于(yu)37°預熱(re),倒掉培(pei)(pei)養(yang)瓶(ping)中的(de)(de)培(pei)(pei)養(yang)基,往培(pei)(pei)養(yang)瓶(ping)中加(jia)(jia)入3-5 ml PBS,輕(qing)晃洗滌后棄去(qu)。往瓶(ping)中加(jia)(jia)1-2 ml預熱(re)好的(de)(de)胰酶,置于(yu)37°孵育消(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)(hua)(次(ci)消(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)(hua)需時(shi)常取(qu)出置于(yu)顯微鏡下(xia)觀察,以(yi)顯微鏡下(xia)細(xi)胞觸角回(hui)收變圓、輕(qing)拍瓶(ping)壁見細(xi)胞脫落為*消(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)(hua)時(shi)間(jian),記(ji)錄(lu)*消(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)(hua)時(shi)間(jian),以(yi)便于(yu)下(xia)次(ci)消(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)(hua)),消(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)(hua)好后加(jia)(jia)入3ml*培(pei)(pei)養(yang)基終止消(xiao)(xiao)(xiao)化(hua)(hua)。用(yong)移液槍輕(qing)輕(qing)吹打瓶(ping)壁上的(de)(de)細(xi)胞,使之*脫落,然后收集細(xi)胞懸液,1200rpm離心3min,棄上清,加(jia)(jia)入*培(pei)(pei)養(yang)基重懸細(xi)胞,進行傳代(dai)。
保存(cun)說明:
凍存條件:80%*培養(yang)基+10%FBS+10%DMSO
(備(bei)注:建(jian)議使用(yong)本公司的冷凍液(H-W-100),用(yong)4度保存(cun)的冷凍液直接重(zhong)懸細胞(bao),不能預熱后使用(yong)。)
保(bao)存(cun)條(tiao)件:液氮存(cun)儲
常(chang)見問題說明:
1.培養(yang)瓶有破裂,培養(yang)液(ye)有漏液(ye):細胞(bao)極大可(ke)能會污染,所(suo)以我們會及時安排幫老師解決。
2.收到(dao)細胞后盡快(kuai)更(geng)換為含 10%血(xue)清的(de)新鮮培(pei)養基(ji)(ji),如(ru)因特(te)殊情況需要繼續使用原瓶培(pei)養基(ji)(ji),請(qing)在原瓶培(pei)養基(ji)(ji)中額外(wai)添加 10%的(de)血(xue)清(原瓶培(pei)養基(ji)(ji)的(de)繼續使用時間zui長不(bu)宜超過 72 小時)
3.細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)漂(piao)浮:培(pei)養(yang)(yang)(yang)瓶(ping)(ping)不(bu)開(kai)封,瓶(ping)(ping)口酒精(jing)擦拭后(hou)平躺放(fang)置(zhi)在(zai)培(pei)養(yang)(yang)(yang)箱。1-2小時后(hou)觀(guan)察(cha),如細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)大部(bu)分又貼(tie)回(hui)瓶(ping)(ping)底,表明細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)活(huo)力正常(chang),剩余漂(piao)浮的(de)(de)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)可以去掉,留(liu)8-10ml培(pei)養(yang)(yang)(yang)液(ye)培(pei)養(yang)(yang)(yang)觀(guan)察(cha),細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)生長至匯合度80%,進行消化傳(chuan)代(dai);如細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)還是不(bu)貼(tie)壁,將細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)離心(xin)收集轉到(dao)新培(pei)養(yang)(yang)(yang)瓶(ping)(ping),原培(pei)養(yang)(yang)(yang)瓶(ping)(ping)加部(bu)分培(pei)養(yang)(yang)(yang)液(ye)繼續培(pei)養(yang)(yang)(yang),中間注意觀(guan)察(cha),我們(men)的(de)(de)技術(shu)人員會一直(zhi)跟蹤指導,直(zhi)到(dao)問題解決。
供應(ying)商:慧穎細胞庫 人(ren)源均來自(zi)于第(di)三方str鑒定,請放心(xin)購買
供應(ying)限制:僅供科研使用
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SUER1248(XR) HT115細胞, 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1249(XR) HT-1197細(xi)胞, 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1250(XR) HT-1376細胞(bao),移行細胞(bao)癌細胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢價(jia)/元(yuan)
SUER1251(XR) HT-144細胞(bao), 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1252(XR) HT-29細胞,腺癌細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1253(XR) HT55細胞,腺癌細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1254(XR) HTK-細(xi)胞(bao),漿細(xi)胞(bao)骨髓(sui)瘤(liu) 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1255(XR) HuCCT1細胞, 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1256(XR) HuG1-N細胞, 1×106 1ml/T25 詢價/元(yuan)
SUER1257(XR) huH-1細(xi)(xi)胞,肝(gan)癌細(xi)(xi)胞 1×106 1ml/T25 詢價(jia)/元
SUER1258(XR) HuH28細(xi)胞, 1×106 1ml/T25 詢價(jia)/元(yuan)
SUER1259(XR) HuH-6細胞(bao),肝母細胞(bao)瘤細胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1260(XR) HuH-7細胞,肝(gan)癌細胞 1×106 1ml/T25 詢價(jia)/元
SUER1261(XR) HuNS1細胞, 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1262(XR) HUP-T3細胞, 1×106 1ml/T25 詢(xun)價/元
SUER1263(XR) HUP-T4細胞, 1×106 1ml/T25 詢價/元(yuan)
SUER1264(XR) HuT 102細(xi)胞,霉菌病(bing)fungoides-Sezary綜合(he)癥細(xi)胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1939(XR) NCM460細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1940(XR) NHEK細胞(bao),正(zheng)常(chang)人皮膚角質細胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1941(XR) SH-EP1細胞,神經母細胞瘤細胞 1×106 1ml/T25 詢(xun)價/元
SUER1942(XR) SGC7901/ADR細(xi)胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1943(XR) TA-K細胞,人甲狀(zhuang)腺未分(fen)化癌細胞 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1944(XR) TAM-1細(xi)(xi)胞(bao)(bao),人涎腺腺樣囊性(xing)癌(ai)細(xi)(xi)胞(bao)(bao) 1×106 1ml/T25 詢價/元
SUER1945(XR) NHBE細(xi)胞(bao),人正常支氣管上皮細(xi)胞(bao) 1×106 1ml/T25 詢價/元